张晶
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
- 供职机构：武汉轻工大学更多>>
- 发文基金：湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目湖北省自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- LPS通过AKT/FOXO1信号通路诱导C2C12肌管细胞MuRF1基因转录被引量：2
- 2016年
- 以C2C12肌管细胞为试验材料,探讨脂多糖(LPS)诱导的炎症反应对肌管蛋白降解相关基因及信号通路的影响。选取不同质量浓度(10、100、1 000ng·mL-1)的LPS分别刺激C2C12肌管细胞30min和3h,通过RTqPCR检测炎症因子TNF-α和IL-6的基因转录,确定LPS最佳刺激浓度以建立细胞炎症模型。用最佳浓度LPS分别刺激C2C12肌管细胞0min、30min、1h、3h、6h、12h、24h,RT-qPCR检测MAFbx基因和MuRF基因在不同时间点的转录量变化。此外,1 000ng·mL-1 LPS刺激C2C12肌管细胞12h后,Western blot检测AKT/FOXO1、mTOR和P38信号通路相关蛋白质的表达情况。结果表明:LPS刺激C2C12肌管细胞的最佳浓度为1 000ng·mL-1,在作用30min和3h时均能显著上调TNF-α、IL-6的基因转录,而在刺激12和24h时MuRF1、IL-1β、IL-6和TLR4的基因转录显著上调。此外,1 000ng·mL-1 LPS刺激C2C12肌管细胞12h时,仅AKT和FOXO1蛋白磷酸化水平明显降低。基于以上结果,推测LPS通过调控AKT/FOXO1信号通路诱导C2C12肌管细胞MuRF1转录。
- 刘妍梁辉煌刘玉兰唐中林汪文俊张晶
- 不同浓度EPA和DHA对C2C12成肌细胞增殖及凋亡的影响
- 2017年
- 本试验旨在研究二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)对体外培养的C2C12成肌细胞增殖和凋亡的影响。用不同终浓度DHA和EPA(0、6.25、12.5、25、50、100μmol/L)分别作用C2C12细胞12、24、48 h后,用CCK-8法检测细胞的增殖情况;用不同终浓度DHA和EPA(0、50、100μmol/L)分别作用C2C12细胞48 h后,用TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果表明:终浓度为50、100μmol/L的EPA处理细胞48 h,C2C12细胞增殖能力受到显著抑制,但不同浓度DHA处理组细胞的增殖能力无明显变化。此外,EPA处理C2C12细胞后,TUNEL法显示凋亡细胞数增加,且100μmol/L的EPA处理组细胞凋亡最明显。然而,与对照相比,DHA处理组细胞无明显凋亡。上述结果表明,EPA能抑制C2C12成肌细胞增殖并促进其凋亡,而DHA对细胞增殖和凋亡无明显影响。
- 张琳刘妍刘玉兰张晶
- 关键词：二十碳五烯酸二十二碳六烯酸成肌细胞细胞增殖细胞凋亡
- 脂多糖刺激对仔猪肠道、肝脏和肌肉组织NODs信号通路关键基因及其负调控因子mRNA表达的影响被引量：3
- 2016年
- 本试验旨在研究脂多糖(LPS)刺激对仔猪核苷酸结合寡聚化结构域蛋白(NODs)信号通路关键基因及其负调控因子m RNA表达的影响。选取12头杜×长×大断奶仔猪,分成2个处理组,每个处理组6个重复。试验组注射100μg/kg体重的LPS,对照组注射等量的生理盐水。注射LPS或生理盐水4 h后,屠宰仔猪,取空肠、回肠、肝脏、背最长肌和腓肠肌,应用实时荧光定量PCR技术测定NODs信号通路关键基因及其负调控因子m RNA表达水平,包括NOD1、NOD2、受体相互作用蛋白激酶2(RIPK2)、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、矢车菊苷β1(ACAP1)和Erbb2相互作用蛋白(ERBB2IP)m RNA表达水平。