薛萌
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 4E-BP1、4E-BP1-4A重组慢病毒载体的构建及对胃癌细胞HGC27生长的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:构建4E-BP1及其T37A、T46A、S65A、T70A突变体4E-BP1-4A基因表达的重组慢病毒载体,研究其对胃癌HGC27细胞生长的影响。方法:PCR扩增4E-BP1基因及其突变体4E-BP1-4A基因并克隆到pCDH载体,构建成pCDH-4E-BP1、pCDH-4E-BP1-4A,将其与包装载体共转染293T细胞,包装成Lenti-4E-BP1及Lenti-4E-BP1-4A重组慢病毒载体,将此慢病毒感染胃癌HGC27细胞,Western印迹鉴定病毒载体介导的4E-BP1、4E-BP1-4A蛋白的表达,MTT、克隆形成和软琼脂方法研究过量表达4E-BP1、4E-BP1-4A对胃癌HGC27细胞生长的影响。结果:包装成Lenti-4E-BP1及Lenti-4E-BP1-4A重组慢病毒载体,并将此慢病毒载体感染胃癌HGC27细胞;MTT、克隆形成、软琼脂实验表明过量表达4E-BP1可抑制胃癌HGC27细胞的生长,过量表达4E-BP1-4A时抑制效果更明显。结论:构建了4E-BP1、4E-BP1-4A的重组慢病毒表达载体,在胃癌HGC27细胞中过量表达4E-BP1可抑制细胞生长,过量表达4E-BP1-4A的抑制效果更明显。
- 罗国兰王洪涛伍飞马李海量张晓清薛萌王健李山虎赵亚丽刘萱周建光
- 关键词：慢病毒载体胃癌细胞生长
- 干扰EphA3的慢病毒lentivirus-1504的构建及其对肝癌细胞7402抑制作用研究被引量：1
- 2013年
- 目的构建携带干扰癌基因EphA3的小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体,并研究其对肝癌细胞7402的生长和迁徙的影响。方法构建携带EphA3 siRNA的慢病毒载体质粒并将其与外源EphA3表达质粒共转染至人胚肾细胞293T中,Western印迹检测其干扰EphA3蛋白表达的效果。将pSIH-H1-小发夹RNA(shRNA)-1504及空载体分别与3种包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒lentivirus-1504及对照慢病毒。将所获慢病毒分别感染肝癌细胞7402,并加入嘌呤霉素(puromycin)筛选,1周后将细胞收集。Western印迹检测EphA3蛋白的表达水平,然后分别应用MTT实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验以及划痕实验检测敲低EphA3对肝癌细胞增殖能力、存活能力、恶性程度和迁移能力的影响。结果 lentivirus-1504抑制了7402细胞EphA3的表达,敲低EphA3后抑制了7402细胞的增殖能力、存活能力、恶性程度和迁移能力。结论慢病毒lentivirus-1504能够明显抑制肝癌细胞7402的生长能力、存活能力、恶性程度和迁移能力,提示EphA3可能是一个新的肝癌治疗靶点。
- 李海量王洪涛赵亚丽罗国兰张晓清薛萌潘耀振周建光
- 关键词：慢病毒感染癌基因
- PC-1基因在前列腺癌细胞系LNCaP和C4-2不同细胞周期的表达
- 2012年
- 目的:检测PC-1基因在前列腺癌细胞周期中各时间点的表达变化。方法:用200 ng/mL诺可唑(nocoda-zole)处理前列腺癌细胞系LNCaP和C4-2,16 h后使细胞处于G2/M期,在不同时间点收获细胞,分别进行流式分析和Western印迹,检测PC-1基因的表达。结果:流式分析和Western印迹结果显示,在G2/M期,LNCaP和C4-2前列腺癌细胞系中PC-1基因高表达。结论:PC-1基因的表达与前列腺癌细胞的细胞周期有关,提示PC-1可能在细胞周期调控中发挥作用。
- 薛萌施庆国王健徐峰周建光
- 关键词：PC-1基因前列腺癌细胞细胞周期
