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包力高
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
内蒙古农业大学生物工程学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
王和平
内蒙古农业大学生物工程学院
周平
内蒙古农业大学生物工程学院
蔺日胜
内蒙古农业大学生物工程学院
赵丽霞
内蒙古农业大学生物工程学院
包晓兰
内蒙古农业大学生物工程学院
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内蒙古农业大...
年份
1篇
2007
共
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β-甘露聚糖酶基因重组整合组成型表达载体的构建
被引量:1
2007年
应用PCR方法从P.pastorisGS115染色体中扩增了GAP启动子(PGAP),大小为500bp左右,以其取代诱导型表达载体pPIC9K上的AOX1启动子(PAOX1),构建了组成型表达载体pGAP;再从野生型酵母菌JSY4染色体中扩增出25S rDNA保守序列,大小为1 700bp左右,以其取代组成型表达pGAP上的组氨酸脱氢酶基因(H IS4)片断,构建了整合组成型表达载体pGAP-rDNA。再双酶切重组质粒pT002M anⅠ得编码β-甘露聚糖酶的ManⅠ基因片断插入pGAP-rDNA的多克隆位点(MCS),获得含有目的基因ManⅠ的重组整合组成型表达载体pGAP-rDNA-ManⅠ。CaC l2法转化感受态大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行质粒PCR鉴定和单、双酶切鉴定。结果表明:成功构建了重组组成型表达载体pGAP-rDNA-ManⅠ,为下一步野生型酵母菌JSY4中β-甘露聚糖酶的组成型表达打下基础。
包晓兰
王和平
包力高
周平
蔺日胜
赵丽霞
关键词:
Β-甘露聚糖酶
组成型表达
GAP启动子
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