黄天龙
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：沈阳医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省科学事业公益研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 鼠源抗烟曲霉单链抗体库制备及鉴定
- 2016年
- 目的构建鼠源抗曲霉菌单链抗体(sc Fv)噬菌体展示文库并进行初步鉴定,为制备用于侵袭性曲霉感染实验室诊断的特异性抗体提供新的方法。方法利用噬菌体展示技术构建鼠源抗烟曲霉半乳甘露聚糖(GM)Sc Fv库,经过4轮"吸附-洗脱-扩增"淘选富集,随机挑选克隆进行可变区基因测序确定文库多样性,并用phageELISA筛选烟曲霉特异性结合的克隆。结果构建的sc Fv噬菌体表达文库,库容量约为1.8×107;经4轮富集筛选,洗脱的表达sc Fv噬菌体滴度渐增;随机挑选出4轮筛选后的20个克隆,其可变区基因序列不同;随机挑选出4轮筛选后的90个克隆,其中6个克隆与烟曲霉GM特异性结合,而与对照的白假丝酵母菌无结合。结论构建并初步鉴定了抗曲霉菌单链抗体库,库容量大,VH和VL区具备多样性;筛选的sc Fv与曲霉菌GM特异性结合,提供了快速制备、筛选GM高特异性抗体分子的新方法。
- 李新鸣孙冶海晓欧黄天龙杜歌王凤杰齐金萍肖纯凌
- 关键词：烟曲霉
