王金鑫
- 作品数：7 被引量：18H指数：2
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技支撑重点项目天津市科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 内质网-线粒体应激双向调节机制研究进展被引量：1
- 2019年
- 机体由于体内外刺激(如脑缺血或机体损伤等),为维持内环境稳态,会首先在细胞器水平上进行适应性调节,包括内质网应激、线粒体非折叠蛋白反应等;而内环境失衡无法缓解时,则引起细胞凋亡以实现细胞整体水平调节,此过程中内质网和线粒体的双向调节机制发挥了重要作用。文章探究内质网-线粒体应激的双向调节机制及其进展。论述机体发生应激时,内质网-线粒体的双向调节机制及二者内在联系,同时分析麻醉药物对其影响的研究进展。通过研究内质网-线粒体的双向调节机制及相关通路,以及麻醉药物对于内质网应激联合线粒体的协同作用机制的影响,可以为围手术期器官保护和麻醉药合理使用提供新思路。
- 王金鑫王海云
- 关键词：内质网应激线粒体
- 体外构建合成成纤维细胞生长因子-1mRNA及其表达的初步研究被引量：1
- 2015年
- 目的:参照m RNA稳定性理论,设计并体外转录合成具有一定稳定性的FGF1 m RNA,对其表达进行初步验证。方法:在p T7TS载体上加poly A、βglobin 3′、5′UTR,增加GC含量优化设计FGF1序列,并结合m RNA二级结构分析其稳定性,目的序列琼脂糖凝胶电泳及测序验证后,体外转录合成FGF1 m RNA,待浓度及片段大小验证后,行动物实验,通过ELISA法检测FGF1 m RNA表达。结果:二级结构分析显示,优化后FGF1序列稳定性更高;双酶切后琼脂糖凝胶电泳显示p T7TS-FGF1重组载体构建成功,测序验证正确;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示合成m RNA大小正确。ELISA检测显示,实验组(92.48 pg/m L)小鼠血清中FGF1蛋白含量较对照组(13.59 pg/m L和15.54 pg/m L)明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);对照组间FGF1蛋白含量接近,二者无统计学差别(P>0.05)。结论:成功构建并体外转录合成稳定的FGF1 m RNA,m RNA与鱼精蛋白结合后回输小鼠在体内成功表达。
- 吴志敏李光明白洁王金鑫贾欣雨杜晓玲朱泽
- 关键词：体外转录MRNA稳定性
- 七氟醚复合丙泊酚麻醉对轻度认知功能障碍大鼠术后脑组织hnRNPA2表达的影响被引量：9
- 2019年
- 目的评价七氟醚复合丙泊酚麻醉对轻度认知功能障碍(MCI)大鼠术后脑组织核不均一性核糖核蛋白A2(hnRNPA2)表达的影响。方法雄性SD大鼠,16~18月龄,采用结扎双侧颈总动脉致其重度狭窄的方法建立MCI模型。取MCI模型制备成功的大鼠48只,采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(SH组)、七氟醚麻醉组(S组)、丙泊酚麻醉组(P组)和七氟醚复合丙泊酚麻醉组(SP组)。S组吸入3%七氟醚;P组静脉输注丙泊酚40 mg·kg^-1·h^-1;SP组吸入1.7%七氟醚,静脉输注丙泊酚20 mg·kg^-1·h^-1。3组麻醉时间均为3 h。待大鼠翻正反射消失后,行胫骨骨折切开复位内固定术。术后7 d时行Y迷宫实验,计算新异臂(N臂)停留时间百分比;行旷场实验,记录活动总路程和中央区活动时间;然后处死大鼠,取脑组织,分别采用免疫荧光法和Western blot法测定海马hnRNAP2和γ-氨基丁酸A型受体α1亚基(GABAA-α1)的表达水平。结果与SH组比较,S组和P组N臂停留时间百分比降低,海马hnRNPA2表达上调,GABAA-α1表达下调,SP组海马hnRNPA2表达上调(P<0.05),N臂停留时间百分比和海马GABAA-α1表达差异无统计学意义(P>0.05);与S组或P组比较,SP组N臂停留时间百分比升高,海马hnRNPA2表达下调,GABAA-α1表达上调(P<0.05);4组间活动总路程及中央区活动时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论七氟醚复合丙泊酚麻醉不加重MCI大鼠术后认知功能障碍的机制可能与上调脑组织hnRNPA2表达,维持GABAA-α1稳定表达有关。
- 王金鑫王海云李唐陈一萌杨陈祎
- 关键词：二异丙酚
- 成纤维细胞生长因子21对胰岛素抵抗肝细胞葡萄糖摄取的影响及机制被引量：1
- 2017年
