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严谨
作品数:
2
被引量:8
H指数:2
供职机构:
杭州师范大学钱江学院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
周金成
杭州师范大学钱江学院
王海斌
杭州师范大学钱江学院
罗冬娇
杭州师范大学钱江学院
严杰
浙江大学医学院病原生物学系
王江
浙江大学医学院病原生物学系
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健康研究
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2012
1篇
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问号钩端螺旋体lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因原核表达及其产物免疫原性分析
被引量:5
2008年
目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统,优化目的产物表达条件并对表达产物免疫原性进行鉴定。方法:采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因,并用常规基因工程方法建立其原核表达系统。采用SDS-PAGE及Bio-Rad凝胶图象分析系统,检测目的重组蛋白rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2表达量。采用免疫双扩散试验及WesternBlot,鉴定rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2的免疫原性。结果:获得了序列正确的lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统E.coliBL21DE-3pET42a-lipL32/1-lipL21-ompL1/2。表达条件优化后的rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2产量为37.78mg/L,是优化前的3.7倍。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2兔抗血清免疫双扩效价为1∶4。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2抗血清能识别rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2以及rLipL32/1、rLipL21、rOmpL1/2。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2能与问号钩体56601株全菌兔抗血清以及黄疸出血群、流感伤寒群、波摩那群、秋季群问号钩体感染患者血清出现阳性杂交信号。结论:成功地构建了lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统,表达产物具有良好的抗原性和交叉免疫反应性,可作为研制通用型问号钩体基因工程疫苗及通用型钩体病血清学检测的抗原。
罗冬娇
邱晓枫
王江
严谨
王海斌
周金成
严杰
关键词:
原核表达
情景模拟教学法在护理药理学教学中的应用
被引量:3
2012年
文章对四个年级护理本科班共480例护生分组采用情景模拟教学法和传统教学法,比较两种教学法在护理药理学中的教学效果。通过问卷调查发现,情景模拟教学在护理药理学中的应用能有效提高学生的综合学习和实践能力。
周金成
李阳
严谨
关键词:
情景模拟教学
传统教学
问卷调查
护理药理学
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