王辉
- 作品数：8 被引量：45H指数：5
- 供职机构：温州医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划温州市科技局资助项目浙江省教育厅科研计划更多>>
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- 去细胞全肾生物支架的制备与鉴定
- 通过灌注加浸泡法制备全肾细胞外基质支架,并对该生物支架进行鉴定。本实验应用健康成年SD大鼠20只,取肾,行肾动脉留置针插管,灌注压3.6 mmHg,恒温37℃依次浸泡灌注肝素化PBS溶液,0.05%胰蛋白酶溶液,1%十二...
- 张建色王辉邵培刚林贤丰彭蒙蒙薛向阳梅劲
- 去细胞全肾生物支架的制备与鉴定被引量：13
- 2012年
- 目的通过灌注加浸泡法制备全肾细胞外基质支架,并对该生物支架进行鉴定。方法健康成年SD大鼠20只,取肾,行肾动脉留置针插管,灌注压3.6mmHg,恒温37℃依次浸泡灌注肝素化PBS溶液、0.05%胰蛋白酶溶液、1%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、1%Trition X-100溶液以及含青、链霉素的PBS溶液。处理后,行DNA定量与定性分析,透射电镜、HE染色及免疫荧光观察残留细胞核成分,进一步丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂(ABS)铸型观察肾内血管分布情况。结果去细胞组DNA含量较对照组下降了97%,琼脂糖凝胶电泳未见明显DNA条带;透射电镜、HE染色及免疫荧光观察去细胞组保留了大量细胞外基质,未见明显细胞核成分残留;铸型标本显示去细胞组血管较稀疏,分支完整、清晰。结论联合酶消化法与去垢剂洗涤法,经灌注加浸泡法处理的全肾,可有效清除肾内所有细胞成分,较好地保留细胞外基质支架和血管网络结构,是一种简单易行且较为理想的制备组织工程肾生物支架的方法。
- 张建色王辉邵培刚林贤丰彭蒙蒙薛向阳梅劲
- 关键词：去细胞细胞外基质血管铸型免疫荧光
- 灌注法制备离体大鼠心脏脱细胞基质被引量：5
- 2012年
- 目的探索制备离体大鼠心脏脱细胞生物支架材料的新方法,为心脏组织工程研究提供三维立体天然支架。方法取30只成年SD大鼠心脏,运用冻融加化学萃取的组织工程学方法(胰蛋白酶、十二烷基硫酸钠和曲拉通X-100)处理离体大鼠心脏,同时观察心脏大体形态及颜色变化,并对脱细胞支架进行基因组DNA分析;HE染色,免疫荧光法,扫描和透射电镜进一步检测鉴定脱细胞支架的生物学特征。结果心脏脱细胞支架外观透明,包膜完整,维持心脏三维立体结构,肉眼可见心脏内脉管系统;脱细胞支架DNA残留量不及对照组的3%;HE染色、扫描和透射电镜结果显示,心脏脱细胞生物支架去细胞彻底,细胞外基质网状结构保留完整;免疫荧光结果表明,胶原、弹性蛋白等细胞外支架成分保留较完整,未见明显细胞核成分残留。结论运用冻融加化学萃取法所制备的离体心脏脱细胞生物支架去细胞彻底,细胞外基质保留较完整,是较为理想的心脏三维立体生物支架材料。
- 彭蒙蒙林贤丰邵培刚王辉张建色王志斌梅劲
- 关键词：脱细胞细胞外基质免疫荧光
- 四味甘温归肝肾经中药对性激素致大鼠肾阳虚的影响被引量：14
- 2008年
- 目的观察杜仲、何首乌、海马、菟丝子四味归肝肾经中药对性激素致大鼠肾阳虚的影响,认识"甘,温,归肝、肾经"中药药性的现代科学内涵。方法采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成雄性大鼠肾阳虚模型、腹腔注射丙酸睾酮造成雌性大鼠肾阳虚模型。SD大鼠70只,随机分为7组:正常对照组、模型对照组、金匮肾气丸组、杜仲组、何首乌组、海马组、菟丝子组,每组10只,灌胃给药,每日1次,连续12 d。测定大鼠抓力、肛温、睾丸指数、附睾指数、前列腺指数、精囊腺指数、卵巢指数、子宫指数。结果①杜仲、海马、菟丝子三味中药均可提高肾阳虚大鼠抓力,因其均入肝肾经从而改善腰膝酸软。②杜仲、海马、菟丝子三味中药可升高肾阳虚大鼠的肛温,因其性温从而起温煦作用。③杜仲、何首乌可升高雄性肾阳虚大鼠的睾丸指数,海马可提高雄性肾阳虚大鼠精囊腺指数,菟丝子可恢复雄性肾阳虚大鼠前列腺指数,何首乌、菟丝子可改善雌性肾阳虚大鼠的卵巢指数,四味中药能不同程度改善肾阳虚证之性欲减退、肾精亏虚等症状与其入肾经有关。结论杜仲、海马、菟丝子、何首乌四味中药能不同程度改善肾阳虚证之腰膝酸软、畏寒肢冷、性欲减退、肾精亏虚等症状相关作用,这为探讨"甘温归肝肾经"中药的共同作用规律提供了新内容。
