牛小芳
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰腺癌细胞凋亡伴随胱天蛋白酶依赖性BAG3蛋白剪切的研究被引量：6
- 2011年
- 目的:前期研究表明,蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡时伴随抗凋亡蛋白BAG3的剪切。本研究探讨BAG3蛋白剪切是否为细胞凋亡伴随的普遍现象。方法:选取人胰腺癌细胞SW1990和PANC1,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132单独或与z-VAD联合处理组、星形孢菌素(STS)单独或与z-VAD联合处理组、依托泊苷单独或与z-VAD联合处理组、TNFα单独或与z-VAD联合处理组以及紫外线单独照射或与z-VAD联合处理组;利用蛋白质印迹法检测各组细胞中BAG3蛋白的剪切情况;利用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:与甲状腺癌细胞类似,蛋白酶体抑制剂MG132诱导胰腺癌细胞凋亡的同时,伴随BAG3蛋白的剪切;其他凋亡诱导剂如依托泊苷、星形孢菌素和紫外线照射在诱导胰腺癌细胞凋亡的同时,也可诱导BAG3蛋白剪切体的出现;而广谱胱天蛋白酶抑制剂z-VAD可以完全抑制BAG3蛋白的剪切。结论:胱天蛋白酶依赖性BAG3蛋白的剪切可能是细胞凋亡时的普遍现象,BAG3可能为胱天蛋白酶作用底物。
- 高雁艳刘宝琴牛小芳庄颖王华芹
- 关键词：胰腺肿瘤半胱氨酸内肽酶类细胞凋亡剪切
- 白藜芦醇对MG132诱导K562细胞凋亡影响的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究白藜芦醇能否增加K562细胞对MG132的敏感性。方法:MG132单独及联合白藜芦醇作用于K562细胞,MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测PARP剪切水平。结果:>50μmol/L白藜芦醇能够有效地抑制K562细胞的活力,P<0.01;MG132单独处理K562细胞24h,对细胞活力的抑制呈剂量依赖性,P<0.01;而联合用药时,白藜芦醇呈剂量依赖性的对抗了MG132对K562细胞的毒性,并且5μmol/L白藜芦醇有效的降低了K562细胞凋亡率,P<0.05。结论:白藜芦醇具有对抗MG132诱导细胞毒性的潜在作用。
- 牛小芳刘宝琴李宁高雁艳李超王华芹
- 关键词：MG132白藜芦醇K562细胞细胞凋亡
- LC3B真核表达载体构建及其在293细胞的表达
- 2010年
- 目的:构建重组人LC3B的真核表达载体,建立稳定表达EGFP、EGFP-LC3B的293细胞系。方法:基因克隆方法构建pcD-NA3-N-EGFP-LC3B的真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该重组质粒及pcD-NA3-N-EGFP空载体质粒导入293细胞,用G418筛选稳定表达的细胞系。293细胞中EGFP、EGFP-LC3B的表达用倒置荧光显微镜方法检测。结果:成功扩增LC3B基因大小片段,克降测序结果与NCBI收录的LC3B序列完全一致。获得转染并经G418反复筛选稳定表达EGFP、EGFP-LC3B的293细胞系。结论:成功建立EGFP、EGFP-LC3B稳定表达的293细胞系,并且具有正常的生物学功能,从而为后续研究提供有用的细胞研究模型。
- 刘宝琴高雁艳牛小芳王华芹
- 关键词：微管相关蛋白质类基因表达转染
