李娜
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：昆明理工大学理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程理学更多>>
- 灵芝细胞中异源表达透明颤菌血红蛋白基因提高胞外多糖的产量被引量：5
- 2017年
- 在灵芝(Ganoderma lingzhi)中异源表达透明颤菌血红蛋白(Vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因,采用一氧化碳差异波谱分析的方法检测转基因菌株的生物活性,并对野生型菌株和工程菌株进行发酵,通过荧光定量PCR对灵芝多糖生物合成途径上的葡萄糖磷酸变位酶(α-phosphoglucomutase,PGM)、尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(uridinediphosphate glucose pyrophosphorylase,UGP)和β-1,3-葡聚糖合酶(β-1,3-glucan synthase,GLS)3个基因的转录水平进行分析。研究表明:透明颤菌血红蛋白基因(Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb)在灵芝中能够成功表达,并且具有生物活性;工程菌株中胞外多糖的最高产量达0.83g/L,比野生型菌株提高了88.6%;与野生型菌株相比,工程菌株中多糖生物合成途径上PGM、UGP和GLS基因的相对表达量分别是1.52、1.55和3.85。异源表达透明颤菌血红蛋白基因是提高灵芝胞外多糖产量的一种有效方法。
- 刘柯李焕军张德怀岳同辉李娜徐军伟
- 关键词：灵芝葡萄糖磷酸变位酶
- 基于半参数混合效应模型的最优模型平均预测
- 2023年
- 在对纵向数据的预测过程中,通常会遭遇模型的不确定问题.为了解决模型不确定性问题,文章提出一种基于半参数混合效应模型的最优模型平均预测方法.文章提出采用删组交叉验证的方法获得最优权重向量的估计,进而获得最终的模型平均预测值.理论上,文章证明了当所有候选模型均误设定时,所提出的模型平均估计具有渐近最优性.即,提出的模型平均估计量的二次损失渐近地达到了用该集合中权重进行加权的所有模型平均估计的二次损失下确界.另一方面,当候选模型中包含正确模型时,证明了提出的权重估计方法,在大样本意义下能够将权重分配给正确模型.模拟和实际数据分析表明,所提出的模型平均估计方法与一些常用的方法相比具有较好的预测性能.
- 常宝群吴刘仓李娜
- 关键词：渐近最优性
- 灵芝悬浮培养中添加微颗粒Talc对灵芝酸产生的影响被引量：6
- 2020年
- 灵芝酸是灵芝中重要的药理活性物质,其低产量限制了它的广泛应用和深入研究,高效提高液体发酵中灵芝酸的含量十分必要。以CGMCC5.65为材料,在悬浮培养条件下,研究添加微颗粒Talc对灵芝酸产生的影响。结果表明,微颗粒Talc添加显著减小了灵芝细胞粒径,对照组为(3.33±0.16)mm,15g/L微颗粒Talc添加组为(2.04±0.12)mm。灵芝细胞中单体灵芝酸和总灵芝酸的含量在微颗粒Talc添加条件下也显著提高。15g/L微颗粒Talc添加组的总灵芝酸含量达到(1.51±0.02)mg/100mg细胞干重,GA-Mk、GA-T和GA-Me的含量最高为(6.02±0.29)、(5.08±0.14)和(1.71±0.09)μg/100mg细胞干重,分别是对照的1.6、4、1.9和1.4倍。另外,15g/L微颗粒Talc添加条件下鲨烯和羊毛甾醇的最大积累量分别为(3.69±0.23)和(34.86±6.41)μg/100mg细胞干重,是对照的2.6和4.2倍;灵芝酸生物合成途径关键基因fps和cyp-5150l8的表达量最高为对照的2.35和1.53倍。
- 王俊杰李娜余旭亚赵鹏李涛徐军伟
- 关键词：灵芝灵芝酸
- 信号转导工程及基因工程在悬浮培养灵芝细胞生产灵芝酸中的应用被引量：1
- 2016年
- 灵芝酸是灵芝中的主要活性成分之一,现代药理和临床研究表明,灵芝酸具有毒杀肿瘤细胞、抑制癌细胞转移、抗HIV-1和HIV-1蛋白酶等功能。目前悬浮培养灵芝细胞法是大规模生产灵芝酸的重要策略,具有很好的应用潜力和前景。近些年,有大量的文献报道通过不同方式提高灵芝细胞中灵芝酸的含量,并取得了一定进展。文章主要从信号转导调控、诱导子策略和基因工程等方面综述了近年来悬浮培养生产灵芝酸的研究进展,并对以后通过调控代谢通路和合成生物学实现灵芝酸的高效生产进行了展望。
- 岳同辉姜露熙李焕军李娜徐军伟
- 关键词：生物合成基因工程
- 与灵芝酸生物合成相关的细胞色素P450基因的筛选与分析被引量：1
- 2018年
- 首先采用荧光定量PCR的方法通过分析在液体静置和振荡培养条件下基因的表达量对灵芝(Ganoderma lingzhi)细胞中14个与类固醇结合的P450基因进行筛选;其次在不同培养条件下(振荡、静置、静置钙离子添加和静置氮缺陷)通过分析灵芝酸T积累与P450基因表达的相关性对差异表达显著的P450基因进行进一步筛选;最后通过反义RNA技术对所筛选出的基因进行沉默,分析在灵芝细胞内沉默该基因对灵芝酸T含量的影响。结果表明:14个P450基因中,5个基因(cyp512a3、cyp512a11、cyp5144n1、cyp512u4、cyp512v2)的表达量在静置培养条件下显著高于振荡培养条件,差异表达倍数分别为7.2、3.7、3.4、89.8、63.4;cyp512v2基因的表达与灵芝酸T的积累显著相关;三株cyp512v2基因沉默效率较高的菌株中灵芝酸T含量分别比野生型菌株的含量降低13%、69%、66%,表明cyp512v2在灵芝酸T的生物合成过程中具有重要的作用。
- 姜露熙王俊杰李娜徐军伟
- 关键词：灵芝灵芝酸甲羟戊酸途径细胞色素P450反义RNA技术