- 目的观察体外合成成纤维细胞生长因子21(FGF21)对胰岛素抵抗(IR)肝细胞葡萄糖摄取的影响,并探讨其机制。方法体外合成具有一定稳定性的荧光标记的FGF21 mRNA。将肝细胞置于含34.4μg/mL重组胰岛素和1μg/mL地塞米松及10%FBS的RPMI-1640培养基中培养72 h,诱导建立IR肝细胞模型,将其分为模型对照组,胰岛素组和FGF21组。模型对照组不添加任何药物,胰岛素组加入1μg/mL重组胰岛素,FGF21组电转入FGF21 mRNA。采用葡萄糖氧化酶法测定3组细胞培养液中的葡萄糖含量,计算葡萄糖吸收量;实时荧光定量PCR方法检测3组葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)mRNA表达,Western blotting法检测3组GLUT1蛋白表达。结果与模型对照组相比,FGF21组葡萄糖吸收量升高,细胞GLUT1 mRNA及蛋白表达升高(P均<0.05)。与模型对照组相比,胰岛素组葡萄糖吸收量不明显,细胞GLUT1 mRNA及蛋白表达无明显差异(P均>0.05)。结论体外合成的FGF21 mRNA可以改善IR肝细胞对葡萄糖的摄取,其机制与增加GLUT1表达有关。
- 白洁王金鑫宋紫暄吴志敏高雁朱泽李光明
- 关键词：成纤维细胞生长因子21葡萄糖转运蛋白1葡萄糖摄取胰岛素抵抗肝细胞
- 丙泊酚复合七氟烷麻醉对轻度认知功能障碍大鼠海马GABA A受体α1/α2亚基稳态的影响被引量：6
- 2020年
- 目的:评价丙泊酚复合七氟烷麻醉对轻度认知功能障碍(MCI)大鼠海马GABA A受体(GABA AR)α1/α2亚基稳态的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠,16~18月龄,体重450~550 g,采用结扎双侧颈总动脉的方法建立MCI模型。造模后30 d时采用Morris水迷宫实验筛选造模成功的MCI大鼠。取造模成功的MCI大鼠72只,采用随机数字表法分为4组(n=18):假手术组(Sham组)、七氟烷麻醉组(S组)、丙泊酚麻醉组(P组)和丙泊酚复合七氟烷麻醉组(SP组)。S组吸入3%七氟烷3 h;P组静脉输注丙泊酚40 mg·kg^-1·h^-1 3 h;SP组吸入1.7%七氟烷,同时静脉输注丙泊酚20 mg·kg^-1·h^-1 3 h。S组、P组和SP组行胫骨骨折切开复位内固定术。术后14 d时行Y迷宫实验测试认知功能;采用Western blot法测定海马钾离子-氯离子共转运体2(KCC2)、钠钾氯协同转运蛋白1(NKCC1)、GABA ARα1和GABA ARα2的表达水平。结果:与Sham组比较,S组和P组N臂停留时间百分比降低,海马KCC2和GABA ARα1表达下调,NKCC1和GABA ARα2表达上调(P<0.05),SP组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05);与S组或P组比较,SP组N臂停留时间百分比升高,海马KCC2和GABA ARα1表达上调,NKCC1和GABA ARα2表达下调(P<0.05)。结论:丙泊酚复合七氟烷麻醉不加重MCI大鼠术后认知功能障碍的机制可能与其维持海马GABA ARα1/α2亚基稳态有关。
- 李冬雪王海云王金鑫杨陈祎
- 关键词：二异丙酚GABA-A认知功能障碍
- 应用双侧颈动脉狭窄术建立血管性认知功能障碍大鼠模型及病理机制初步探索
- 目的：探究双侧颈动脉狭窄大鼠作为早期血管性认知功能障碍及轻度认知功能障碍大鼠模型的可行性。研究双侧颈动脉狭窄与双侧颈动脉闭锁大鼠作为血管性认知功能障碍模型的差异性，以及轻度缺氧对神经元中hnRNPA2-GABAAR-α1...
- 王金鑫
- 关键词：血管性认知功能障碍神经元
- 文献传递
- 体外合成JSRV mRNA及其体内表达特异性中和抗体的研究被引量：1
- 2017年
- 目的:应用假病毒中和法检测体外合成JSRV-env mRNA免疫小鼠产生的特异性抗体。方法:优化PT7TS载体序列,插入目的序列经电泳测序验证后,体外转录合成JSRV-env mRNA,将mRNA与鱼精蛋白结合后皮下注射免疫BALB/c小鼠。采用慢病毒包装系统制作JSRV假病毒,测定假病毒滴度,取不同组免疫小鼠血清进行假病毒为基础的抗体中和实验,检测小鼠体内针对JSRV-env mRNA的特异性抗体。结果:成功体外合成具有稳定性的JSRV-env mRNA;重组了基于慢病毒质粒结构的JSRV假病毒,且具有感染能力;假病毒体外中和实验检测出JSRV-env mRNA免疫小鼠体内产生了针对JSRV的特异性抗体。结论:针对JSRV病毒包膜的信使RNA,经皮下注射到小鼠体内,能够表达产生针对JSRV-env的中和抗体。
- 白洁李光明王金鑫宋紫暄吴志敏高雁朱泽
- 关键词：中和抗体小鼠
