郑亚秋
- 作品数：12 被引量：14H指数：2
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- 一种靶向肿瘤低氧微环境的中药小分子组合在肿瘤治疗中的应用
- 本发明提供了一种靶向肿瘤低氧微环境的中药小分子组合在肿瘤治疗中的应用，以肿瘤低氧诱导因子1α及其下游VEGF为靶，筛选了靶向肿瘤低氧微环境的中药小分子，并将其组合成复合物开展了肿瘤预防及肿瘤治疗研究，经筛选，发现黄连素、...
- 杜钢军段永健林海红杜振华杜庆涛耿胜男张厚云孟明静郑亚秋姚静静
- 文献传递
- SH3BP4基因对肝癌细胞迁移和增殖作用的实验研究被引量：1
- 2018年
- 目的:构建SH3结构域结合蛋白4(SH3-domain binding protein 4,SH3BP4)重组腺病毒载体及shSH3BP4慢病毒载体,初步探索SH3BP4对肝癌细胞迁移增殖能力的影响。方法:PCR扩增SH3BP4 cDNA序列并构建腺病毒重组质粒pAdEasySH3BP4,HEK293细胞包装重组腺病毒AdSH3BP4;构建SH3BP4基因短发夹型RNA干扰慢病毒载体,转染至HEK293T细胞,包装重组慢病毒shSH3BP4。采用Western blot检测SH3BP4在人正常肝脏细胞及肝癌细胞的内源性表达,将SH3BP4过表达实验部分设为3个组:Mock组、AdGFP组和AdSH3BP4组,Mock组为空白对照组,AdGFP组为感染腺病毒AdGFP的对照组,AdSH3BP4组为感染腺病毒AdSH3BP4的实验组;将SH3BP4敲低实验部分设为2个组:sh Control组和shSH3BP4组,sh Control组为感染慢病毒sh PLL3.7的对照组,shSH3BP4组为感染慢病毒shSH3BP4的实验组。通过Transwell和划痕实验检测SH3BP4过表达和敲低对肝癌细胞迁移能力的影响;MTS和直接克隆形成实验检测SH3BP4过表达和敲低对肝癌细胞的增殖能力的影响。结果:经限制性内切酶酶切及DNA测序验证,成功构建AdSH3BP4重组腺病毒载体和shSH3BP4慢病毒载体。Transwell结果表明,AdSH3BP4组(74.800±0.544)相较于空白对照组(219.467±2.640)与AdGFP组(210.533±8.498),迁移的细胞数明显减少(P=0.000);而shSH3BP4组(191.467±3.906))比sh Control组(91.733±2.763)细胞的迁移数目明显增加(P=0.000)。划痕实验结果表明,AdSH3BP4组的细胞修复率[(10.400±0.036)%]明显低于空白对照组[(37.500±0.063)%]与AdGFP组[(50.000±0.063)%](P=0.000);而shSH3BP4组[(55.00±0.05)%]明显高于sh Control组[(23.3±0.029)%](P=0.000)。MTS结果表明:AdSH3BP4组在96 h的吸光度值(0.921±0.053)与空白对照组(1.091±0.043)及AdGFP组(1.062±0.024)相比明显降低(P=0.005)。shSH3BP4组在96 h的吸光度值(1.497±0.020)与sh Control对照组(1.142±0.103)相比明显升高(P=0.004)。直接克隆形成实验结果表明,AdSH3BP4组的细胞克隆形成数(34.333±2.082)
- 郑亚秋潘琦梁利张桂冀向进夏杰汪凯丁克越唐霓
- 关键词：肝细胞肝癌细胞迁移细胞增殖
- 狼毒水煎液对A549细胞增殖及迁移的影响被引量：4
