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东方肉座菌纤维素酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达: 纤维素生物质是地球上最丰富的可再生资源，利用它可以生产燃料乙醇等生物液体燃料，进而缓解全世界日益突出的能源危机和环境污染问题。然而，由于纤维素生物质结构的特殊性，工业上将其水解为可发酵糖的生产成本过高，成为燃料乙醇炼制过...; 成奕瑾; 关键词：纤维素酶基因克隆毕赤酵母表达纤维素水解酶法水解

东方肉座菌EU7-22纤维素酶基因的克隆及序列分析被引量：4: 2012年; 东方肉座菌EU7-22与XC-9、里氏木霉、康宁木霉、黑曲霉、斜卧青霉进行产纤维素酶比较,结果表明菌株EU7-22具有较高的产纤维素酶能力及完整的纤维素酶系。根据里氏木霉和绿色木霉的外切葡聚糖酶,内切葡聚糖酶及β-葡萄糖苷酶相关基因序列,设计引物PCR扩增出菌株EU7-22 cbhⅠ、cbhⅡ、egⅠ、egⅡ及bglⅠ。基因序列经NCBI Blast分析表明,cbhⅠ与绿色木霉cbh1基因(FJ871063)同源性最高达99%;cbhⅡ与康宁木霉cbh2基因(DQ504304)同源性最高达99%;egⅠ与长枝木霉eg1基因(GU144298)同源性最高达99%;egⅡ与绿色木霉eg2基因(EF602036)同源性最高达99%;bglⅠ与菌株Trichodermasp.SSLbgl基因(FJ040193)同源性最高达100%。5种纤维素酶基因编码的相应氨基酸序列与其他木霉纤维素酶的氨基酸序列相似性也非常高。对上述纤维素酶基因编码的相应蛋白的分子量、等电点、N-糖基化位点、信号肽序列进行分析;对纤维素结合区及糖基水解酶家族特征结构区进行了定位;用SWISS-Model模拟了酶蛋白的三级结构。; 龙传南成奕瑾邬小兵刘健龙敏南; 关键词：纤维素酶基因同源性

β-葡萄糖苷酶的异源表达及与纤维素酶协同酶解竹纤维被引量：4: 2013年; 在毕赤酵母GSll5中表达东方肉座菌EU7．22的B．葡萄糖苷酶基因（bglI），获得基因工程菌株BPl7。优化BPl7发酵产酶条件后，重组β－1葡萄糖苷酶活力达121IU／mL。酶学性质研究表明，该酶最适反应温度为70℃。在60％以下有较好的热稳定性；最适催化pH为5．0，在pH3．0～8．0之间有较好的稳定性。将异源表达的B．葡萄糖苷酶添加到东方肉座菌的纤维素酶液中协同降解经过预处理的竹纤维，当纤维素酶添加量为FPA20IU／g底物，β一葡萄糖苷酶添加量为BG6IU／g底物时，纤维二糖浓度显著下降，酶解得率达到83．03％，表明重组β－葡萄糖苷酶的加入更有利于纤维素的酶解糖化。; 成奕瑾张婷黎海龙龙传南刘健龙敏南; 关键词：纤维素酶 Β-葡萄糖苷酶毕赤酵母异源表达

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成奕瑾