李曌
- 作品数:14 被引量:17H指数:2
- 供职机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金创新研究群体科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 含人脐血来源富血小板血浆的三维生物打印墨水在裸鼠全层皮肤缺损治疗中的应用被引量:1
- 2022年
- 目的探讨含人脐血来源富血小板血浆(HUCB-PRP)的海藻酸钠-明胶(AG)生物墨水(称为HUCB-PRP-AG生物墨水)的可打印性能和细胞相容性,及该生物墨水的三维打印组织治疗裸鼠全层皮肤缺损创面的效果。方法采用实验研究方法。制备含体积分数2.5%、5.0%、10.0%HUCB-PRP的HUCB-PRP-AG生物墨水,分别命名为1P-AG、2P-AG、4P-AG。取AG、1P-AG、2P-AG、4P-AG,观察室温下外观,采用旋转流变仪检测黏度、储能模量和损耗模量。利用以上4种生物墨水分别进行三维生物打印并观察打印组织外观(后续使用交联后打印组织),将4种打印组织分别与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在Transwell小室内用HUVEC专用培养基共培养24 h,采用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖水平(样本数为3);将4种打印组织分别用DMEM培养基培养12、24、48 h,进行干燥称重并计算降解率(样本数为3);将1P-AG、2P-AG、4P-AG打印组织分别用磷酸盐缓冲液培养0.5、24.0、48.0 h,采用酶联免疫吸附测定法检测培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的表达(样本数为5)。取16只6~8周龄雌性BALB/c-NU裸鼠建立背部全层皮肤缺损创面模型,分为创面仅覆盖医用水胶体敷料的常规对照组和另予HUCB-PRP滴加的HUCB-PRP组、AG打印组织覆盖的AG组、4P-AG打印组织覆盖的4P-AG组(每组4只),观察每组3只裸鼠伤后4、8、14 d创面愈合情况并计算创面愈合率;取每组剩余裸鼠伤后8 d创面组织,行苏木精-伊红染色后观察组织病理学改变,行免疫组织化学染色后观察CD31阳性新生血管情况。对数据行重复测量方差分析、LSD检验及Bonferroni校正。结果在室温下,AG、1P-AG、2P-AG、4P-AG均呈半透明液态;AG为淡黄色,1P-AG、2P-AG、4P-AG均为淡红色但颜色依次逐渐加深。在温度10℃和剪切率0.1~10.0 s-1范围内,AG、1P-AG、2P-AG、4P-AG的黏度均随着剪切率的增加而减小;在温度10℃和角频率1~100 rad/s范围内,4种生物墨水
- 宋薇李曌朱世钧张超姚斌孔毅梁莉婷恩和吉日嘎拉付小兵黄沙
- 关键词:生物相容性材料
- 水溶性壳聚糖水凝胶对糖尿病小鼠感染全层皮肤缺损创面的作用及其机制被引量:7
- 2022年
- 目的探讨水溶性壳聚糖水凝胶对糖尿病小鼠感染全层皮肤缺损创面的作用及其机制。方法采用实验研究方法。采用循环冻融的方法制备由聚乙烯醇和明胶组成的对照水凝胶及由前述2种材料+水溶性壳聚糖组成的水溶性壳聚糖水凝胶。大体观察第1次冻融前后试管中2种敷料流动性,并比较12孔板中2种敷料最终形态的外观差异。取细胞株L929和HaCaT,均分别按照随机数字表法(分组方法下同)分为对照水凝胶组和水溶性壳聚糖水凝胶组,分别加入相应敷料培养24 h,采用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖活力。取兔血红细胞悬液,分为生理盐水组、聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)组、对照水凝胶组和水溶性壳聚糖水凝胶组,分别作相应处理后孵育1 h,采用酶标仪检测红细胞的溶血程度。取24只11~14周龄雌性db/db小鼠,在其背部制作全层皮肤缺损创面并在创面处滴加耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)液,72 h后将小鼠分为空白对照组、磺胺嘧啶银水胶组、对照水凝胶组、水溶性壳聚糖水凝胶组,分别作相应处理。伤后0(即刻)、7、14、21 d,大体观察创面愈合情况并计算伤后14、21 d创面愈合率;伤后14 d,检测创面中MRSA浓度;伤后21 d,采用苏木精-伊红染色法对创面进行组织学分析,采用免疫荧光法检测创面中细胞CD31表达并计算其阳性百分率。取Raw264.7细胞,分为进行相应处理的白细胞介素4(IL-4)组、空白对照组、对照水凝胶组、水溶性壳聚糖水凝胶组,培养48 h,采用流式细胞仪检测细胞中CD206阳性细胞百分率。样本数均为3。对数据行独立样本t检验、单因素方差分析、重复测量方差分析、LSD检验及Dunnett T3检验。结果试管中2种敷料在进行冻融前都具有一定的流动性,冻融1次后均形成半固态凝胶。12孔板中2种敷料最终形态均基本呈稳定的半透明片状,透明度差异不大。培养24 h,水溶性壳�
- 朱萌陈禹州区锦钊李曌黄沙胡骁骅鞠晓燕田野牛忠伟
- 关键词:水凝胶慢性创面创面修复
- 一种含PRP的生物墨水的制备方法及应用
- 本发明提供了本发明提供了一种含PRP的生物墨水的制备方法,该制备方法包括以下步骤:制备液态水凝胶,所述液态水凝胶包括以下质量百分比的各组分:1%‑30%的明胶,1%‑10%的海藻酸钠;将体积比为9‑36:1的液态水凝胶和...