结果表明:与对照组相比,LPS刺激显著提高了肝脏NOD1、NOD2、RIPK2、NF-κB和TNF-α,背最长肌NOD2、RIPK2和TNF-α,腓肠肌NOD2、RIPK2、NF-κB和TNF-α,空肠RIPK2和TNF-α的m RNA表达量(P<0.05),LPS刺激有提高回肠RIPK2和NF-κB m RNA表达量的趋势(P<0.10);同时,LPS刺激显著降低了空肠ACAP1和ERBB2IP,回肠和肝脏ACAP1的m RNA的表达量(P<0.05)。这表明,LPS激活仔猪肠道、肝脏和肌肉组织中NODs信号通路关键基因的表达,而抑制其负调控因子ACAP1和ERBB2IP的表达。
- 涂治骁刘玉兰吴欢听王秀英朱惠玲康萍张晶
- 关键词：仔猪脂多糖
- 亚麻籽油对脂多糖刺激仔猪肝脏Toll样受体4和核苷酸结合寡聚化结构域信号通路关键基因表达的影响被引量：3
- 2016年
- 本试验旨在研究亚麻籽油对脂多糖(LPS)刺激仔猪肝脏Toll样受体4(TLR4)和核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)信号通路关键基因表达的影响。选取24头断奶仔猪,按体重相近原则随机分为4个组,分别为对照组、LPS组、2.5%亚麻籽油组(2.5%亚麻籽油+LPS)、5.0%亚麻籽油组(5.0%亚麻籽油+LPS),每组6个重复,每个重复1头猪,试验期21 d。试验组注射100μg/kg体重的LPS,对照组注射等量的生理盐水。注射LPS或生理盐水4 h后屠宰仔猪,取肝脏,测定TLR4和NOD信号通路关键基因及相关炎性介质的mRNA表达水平。结果表明:1)LPS刺激显著提高了肝脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧酶2(COX2)、热休克蛋白70(HSP70)的mRNA相对表达量(P<0.05),2.5%亚麻籽油可显著降低COX2、TNF-α的mRNA相对表达量(P<0.05),5.0%亚麻籽油可显著降低TNF-α的mRNA相对表达量(P<0.05)。2)LPS刺激显著提高了肝脏TLR4、髓样分化因子88(My D88)、白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK1)、NOD1、NOD2、受体互作蛋白2(RIPK2)、核因子-κB(NF-κB)的mRNA相对表达量(P<0.05);2.5%亚麻籽油可显著降低NOD1、NOD2的mRNA相对表达量(P<0.05),有降低RIPK2 mRNA相对表达量的趋势(0.05≤P<0.10);5.0%亚麻籽油可显著降低NOD2的mRNA相对表达量(P<0.05)。这表明LPS刺激导致仔猪发生炎症反应,亚麻籽油可能通过抑制NOD信号通路进而缓解肝脏炎症反应。
- 陈少魁刘玉兰王海波王秀英朱惠玲张晶王树辉涂治骁
- 关键词：仔猪亚麻籽油脂多糖肝脏NOD
- 12个lncRNA在发生炎症反应仔猪骨骼肌和肝脏组织中的表达分析被引量：1
- 2017年
- 为探讨12个长链非编码RNA(lnc RNA)在发生炎症反应的仔猪骨骼肌和肝脏组织炎症反应中的差异表达,本研究选取12头(28±3)日龄、体重(9.0±0.7)kg的杜×长×大断奶仔猪,分成2个处理,每个处理6个重复;2个处理组基础饲粮相同,试验第21天,LPS组腹膜注射100μg/kg体重(BW)的LPS,对照组注射等量的生理盐水。于注射LPS或生理盐水4 h后屠宰,取骨骼肌和肝脏样品待测。