- 2016年
- 〔目的〕观察狼毒水煎液对人肺癌A549细胞增殖和迁移的影响。〔方法〕MTT实验测定该药对人肺癌A549细胞增殖的影响,划痕实验法测定该药对人肺癌A549细胞迁移的影响。〔结果〕与对照组相比,狼毒水煎液对实验组肺癌A549细胞的增殖以及迁移均有一定的抑制作用,抑制作用与药物浓度呈正相关。〔结论〕狼毒水煎液对人类非小细胞型肺癌有一定的抑制作用。
- 孟明静耿胜男郑亚秋杜钢军
- 关键词：狼毒水煎液增殖迁移
- 川乌对小鼠二阶段皮肤乳头状瘤的抑制作用被引量：6
- 2016年
- 〔目的〕评价川乌对小鼠二阶段皮肤乳头状瘤的抑制作用以及在癌症化学预防方面的作用。〔方法〕本实验诱发小鼠形成皮肤乳头状瘤的二阶段致癌模型所采用的是经典的DMBA/巴豆油方法,以灌胃的方式给一组小鼠川乌水煎液,以另一组灌蒸馏水的小鼠为对照,利用观察和对比小鼠的动态,以及小鼠的荷瘤数、体质量、体温、自主活动的变化,来观察和评价川乌在不同阶段的抗化学致癌作用。〔结果〕川乌对DMBA/巴豆油诱发的小鼠皮肤乳头状瘤的形成具有抑制作用。〔结论〕川乌具有较强的癌症化学预防作用。
- 郑亚秋耿胜男孟明静杜钢军
- 关键词：川乌化学预防抗癌
- Western blot法测定N-cadherin在创伤修复过程中的作用被引量：1
- 2016年
- 〔目的〕测定小鼠创伤后N-cadherin蛋白的表达,探讨N-cadherin在创伤修复中的作用。〔方法〕用皮肤切除法在小鼠背部建立1 cm2小鼠皮肤创伤模型,分为复方组,腺嘌呤组,模型组和正常对照组。复方组小鼠给予中药复方制剂[附子(制)∶三七∶紫草=1∶2∶3];腺嘌呤组给予腺嘌呤;模型组不给药。实验结束后,观察创伤面积及修复的快慢程度变化。创伤组织皮肤提取蛋白,Western blot法测定皮肤组织EMT过程中N-cad在创伤修复中表达的程度高低。〔结果〕复方组小鼠背部创伤恢复最快,其次为模型组,腺嘌呤组小鼠创伤愈合最慢;Western blot法测定显示,创伤后N-钙调素的表达从高到低依次为:腺嘌呤组、模型组、复方组,与正常对照组比较其差异具有统计学意义(P<0.05)。〔结论〕复方组给予的中药复方制剂对小鼠创伤的愈合有促进作用,腺嘌呤组给予腺嘌呤造成小鼠阳虚模型,不利于小鼠创伤愈合;小鼠创伤后N-cad的表达越低,创伤修复越快。
- 耿胜男郑亚秋孟明静杜钢军
- 关键词：WESTERNBLOTN-CADHERIN创伤修复
- 脂多糖对乌拉坦诱导小鼠肺癌的促进作用
- 2017年
- [目的]观察脂多糖(LPS)对乌拉坦诱导小鼠肺癌是否有促进作用。[方法]乌拉坦(600 mg/kg)腹腔注射建立肺癌小鼠模型,LPS组尾静脉注射,实验期间观察小鼠体质量、饮食、自主活动变化,实验结束时处死小鼠,测定小鼠血清中脂氧素A4含量和血液中白细胞数,解剖观察小鼠肺荷瘤数。[结果]与模型组相比,LPS组小鼠肺癌形成时间缩短,脂氧素A4含量和白细胞数都较高(P<0.05),小鼠肺荷瘤数较多且瘤体较大,小鼠体质量、饮食、自主活动变化差异无统计学意义。[结论]LPS对乌拉坦诱导小鼠肺癌有促进作用,其联合造模是快速建立小鼠肺癌模型的一种好方法。
- 张真真郑亚秋郑亚秋段永建
- 关键词：脂多糖炎症
- SLC27A5缺失通过激活Keap1/Nrf2通路促进肝癌增殖的机制研究
- 目的研究溶质载体家族27成员5(Solute Carrier Family 27 Member 5,SLC27A5)在肝癌发生发展中的作用及其分子机制。方法利用TCGA数据分析肝癌与癌旁组织中SLC27A5表达情况及其与...
