王力敏
- 作品数：10 被引量：42H指数：5
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划海南省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 木薯苹果酸脱氢酶基因克隆和表达分析被引量：4
- 2013年
- 为从木薯块根中获得苹果酸脱氢酶(MDH)基因,并研究其在转录水平的表达变化规律,利用RACE技术从木薯"华南8号"块根中克隆得到了苹果酸脱氢酶基因,其cDNA全长1 175 bp,包含999 bp的开放阅读框,共编码332个氨基酸。从木薯"华南8号"中获得的MDH氨基酸序列,与其它物种的该序列相似度达84%-94%,包含细胞质苹果酸脱氢酶中高度保守的NAD结合基元"TGAAGQI"和催化基元"IWGNH"。木薯MDH基因与块根淀粉合成相关,在块根发育前期表达量较低,膨大期表达量较高,膨大后期表达量逐渐降低。
- 尹奇仝征贺庭琪王力敏黄启星郭运玲孔华王旭初郭安平
- 关键词：木薯块根苹果酸脱氢酶淀粉合成
- 不同品种木薯叶绿体比较蛋白质组学初步研究被引量：5
- 2013年
- 以"华南8号"木薯(SC8)和"华南124号"木薯(SC124)的叶绿体作为研究材料,采用改进酚抽提法提取蛋白,通过单向SDS-PAGE电泳和双向SDS-PAGE电泳,比较不同木薯品种叶绿体的蛋白表达谱,并对表达的差异蛋白进行MALDI-TOF MS质谱鉴定,获得15个差异蛋白,其中有6个蛋白在SC124木薯叶绿体中表达较高,9个蛋白表达很低。对蛋白进行功能分析,发现差异蛋白主要参与蛋白翻译后修饰、周转、分子伴侣、碳水化合物运输等过程。通过RT-PCR验证了木薯核酮糖1,5-二磷酸羧化酶、ATP合酶β亚基的基因表达情况,结果表明,ATP合酶β亚基基因表达与蛋白质的表达比较一致,而核酮糖1,5-二磷酸羧化酶基因与蛋白质表达变化不一致。
- 贺庭琪徐兵强郭安平王力敏王丹黄启星仝征尹奇王旭初
- 关键词：木薯叶绿体比较蛋白质组学质谱RT-PCR
- 植物糖基化蛋白质组研究技术策略及研究进展
- 2016年
- 综述了植物糖基化研究的主要策略以及植物糖蛋白质组学研究的最新进展,旨在为更好地开展植物糖蛋白质组研究提供技术线索及研究思路。
- 孙勇王丹仝征常丽丽王力敏王旭初
- 关键词：糖蛋白蛋白糖基化N-糖链生物质谱
- 黑暗条件下木薯叶绿体比较蛋白质组学初步研究被引量：2
- 2015年
- 以"华南8号"木薯叶绿体为研究材料,采用改进酚抽法提取总蛋白,通过一维和二维电泳,经Image Master分析,得到差异蛋白点进行质谱鉴定。结果表明:改进酚抽法可以从木薯叶绿体中提取高质量总蛋白;获得分离性好、分辨率及重复性较高的双向电泳图谱;比较黑暗条件下1,3,5 d木薯叶绿体的蛋白质表达谱,发现186个差异表达蛋白点;经MALDI-TOF MS质谱鉴定,获得28个差异蛋白,这些蛋白主要参与光合作用、碳固定、能量代谢、脯氨酸代谢、胁迫防御等代谢途径。本研究初步阐述了木薯叶绿体在黑暗条件下的蛋白质组变化,在蛋白质水平上鉴定出部分蛋白质的表达可能受光调控。
- 徐兵强贺庭琪王力敏王丹孙勇王旭初郭安平
- 关键词：暗处理比较蛋白质组学质谱
- 木薯叶片响应干旱胁迫的磷酸化蛋白质组差异分析被引量：5
- 2018年
- 本文以抗旱性较强的‘华南8号’木薯(Manihot esculenta)为材料,分析正常供水、轻度干旱(干旱处理5 d)和重度干旱(干旱处理15 d)胁迫对木薯植株形态及叶片磷酸化蛋白质组的影响。结果表明,随着干旱胁迫程度的增加,木薯叶片从底部开始萎蔫、脱落,但顶端叶片优先保持正常生长。干旱胁迫处理后,共有28个磷酸化蛋白点在叶片中的表达丰度发生了显著变化。质谱(MS)鉴定显示,这些蛋白质主要参与光合作用、能量代谢、碳代谢、胁迫与防御、结合和转录翻译等代谢途径。其中,大部分参与光合作用的蛋白积累量在干旱胁迫后显著降低,而参与能量代谢、碳代谢、胁迫与防御、转录翻译等途径的大部分蛋白质积累量则明显升高。由此推测,木薯应答干旱胁迫可能是通过改变植株形态,抑制叶片中的光合作用相关蛋白,调控叶片碳分配过程,同时,通过有效清除活性氧,防御氧化胁迫损伤,防止蛋白变性和降解等方式。
- 常丽丽王力敏郭安平杨倩王旭初
