高瑜
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：吉林省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 羊草CDPK基因全长cDNA的克隆及原核表达被引量：3
- 2015年
- 【目的】通过对羊草Leymus chinensis CDPK基因进行克隆及原核表达,为进一步研究CDPK基因的功能,探讨羊草适应生境分子机制提供理论基础.【方法】用RT-PCR结合RACE技术克隆了羊草钙依赖蛋白激酶（CDPK）基因,命名为Lc-CDPK;构建了羊草CDPK基因的原核表达载体,转化到大肠埃希菌Escherichia coli BL21（DE3）,异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导后,经SDS-PAGE分析CDPK蛋白的表达情况.【结果和结论】羊草CDPK基因全长c DNA序列为1 704 bp,包括1个1 647 bp的开放阅读框,编码548个氨基酸,从第81~339个氨基酸构成了具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化活性的S-TKc结构域,有4个保守的EF手型结构域;编码区核苷酸序列与其他禾本科作物比对后发现,与小麦CDPK基因的相似性最高,相似度为96%;IPTG诱导表达出相对分子质量为61 350的融合蛋白,表达产物大小与预计理论值相符.诱导7 h蛋白表达量最高,表达量占菌体总蛋白的49.1%.
- 崔喜艳秦思余刘忠野高瑜蒋载阳郭继勋
- 关键词：羊草基因克隆原核表达
