吴瑶瑶
- 作品数:2 被引量:12H指数:2
- 供职机构:浙江工业大学生物与环境工程学院更多>>
- 发文基金:浙江省重中之重学科开放基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- L-天冬氨酸α-脱羧酶工程菌株的构建及其培养条件研究被引量:8
- 2011年
- L-天冬氨酸α-脱羧酶以L-天冬氨酸为底物,脱去α-羧基后生成β-丙氨酸.利用PCR扩增技术,将Escherichia coliDH5α中的PanD基因克隆后连接到pET28c(+)载体上,先转化E.coliDH5α中,经过50μg/mL卡那霉素抗性筛选和酶切、测序验证后,转化表达菌株E.coliBL21(DE3),得到具有L-天冬氨酸α-脱羧酶活性的工程菌株E.coliBL21(DE3)/pET28c(+)-panD.经乳糖诱导该基因能有效表达C-末端具有组氨酸标签的L-天冬氨酸α-脱羧酶.通过对乳糖诱导时间、乳糖诱导质量浓度、诱导温度、诱导菌龄和培养基诱导初始pH值等发酵条件的优化,得到最佳培养条件为:乳糖诱导时间20 h,乳糖质量浓度12 g/L,诱导温度为35℃,诱导菌龄为3.5 h,诱导培养基初始pH 5.5,通过对转化产物β-丙氨酸的检测结果分析显示,工程菌株E.coliBL21(DE3)/pET28c(+)-panD在优化条件下,酶活力达186 U.
- 洪敏赵春田张正波吴瑶瑶裘娟萍白彦兵
- 关键词:工程菌
- 天冬氨酸家族主要氨基酸高产菌株的选育策略被引量:4
- 2012年
- L-苏氨酸与L-赖氨酸是L-天冬氨酸家族氨基酸(AFAAs)中的重要成员,近年来由于其在食品、化妆品、动物饲料添加剂等方面的广泛应用而备受关注,市场需求逐年上升。运用代谢工程手段构建高产菌,可有效地提高L-苏氨酸和L-赖氨酸的生产水平。本文详述了L-苏氨酸与L-赖氨酸的合成途径、调控机制以及两种氨基酸高产菌株的构建策略。
- 吴瑶瑶裘娟萍
- 关键词:L-苏氨酸L-赖氨酸代谢工程