结果表明:LPS刺激导致骨骼肌和肝脏组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧合酶2(COX2)和核苷酸结合寡聚域受体2(NOD2)的m RNA表达量显著提高(P<0.05);LPS刺激极显著降低骨骼肌中lnc RNA-36199.1的表达量(P<0.01);LPS刺激显著提高肝脏中lnc RNA-MEG3、lnc RNA-RP11-451G4.2、lnc RNA-27609.1、lnc RNA-32021.1、lnc RNA-46606.2和lnc RNA-36199.1的表达量(P<0.05),但显著降低lnc RNA-30795.1和lnc RNA-26244.1的表达量(P<0.05)。本试验研究表明,8种lnc RNA在LPS诱导的断奶仔猪骨骼肌或肝脏的炎症反应中存在差异表达,说明其可能参与不同组织的炎症反应。
- 张琳赵为民王胜军刘玉兰张晶
- 关键词：脂多糖断奶仔猪骨骼肌肝脏
- miR-143在肌细胞中的表达及其影响被引量：1
- 2014年
- 本试验旨在研究microRNA-143(miR-143)对小鼠肌细胞增殖和分化的影响。利用Real-time PCR方法对细胞不同分化时期进行检测,并且在小鼠肌细胞C2C12中通过转染miR-143mimics和Inhibitor对标志基因myogenin(MyoG)进行检测,然后利用免疫荧光和Western blotting方法对组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)基因表达水平进行检测。结果表明,miR-143与肌细胞的增殖和分化密切相关,过表达miR-143后,肌细胞标志基因MyoG出现下调,敲低后结果相反,且在分化细胞中过表达miR-143,免疫荧光和Western blotting结果显示,标志基因MHC的表达水平下降。因此,miR-143是一个潜在的影响肌肉生长发育的microRNA,为以后肌肉发育和功能的研究提供了一个新的资料。
- 王辰张晶谢炳坤周荣李奎唐中林
- 关键词：骨骼肌C2C12细胞MIR-143MYOG增殖分化
- 敲低RACK1基因抑制C2C12细胞中MyoG和MHC基因表达被引量：1
- 2017年
- 本实验旨在研究RNA干扰(RNAi)RACK1基因对C2C12成肌细胞中肌分化标志基因MHC和MyoG表达的影响。将人工合成的靶向RAKC1基因的3条si RNA(1,2,3)转染C2C12细胞,用RT-qPCR方法检测并筛选干扰效率最高的1条siRNA。将筛选出的si RNA转染C2C12成肌细胞并诱导细胞分化,通过RT-qPCR、Western blot和免疫荧光方法在mRNA及蛋白水平检测RACK1基因沉默后对MHC和MyoG表达的影响。此外,Western blot方法检测RACK1基因沉默后对PI3K/Akt和Erk/MAPK通路激活的影响。结果表明:RACK1-si RNA-2干扰效率最高,转染48 h后抑制率可达70%。随后,C2C12细胞转染si RNA-2,诱导分化48h后RTqPCR表明,MHC和MyoG的m RNA表达均显著性下调(P<0.05);诱导分化72 h后,Western blot和免疫荧光结果表明MHC和MyoG的蛋白表达明显低于对照组,但AKT和Erk磷酸化水平未见明显变化。上述结果表明,干扰RACK1能显著抑制MHC和MyoG的表达,提示RACK1正向调控C2C12成肌细胞的分化。
- 张晶王胜军刘妍汪文俊刘玉兰
- 关键词：肌细胞生成素肌球蛋白重链
- 炎症反应致肌肉蛋白质降解机理的研究进展被引量：4
- 2016年
- 骨骼肌消耗是肌肉蛋白质合成减少和(或)分解代谢加快的结果,可发生于多种疾病状态下,如病原菌感染、创伤、肿瘤等。目前越来越多的研究结果表明系统性炎症在肌肉蛋白质降解过程中扮演着重要角色。作者综述了近年来关于炎症反应导致肌肉蛋白质降解机理的研究进展,主要包括泛素—蛋白酶体途径、自噬溶酶体降解途径及PI3K/Akt、p38/MAPK、NF-κB等多条信号通路,为开发新的方法治疗肌肉降解提供参考。
- 王胜军刘妍刘玉兰汪文俊张晶
- 关键词：骨骼肌消耗蛋白质降解炎症反应