- 宋薇李曌姚斌黄沙付小兵
- 一种可见光交联复合凝胶型止血敷料的制备与应用
- 本发明提出一种可见光交联复合凝胶型止血敷料,包含1‑55%甲基丙烯酰化天然高分子、0.0001‑0.05%可见光引发剂、2‑15%增稠剂;制备该止血敷料的方法包括:首先,制备可见光引发剂溶液,并用可见光引发剂溶液溶解甲基...
- 黄沙张孟德李曌
- 骨关节炎软骨中Ⅵ型胶原空间分布的变化规律及HtrA1在其中的作用
- 目的:探讨Ⅵ型胶原蛋白在OA软骨中的空间分布较健康软骨Ⅵ型胶原的变化规律;其次通过研究HtrA1在OA软骨中的分布规律及其与Ⅵ型胶原分布改变的关系,探讨HtrA1在OA发病中的作用。 方法:利用模型组Hartley豚鼠...
- 李曌
- 关键词:骨关节炎软骨细胞免疫组化
- 文献传递
- 三维生物打印支架的拓扑结构介导的免疫反应对小鼠毛囊周期的影响被引量:1
- 2024年
- 目的探讨具有不同拓扑结构的三维生物打印支架介导的免疫反应对小鼠毛囊周期的影响。方法该研究为实验研究。将海藻酸钠-明胶复合水凝胶用三维生物打印机打印成3种支架,并按照支架的3种拓扑结构(打印时打印喷头的旋转角度分别为45°、60°、90°),分别命名为T45支架、T60支架、T90支架,肉眼观察3种支架交联后的形态。取9只8周龄雌性C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为T45组、T60组、T90组,每组3只,分别于背部皮下埋植T45、T60、T90支架。于植入后7 d,观察小鼠背部脱毛区毛发生长情况,行苏木精-伊红染色观测支架周围的纤维囊厚度,行免疫荧光染色检测支架周围组织中CD68、骨形态发生蛋白2(BMP-2)、肿瘤坏死因子(TNF)蛋白的表达水平。以上实验样本数均为3。结果3种支架交联后均拓扑结构明显,保真度高。植入后7 d,T45组、T90组小鼠背部脱毛区毛发均生长明显;T60组小鼠支架植入区毛发生长缓慢,与未植入区差别明显。植入后7 d,与T90组[(18±4)μm]相比,T45组、T60组小鼠支架周围的纤维囊厚度[(39±4)、(55±8)μm]均明显增加(P<0.05);与T45组相比,T60组小鼠支架周围的纤维囊厚度明显增加(P<0.05)。植入后7 d,T60组小鼠支架周围组织中CD68蛋白的表达水平明显高于T45组和T90组(P值均<0.05);T60组小鼠支架周围组织中BMP-2蛋白的表达水平明显高于T45组、T90组(P值均<0.05),T45组小鼠支架周围组织中BMP-2蛋白的表达水平明显高于T90组(P<0.05);T60组小鼠支架周围组织中TNF蛋白的表达水平明显低于T45组和T90组(P值均<0.05)。结论具有不同拓扑结构的三维生物打印支架植入小鼠体内后会介导不同程度的免疫反应。适度的免疫反应可促进小鼠脱毛区毛发生长,过强的免疫反应抑制毛囊进入生长期。
- 刘清华李曌恩和吉日嘎拉张超宋薇王玉振梁莉婷张孟德黄钰岩李筱贺黄沙
- 关键词:免疫毛囊拓扑
- 一种含PRP的生物墨水的制备方法及应用
- 本发明提供了本发明提供了一种含PRP的生物墨水的制备方法,该制备方法包括以下步骤:制备液态水凝胶,所述液态水凝胶包括以下质量百分比的各组分:1%‑30%的明胶,1%‑10%的海藻酸钠;将体积比为9‑36:1的液态水凝胶和...