- 陈素红吕圭源王辉汤小华吴海峰温慧萍张益勋
- 关键词：何首乌菟丝子肾阳虚肝经肾经
- 离体大鼠胰腺去细胞生物支架的制备与鉴定被引量：6
- 2012年
- 目的通过离体灌注加浸泡的方法制备大鼠胰腺去细胞生物支架(PDBC),为胰岛和胰腺的组织工程研究提供新型天然生物支架。方法健康成年大鼠20只,以物理冻融及灌注洗脱法(脱氧胆酸钠+DNAase),采用胆管、胰管联合逆向在体灌流法获取胰腺去细胞生物支架。并通过基因组DNA定量定性分析,组织化学染色、免疫荧光组织化学染色、荧光积分吸光度分析、透射电镜观察等进一步测定细胞残留以及观察去细胞支架,如胶原IV、纤维连接蛋白和层黏连蛋白等成分的保留。结果 DNA定性分析显示,实验组未见明显DNA条带,对照组DNA条带可达100bp,定量检测实验组DNA残留不足对照组的5%;组织化学染色和透射电镜观察均表明,去细胞支架无细胞残留,细胞外支架连续性完好,脉管支架保存完整;免疫荧光结果表明,胶原蛋白、弹性蛋白等细胞外支架成分保留较完整,未见明显细胞核成分残留。结论运用冻融加浸泡灌注制备的胰腺去细胞生物支架,细胞去除彻底,细胞外支架保留完好。
- 林贤丰邵营宽王辉邵培刚严夏霖陈杨金可可张建色梅劲
- 关键词：去细胞胰腺细胞外基质免疫荧光染色
- 消癥丸对激素负荷大鼠子宫肌瘤的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:观察消癥丸对雌激素、孕激素负荷大鼠子宫肌瘤的影响。方法:采用雌激素、孕激素肌注的方法制备大鼠子宫肌瘤模型。连续给药4个月,末次给药后2h取血,电化学免疫法测血清中雌激素和孕激素水平;取子宫、卵巢,计算脏器系数,进行病理组织学检查。结果:模型对照组大鼠血清雌激素水平升高,子宫重量增加,瘤样增生。与模型对照组比较,消癥丸(960mg/kg)能显著降低激素负荷大鼠的血清雌二醇水平;消癥丸(960mg/kg、1440mg/kg)能降低大鼠子宫重量及脏器系数、子宫壁厚度;改善子宫的病理组织形态学。结论:消癥丸具有抗激素负荷大鼠子宫肌瘤的作用。
- 陈素红吕圭源宗红心吕秀娟吕敏王辉刘玫琦高明
- 关键词：子宫肌瘤
- 四味甘温归肝肾经中药对性激素致肾阳虚大鼠血流变的影响被引量：10
- 2008年
- [目的]观察杜仲、何首乌、海马、菟丝子四味中药对性激素致肾阳虚大鼠血液流变学的影响,认识"甘,温,入肝、肾经"中药药性的现代科学内涵。[方法]采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成雄性大鼠肾阳虚模型、采用腹腔注射丙酸睾酮造成雌性大鼠肾阳虚模型。SD大鼠70只,随机分为7组:正常对照组、模型对照组、金匮肾气丸组、杜仲组、何首乌组、海马组、菟丝子组,每组10只。每天给予性激素造模后给药,连续12天,取血。用普利生血流变平台对大鼠的血液流变状态进行测定。[结果]何首乌、菟丝子能改善肾阳虚大鼠低切变率下的全血粘度、全血还原粘度;海马能降低血沉方程K值;菟丝子可以降低大鼠血液的聚集指数。这表明何首乌、海马、菟丝子能在不同程度上改善血液流变学,这可能与其温补入肝肾从而"养血行血"有关。[结论]何首乌、海马、菟丝子均能改善血液流变学,这为探讨"甘温归肝肾经"中药的共同规律提供了新的内容。
- 吕圭源陈素红王辉叶合温慧萍余晟汤小华张益勋
- 关键词：肾阳虚肝经肾经血流流变学
- 四味甘温归肝肾经中药对性激素致肾阳虚大鼠血生化等的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:观察杜仲、何首乌、海马、菟丝子4味归肝肾经中药对性激素致肾阳虚大鼠血生化及脏器的影响,探讨4味中药"甘,温,入肝、肾经"药性的现代科学内涵。方法:腹腔注射苯甲酸雌二醇造成雄性大鼠肾阳虚模型、腹腔注射丙酸睾酮造成雌性大鼠肾阳虚模型。金匮肾气丸,杜仲、何首乌、海马、菟丝子连续给药12天,测定大鼠血清Cr、UR、TP、ALB、AST、ALT水平,取脾、肝、肾,计算脏器指数。结果:杜仲、海马可显著降低肾阳虚大鼠血清UR水平,杜仲可显著降低肾阳虚大鼠血清Cr水平;何首乌、海马、菟丝子可显著提高肾阳虚大鼠血清TP水平,何首乌、海马可显著提高血清ALB水平,杜仲可显著降低血清ALT水平;杜仲等四味中药均能增加肾阳虚大鼠的肾指数。结论:四味中药均可不同程度补益肝肾以调理肝之疏泻,杜仲、海马可改善肾阳虚症之阳虚水泛,上述结果可为探讨"甘温归肝肾经"中药的共同规律提供实验依据。
- 王辉吕圭源陈素红汤小华余晟张益勋温慧萍吴海峰
- 关键词：肾阳虚肝经肾经血生化
