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铜绿假单胞菌噬菌体PaP3多糖解聚酶基因PSD的克隆表达及活性鉴定的研究: 细菌生物膜是指被自身产生的外部多糖基质,纤维蛋白,脂蛋白等包裹着的菌细胞的结构群体,作为一种普遍存在的自然现象,它在细菌的黏附,定植和抗吞噬方面发挥着重要的作用。它赋予细菌对各种因素的抵抗力也是许多持续性和慢性细菌感染的...; 贾鸣; 关键词：胞外多糖蛋白纯化; 文献传递

铜绿假单胞菌噬菌体PaP1多糖水解酶的克隆表达及活性分析: 细菌生物膜通过粘附、定植、抗吞噬、和对环境的高耐受性而突现其在医学中的重要意义,且被膜菌对常用抗生素都不敏感。故寻找控制细菌生物膜的有效措施,已成为当务之急。研究表明,噬菌体能产生多糖水解酶降解细菌胞外多糖,从而有可能成...; 孙卫忠胡晓梅贾鸣胡福泉; 文献传递

噬菌体PaP3多糖解聚酶对铜绿假单胞菌生物膜的作用研究被引量：9: 2008年; 目的检测重组铜绿假单胞菌噬菌体PaP3多糖解聚酶对铜绿假单胞菌生物膜的降解活性。方法经FITC-ConA/PI荧光双染色后,采用激光扫描共聚焦显微镜观察重组多糖解聚酶处理前后PA3生物膜的形态变化,以测定多糖解聚酶对生物膜的降解活性;测定多糖解聚酶作用前、后铜绿假单胞菌对4种敏感抗生素(乳酸环丙沙星、加替沙星、头孢他啶、硫酸庆大霉素)的MIC、MBC变化情况,从而判断多糖解聚酶对抗生素的协同杀菌作用。结果FITC-ConA/PI荧光双染色结果显示,经重组多糖解聚酶处理后,铜绿假单胞菌生物膜的胞外多糖组分少而分散,包裹在胞外多糖组分里的细菌数量也大大减少,表明多糖解聚酶确实能够特异性的降解生物膜的胞外多糖组分。多糖解聚酶作用后四种抗生素相应的MIC、MBC都出现了不同程度的降低,其中以头孢他啶降低最为明显,表明多糖解聚酶对抗生素具有协同杀菌活性。结论重组噬菌体PaP3多糖解聚酶在体外可以特异性的降解铜绿假单胞菌生物膜的胞外多糖,有利于抗生素通透生物膜,作用于菌体,具有协同抗菌作用。; 贾鸣胡晓梅孙卫忠饶贤才胡福泉; 关键词：铜绿假单胞菌细菌生物膜

细菌生物被膜的耐药机制及控制策略被引量：21: 2008年; 在特定的条件下,细菌可以形成生物被膜,包被有生物被膜的细菌称为被膜菌。被膜菌无论其形态结构、生理生化特性、致病性还是对环境因子的敏感性等都与浮游细菌有显著的不同,尤其对抗生素和宿主免疫系统具有很强的抵抗力,从而导致严重的临床问题,引起许多慢性和难治性感染疾病的反复发作。细菌生物被膜粘附在各种医疗器械及导管上极难清除,以至引发大量的医源性感染。近年来,随着人们对细菌致病机制认识的逐步深入,控制细菌生物被膜的方法已有较大发展。本文拟探讨被膜菌的耐药机制并着重综述细菌生物被膜控制方法的最新研究进展。; 贾鸣胡晓梅胡福泉; 关键词：细菌生物被膜耐药机制

铜绿假单胞菌噬菌体PaP3多糖解聚酶基因的克隆表达及生物学活性被引量：3: 2008年; 目的:克隆表达铜绿假单胞菌噬菌体PaP3多糖解聚酶基因并检测其活性.方法:应用PCR技术从铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组中扩增多糖解聚酶基因,将其克隆于原核表达载体pQE-31中,所构建的重组质粒经测序鉴定后转化大肠埃希菌JM109,IPTG诱导表达;采用Ni-NTA柱亲和层析分离纯化目的蛋白;提取铜绿假单胞菌生物膜胞外多糖,观察目的蛋白对胞外多糖的降解活性.结果:采用PCR技术成功扩增了铜绿假单胞菌噬菌体PaP3多糖解聚酶基因,所构建的重组质粒经酶切及测序鉴定与设计序列一致;转化E.coliJM109后,IPTG诱导目的蛋白表达率约为25%;SDS-PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约为20.4×103,与理论预期值一致;破菌后电泳证实目的蛋白主要在上清中以可溶形式表达.经Ni-NTA柱亲和层析后蛋白纯度大于95%.初步活性检测结果表明重组PaP3多糖解聚酶蛋白对生物膜胞外多糖具有一定的降解作用.结论:重组噬菌体PaP3多糖解聚酶在体外可以特异性的降解铜绿假单胞菌的胞外多糖,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.; 贾鸣胡晓梅孙卫忠饶贤才丛延广胡福泉; 关键词：假单胞菌铜绿细菌噬菌体胞外多糖

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贾鸣