张宁洁
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中南大学基础医学院免疫学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 沙眼衣原体感染诱导小鼠生殖道局部促炎性细胞因子的表达情况被引量：2
- 2013年
- 建立小鼠生殖道沙眼衣原体感染模型,观察小鼠生殖道局部促炎性细胞因子的表达。将小鼠生物型沙眼衣原体C. muridarum 1＆#215;104 IFU阴道接种于C57B6背景雌性小鼠,取感染后阴道拭子做沙眼衣原体培养,计算IFU,监测小鼠感染和病原体清除情况；80 d后处死小鼠,检测子宫输卵管病理改变；ELISA检测感染过程中小鼠生殖道促炎性细胞因子IL-1α、IL-6、MIP-2和TNF-α产生情况。小鼠感染在第3至第15天维持较高水平,然后病原体被逐渐清除,整个病程约3~5周；病理检测显示子宫输卵有严重炎症、管腔扩张积水,狭窄等；于感染后第3天检测到局部IL-1α、IL-6、MIP-2分泌,第7天达高峰,然后逐渐下降至正常水平（ IL-6于11 d恢复正常,IL-1α和 MIP-2于15 d恢复正常）。 TNF-α仅在第7天检测到高水平表达。相对于TNF-α和IL-6,IL-1α和MIP-2维持时间较长。成功建立沙眼衣原体感染小鼠生殖道模型,沙眼衣原体急性感染可诱导小鼠生殖道局部分泌IL-1α、IL-6、MIP-2和TNF-α。
- 陈凡张宁洁余平程文
- 关键词：沙眼衣原体生殖道感染促炎性细胞因子
- 靶向白介素-1α基因沉默的Hela229稳定细胞系的构建
- 2013年
- 目的:构建针对IL-1α基因的shRNA表达载体,筛选能够抑制Hela229细胞内源性IL-1α表达的shRNA,建立无内源性IL-1α表达的Hela229稳定细胞系。方法:根据shRNA的设计原则,以IL-1αcDNA oligo为模板设计一段21 bp核苷酸目标序列,构建成siRNA的DNA模板并克隆到shRNA表达载体pRNAT-U6.1/Neo中,获得靶向抑制IL-1α基因的重组shRNA质粒,转染Hela229细胞,经G418筛选后获得单克隆稳定细胞株,用ELISA方法在蛋白水平上检测IL-1α基因的沉默效果。结果:经酶切鉴定和测序分析确定IL-1α-shRNA重组质粒构建正确,ELISA筛选出能够显著抑制内源性IL-1α表达的shRNA,获得沉默内源性IL-1α表达的单克隆稳定的Hela229细胞株。结论:靶向IL-1α基因的重组shRNA表达质粒可显著抑制Hela229细胞内源性IL-1α的表达,成功构建靶向IL-1α基因沉默的Hela229稳定细胞系。
- 张宁洁张丽娜李伟林琳高劲松程文余平
- 关键词：IL-1ΑHELA229细胞SHRNA
- 沙眼衣原体持续感染对Hela细胞TLR4/IL-6/STAT3信号通路的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:分析沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)持续感染对靶细胞TLR4/IL-6/STAT3信号通路的影响。方法:利用Hela细胞分别建立Ct急性感染及持续性感染模型,通过qRT-PCR、ELISA等方法比较Ct感染过程中靶细胞TLR4、STAT3、IL-6转录水平及细胞因子IL-6分泌量的变化。结果:Ct感染后靶细胞TLR4、IL-6、STAT3转录水平及细胞因子IL-6分泌量均呈现时间相关性上调,且持续性感染状态下比急性感染状态下的上调更为显著;IL-6/STAT3的表达量与TLR4转录水平正相关。结论:Ct持续感染过程中TLR4的持续活化可大幅上调IL-6/STAT3信号通路表达,可能参与了Ct持续感染后慢性炎性损伤过程。
- 李伟林琳张宁洁陈恩王芙艳霍治余平
- 关键词：IL-6STAT3CT
