田小军
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
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- 青鳉鱼ERRα的克隆、序列分析、组织表达及其对不同EDCs暴露的响应被引量：4
- 2008年
- 内分泌干扰物质（EDCs）可以通过多种通道影响鱼类的生长、发育和繁殖,而雌激素相关受体（ERR）是一类目前没有引起足够重视的潜在致毒信号通道.本研究克隆了青鳉鱼（Oryzias latipes）ERRαmRNA全序列,并通过实时定量RT-PCR方法对其在不同组织中的表达和不同EDCs暴露下的响应进行了分析.发现青鳉鱼ERRα与其它脊椎动物ERRα氨基酸序列有较高的同源性,特别是DNA结合结构域（DBD）在从鱼类到哺乳类动物的进化过程中高度保守,配体结合结构域（LBD）序列与哺乳动物的LBD有66.4%-67.0%的序列相同.青鳉鱼ERRα与青鳉鱼雌激素受体ERα、ERβ和雄激素受体ARα、ARβ的DBD氨基酸数相同,且有较高序列相似性,但LBD的长度和序列差异较大.青鳉鱼ERRα基因有5个外显子组成,位于第14号染色体.青鳉鱼ERRα基因在各组织中广泛表达,其中在性腺、脑、脾脏、眼和肠中表达较高,且在雌雄性腺中差异表达,表明其在雌雄性别分化和性腺发育中发挥调控作用.暴露200 ng/L炔雌醇（EE2）、200 ng/L雌酮（E1）、200 ng/L己烯雌酚（DES）、100μg/L阿特拉津（AT）和200 ng/L雌二醇（E2）后,青鳉鱼精巢中ERRαmRNA水平分别显著下降至对照组的0.54、0.56、0.61、0.63和0.65倍（p〈0.05）,但暴露1μg/L三丁基锡和1μg/L三苯基锡后上升至对照组的1.34和1.35倍（p〉0.05）,表明ERRα可能参与外源EDCs影响鱼类性别分化和性腺发育的过程.此外,在青鳉鱼ERRα基因上游没有发现类似哺乳动物ERRα基因上游的类固醇激素反应元件半位点,说明鱼类ERRα基因的调控模式与哺乳类存在差异.
- 张照斌胡建英赛思翔赵砚彬黄崇田小军
- 关键词：内分泌干扰物雌激素相关受体实时定量PCR
