武健
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:北京市科技新星计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 野生型SLC26A4基因表达载体的构建及在HEK 293细胞中的表达被引量:1
- 2011年
- 目的构建含有野生型SLC26A4基因和绿色荧光蛋白基因(pEGFP,enhanced green fluorescent protein)的真核共表达载体,为指导临床SLC26A4相关耳聋的基因诊断及产前诊断奠定实验基础。方法应用基因重组技术和限制性内切酶酶切及基因测序方法,构建并鉴定pEGFP-SLC26A4真核表达质粒。经脂质体介导转染HEK293细胞系,荧光显微镜下观察pEGFP-SLC26A4真核表达质粒在HEK293细胞系中的表达,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SLC26A4mRNA的表达,利用Western Blot(蛋白印迹)方法检测Pendrin的表达。结果阳性重组子经酶切鉴定含有SLC26A4基因片段,基因测序结果与GenBank中SLC26A4序列相同。重组pEGFP-SLC26A4真核表达质粒转入HEK293细胞系后24小时,荧光显微镜下可见绿色荧光表达,RT-PCR能够扩增出SLC26A4的条带,Western Blot检测出87kDa大小的蛋白。结论本文成功地构建了含有人全长SLC26A4基因和pEGFP基因的真核共表达载体,且能在哺乳动物HEK293细胞系中表达。
- 武健张国正杨仕明戴朴袁永一
- 关键词:SLC26A4质粒
- 耳内镜在耳科门诊的应用被引量:2
- 2009年
- 目的探讨耳内镜在耳科门诊的应用情况。方法统计、分析解放军总医院2004年10月-2009年6月门诊耳内镜4 519例次诊治记录。结果应用最多的前10位依次为慢性中耳炎(1 607例次)、未见明显异常(991例次)、正常外耳道和鼓膜(713例次)、鼓膜穿孔(678例次,其中外伤性为49例次)、外耳道胆脂瘤(96例次)、外耳道肿物(70例次)、乳突根治术后(66例次)、鼓室成形术后(57例次)、鼓膜修补术后(40例次)、渗出性中耳炎与外耳道狭窄/闭锁(各为24例次)、外伤后(19例次)。结论耳内镜在耳科门诊的应用范围广,在外伤、观察鼓膜、鼓室情况、术后随诊,资料保存等方面具有显著优势。
- 邹艺辉杨仕明武健刘会占张贵娟孙艳松
- 关键词:耳科耳内镜