- 关键词：木薯磷酸化蛋白质组干旱胁迫差异表达蛋白
- 等电聚焦强度对木薯叶片蛋白质双向电泳分离结果的影响被引量：8
- 2011年
- 通过优化等电聚焦强度改良木薯叶片蛋白质双向电泳的分离效果。结果表明,13万Vhs等电聚焦强度能很好地分离木薯叶片蛋白质,且分离的蛋白质具有良好的质谱兼容性。质谱鉴定7个蛋白点,结果显示这些蛋白主要参与能量代谢,其中有些蛋白点是在13万Vhs聚焦强度下特异出现的。
- 王海燕王斌王丹王东阳王力敏王红岩王旭初田维敏
- 关键词：木薯等电聚焦双向电泳
- 香蕉幼苗叶片响应低温胁迫的比较蛋白质组学研究被引量：13
- 2015年
- 香蕉是中国热带地区重要的经济作物,香蕉产业受寒害的影响极为严重。明确香蕉植株响应低温胁迫的分子调控机制有可能为培育和筛选出相对抗寒的香蕉品系提供研究基础。应用比较蛋白质组学对7℃低温处理0、3、5和7天的巴西蕉幼苗叶片总蛋白进行分析,发现有85个蛋白质点的表达丰度在低温胁迫后发现明显变化,通过质谱成功地鉴定了其中的82个蛋白,这些蛋白质主要参与蛋白质的加工及翻译后修饰、糖与能量代谢、光合作用等生理学过程。研究结果暗示低温环境下,香蕉幼苗叶片可能通过改变光合作用相关酶、糖类与能量代谢相关酶的表达量来调节能量与碳代谢,保证碳养分供应及吸收,同时通过超氧化物歧化酶清除系统来提高香蕉抵御低温的能力。研究结果将为研究香蕉抗寒的分子机制提供新线索,为香蕉抗寒育种提供新的候选蛋白。
- 孙勇王丹仝征杨倩常丽丽王力敏何丽平王旭初
- 关键词：香蕉叶片光合作用低温胁迫比较蛋白质组学
- 华南8号木薯块根形成期叶绿体蛋白质组学分析
- 2015年
- 以‘华南8号’木薯块根形成期叶绿体为材料,采用改进酚抽法提取总蛋白,通过一维和二维电泳,经Image Master分析,获得了木薯叶绿体的蛋白质表达谱,发现(397±31)个蛋白点;挖取2-DE凝胶上相对丰度较高的蛋白点275个,利用改进的酶解方法进行胶内酶解,经MALDI-TOF MS质谱鉴定,获得208个蛋白点,对应143种蛋白质,这些蛋白主要参与光合作用、光合生物碳固定、氧化还原调节、氨基酸代谢、蛋白质代谢和转运等途径。结果为后期从蛋白质组水平深入研究木薯叶绿体高光效机制提供一定参考。
- 徐兵强贺庭琪王力敏王丹孙勇常丽丽王旭初郭安平
- 关键词：木薯叶绿体蛋白质组学质谱
- 橡胶树胶乳RNA简易提取和保存方法的比较探索被引量：3
- 2013年
- 针对巴西橡胶树胶乳RNA的提取方法存在操作复杂、步骤多、时间长、保存条件要求苛刻等问题以及橡胶树胶乳远距离、长时间采样的诸多不便等问题,介绍一种具有操作简单、实验时间短、步骤少等优点的简易巴西橡胶树胶乳RNA提取方法和一种适于长时间保存胶乳的方法。该方法仅仅以DEPC水为提取液,提取的RNA浓度可以达到为0.722μg/mL,纯度OD260/OD280在2.0~2.2之间,总RNA提取量为36.1μg/mL,可以满足后续分子生物学实验RT-PCR和RACE的要求;对在冰上保存1~10 d的胶乳提取RNA,浓度在0.502~0.722μg/mL之间,OD260/OD280在1.8~2.4之间,总RNA的提取量在20.8~35.44μg/mL之间。
- 庄盈婷仝征王力敏王红岩周承王旭初郭安平
- 关键词：巴西橡胶树胶乳RNA提取
- 木薯块根膨大期韧皮部和木质部比较蛋白组学初步研究被引量：6
- 2014年
- 以‘华南8号’木薯块根膨大期的韧皮部和木质部为材料,采用改进酚抽法提取总蛋白,进行一维和二维电泳,电泳图谱经Image Master分析,得到差异蛋白点进行质谱鉴定。结果表明:改进酚抽法可以从木薯块根韧皮部和木质部中提取高质量总蛋白,用于蛋白质组学研究;获得分离性好、分辨率及重复性较高的双向电泳图谱;比较木薯块根韧皮部和木质部双向电泳图谱发现265个差异表达蛋白点,其中29个在韧皮部特异表达,17个在木质部特异表达;成功鉴定出8种差异蛋白,这些蛋白主要参与翻译后修饰、无机离子和氨基酸转运代谢、分子伴侣和信号转导等代谢通路。本研究初步比较木薯块根韧皮部和木质部的蛋白表达差异性,为进一步从蛋白质组水平研究木薯块根膨大过程中淀粉转运、积累和合成调控机制奠定了技术基础。
- 王力敏王东阳王丹王海燕王红岩王雪君王斌王旭初
- 关键词：木薯块根韧皮部木质部比较蛋白质组学
