彭姗
- 作品数:3 被引量:50H指数:3
- 供职机构:石河子大学绿洲农作物病害防控重点实验室更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 棉花黄萎病菌遗传转化载体构建和农杆菌转化被引量:6
- 2007年
- 载体构建是建立真菌遗传转化体系的基础。本研究以pCAMBIA1305.1双元载体为基本骨架,构建棉花黄萎病菌遗传转化T-DNA质粒双元载体,通过限制性内切酶酶切、补平、连接以及去磷酸化等措施将pCAMBIA1305.1上Hygromycin抗性基因的CaMV 35S启动子替换成构巢曲霉的trpC启动子。经大肠杆菌转化后对转化子进行酶切验证,并将新构建的载体1305-3分别转入农杆菌菌株LBA4404和EHA105。为农杆菌介导的黄萎病菌遗传转化体系的建立和优化提供了存在于不同农杆菌菌株中的供试载体。
- 彭姗李静杜娟李晖
- 关键词:黄萎病菌棉花
- 棉花黄萎病菌插入突变体库的构建及致病相关基因DVK1的克隆与鉴定被引量:6
- 2011年
- 利用ATMT(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation)技术自建Verticillium dahliae强致病力落叶型菌株T-DNA插入突变体库,共获得5000个转化子;随机挑选1000个转化子进行致病力鉴定,筛选获得5株致病力衰退的突变体。挑选致病力下降最为明显的突变体d1,通过TAIL-PCR技术最终获得一段长3237 bp的DVK1全长cDNA序列,编码1079个氨基酸的蛋白。基于DNA序列比对发现,DVK1基因含有2个内含子,分别为52 bp和36 bp。进一步比对发现T-DNA插入到DVK1基因启始密码上游740 bp的启动子中。通过遗传互补实验d1恢复了致病性,进一步证明DVK1基因与黄萎菌致病性相关。
- 高峰彭姗彭晓玲李晖李国英
- 关键词:T-DNA插入基因克隆棉花黄萎病
- 一种新的棉花黄、枯萎病快速接种方法的研究被引量:40
- 2008年
- 3种不伤根的棉花黄、枯萎病接种方法,即全生育期的田间病圃鉴定法、液体培养棉花苗期孢子悬浮液浸根法和土壤种植棉花苗期孢子悬浮液灌根法进行对比,结果表明,液体培养棉花苗期孢子悬浮液浸根法(接种浓度为107个分生孢子.mL-1)全周期只需要30d。通过这种方法,不仅可以鉴定出棉花品种对黄、枯萎病菌的抗、感病性,还可以鉴定不同黄、枯萎病菌菌株的致病力。对比不同浸根接种时间(10min、20min、30min、40min、50min、60min)对结果的影响,发现浸根接种40min可加快发病,鉴定结果和田间病圃鉴定的比较一致。
- 彭姗吕学莲高峰李国英李晖
- 关键词:棉花枯萎病黄萎病接种方法