- 宋薇李曌姚斌黄沙付小兵
- 一种含有组织蛋白复合物的生物3D打印墨水的制备方法
- 本发明提供了一种含有组织蛋白复合物的生物3D打印墨水的制备方法;该制备方法包括以下步骤:步骤S1组织预处理:取组织,去除非目的成分,使用PBS溶液清洗,将组织剪成小块,使用红细胞裂解液裂解,离心,取上层,即得;步骤S2组...
- 张超李曌宋薇姚斌黄沙付小兵
- 文献传递
- 原位交联含氧化石墨烯的甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶对小鼠全层皮肤缺损创面血管化的影响被引量:2
- 2022年
- 目的制备含氧化石墨烯(GO)的甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶并探讨原位光聚合GO-GelMA复合水凝胶对小鼠全层皮肤缺损创面血管化的影响。方法采用实验研究方法。将0.2 mg/mL的GO溶液50μL均匀涂抹于导电胶上,烘干后于场发射扫描电子显微镜下观察GO的结构和大小。将人皮肤成纤维细胞(HSF)分为采用相应终质量浓度GO处理的0μg/mL GO(不加GO溶液,下同)组、0.1μg/mL GO组、1.0μg/mL GO组、5.0μg/mL GO组、10.0μg/mL GO组,用酶标仪检测细胞培养48 h的吸光度值,以此表示细胞增殖活性(样本数为6)。将HSF和人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)分别分为采用相应终质量浓度GO处理的0μg/mL GO组、0.1μg/mL GO组、1.0μg/mL GO组、5.0μg/mL GO组,采用划痕试验检测划痕后24、36 h HSF的迁移率(样本数为5)及划痕后12 h HUVEC的迁移率(样本数为3),采用酶联免疫吸附测定法检测培养4、6、8 h后HSF分泌的血管内皮生长因子(VEGF)水平(样本数为3)。将配制的含相应终质量浓度GO的GO-GelMA复合水凝胶设为0μg/mL GO复合水凝胶组、0.1μg/mL GO复合水凝胶组、1.0μg/mL GO复合水凝胶组、5.0μg/mL GO复合水凝胶组,观察其交联前后的性状,检测用磷酸盐缓冲液浸泡3、7 d后GO的释放情况(样本数为3)。在16只6周龄雌性C57BL/6小鼠背部制作全层皮肤缺损创面,将采用原位交联的含相应终质量浓度GO的GO-GelMA复合水凝胶处理的小鼠按随机数字表法分为0μg/mL GO复合水凝胶组、0.1μg/mL GO复合水凝胶组、1.0μg/mL GO复合水凝胶组、5.0μg/mL GO复合水凝胶组,每组4只,观察治疗3、7、14 d创面大体情况并计算创面愈合率,采用激光多普勒血流仪检测治疗3、7、14 d创面血流灌注并计算平均灌注单位(MPU)比值,采用苏木精-伊红染色观察治疗7 d创面血管新生情况并计算血管密度(样本数均为3)。取0μg/mL GO复合水凝胶组和0.1μg/mL GO复合水凝胶组治疗7 d的创面组�
- 梁莉婷宋薇张超李曌姚斌张孟德袁星宇恩和吉日嘎拉付小兵黄沙朱平
- 关键词:血管内皮生长因子A氧化石墨烯
- 锁骨钩钢板治疗CraigⅡB型锁骨远端骨折钢板取出前后肩关节功能的变化被引量:4
- 2015年
- 目的探讨锁骨钩钢板治疗CraigⅡB型锁骨远端骨折钢板取出前后肩关节功能变化。方法收录2009年1月-2014年1月我院13例锁骨远端骨折病例并随访,复查X线并进行Constant-Murley评分。结果 13例平均随访日寸间(51.77±4.79)个月。X线片显示,所有患者愈合良好,某些可见锁骨钩周围骨质溶解或肩锁关节创伤性关节炎征象。取板后的ConstantMurley评分(88.08±16.32)高于取板前(75.31±9.04)(P=0.003),患肩功能得到明显改善,取板后肩部疼痛明显减轻,活动性增强,活动度增大(P<0.05),但取板前后上肢肌力的差异无统计学意义(P=0.303)。结论骨折愈合良好的情况下尽早取出锁骨钩钢板,有助于减少疼痛、恢复肩关节功能和提高生活质量。
- 李曌张里程张立海唐佩福
- 关键词:锁骨远端骨折锁骨钩钢板