- 高庆祝张桂冀郑亚秋杨翼黄爱龙汪凯唐霓
- 关键词：肝细胞癌ROS索拉非尼
- 文献传递
- GSTZ1重组腺病毒的构建及影响肝癌细胞迁移能力的研究
- 2017年
- 目的:构建人谷胱甘肽-S-转移酶Z1(glutathione S-transferase zeta 1,GSTZ1)重组腺病毒,并初步研究GSTZ1调控粘附连接信号通路(adhesion junction pathway)靶基因SMAD3、IGF1R等影响肝癌细胞的迁移能力。方法:PCR扩增GSTZ1 cDNA序列并克隆到腺病毒载体pAd Track-TO4,构建重组腺病毒质粒p Ad Track-GSTZ1,将重组质粒用Lipofectamine 2000转染至HEK293细胞中,包装、扩增成高滴度重组腺病毒AdGSTZ1。首先,将SMMC-7721细胞设为3组:Mock组、AdGFP组和AdGSTZ1组,Mock组为空白对照组,AdGFP组为感染腺病毒AdGFP的对照组,AdGSTZ1组为感染腺病毒AdGSTZ1的实验组。然后,通过Transwell实验和MTS实验观察其对肝癌细胞迁移增殖能力的影响,进一步经qRT-PCR及Western blot技术研究GSTZ1通过调控粘附连接信号通路关键分子影响肝癌细胞的迁移。结果:成功构建了高滴度重组腺病毒AdGSTZ1,经Western blot鉴定GSTZ1在SMMC-7721细胞中的表达。Transwell实验结果表明,AdGSTZ1组与Mock组及AdGFP组相比,能够明显抑制人肝癌细胞的迁移能力;与Mock组相比,抑制率为(68.10±1.63)%(P=0.000),与AdGFP组相比,抑制率为(50.70±0.99)%(P=0.000)。MTS实验结果表明,AdGSTZ1组在72 h和96 h的吸光度值分别为(1.13±0.08)和(1.28±0.07),AdGFP组72 h和96 h的吸光度值分别为(1.28±0.03)和(1.45±0.03),AdGSTZ1组在96 h的吸光度值与对照组相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。另外q RT-PCR及Western blot结果显示,与Mock组和AdGFP组相比,AdGSTZ1感染细胞内粘附连接信号通路中靶基因SMAD3、IGF1R等的表达明显降低。q RT-PCR结果显示,AdGSTZ1组与AdGFP组相比,TGFBR1相对表达量为(0.58±0.13)(t=4.609,P=0.010),SMAD3相对表达量为(0.51±0.08)(t=8.030,P=0.000),ERBB2相对表达量为(0.46±0.09)(t=9.384,P=0.000),IGF1R相对表达量为(0.45±0.02)(t=14.480,P=0.000),FARP2相对表达量为(0.37±0.13)(t=7.082,P=0.028)。Western blot表明,SMAD3组中,AdGFP组的蛋白相对表达量为(0.96±0.18),AdGS
- 杨翼李晶晶梁利高庆祝郑亚秋潘娥汪凯唐霓单幼兰
- 关键词：SMMC-7721细胞肝癌细胞迁移
- 一种靶向炭疽杆菌水肿因子的中药小分子组合在肿瘤防治中的应用
- 本发明提供了一种靶向炭疽杆菌水肿因子的中药小分子组合在肿瘤防治中的应用，以炭疽杆菌水肿因子为靶，筛选了靶向炭疽杆菌水肿因子的中药小分子，并将其组合成复合物开展了肿瘤预防及肿瘤治疗研究，经筛选，我们发现大黄素、厚朴酚、乌头...
- 杜钢军卢琳琳吴先闯林海红杜振华耿胜男孟明静郑亚秋杨义明张厚云
- 文献传递
- 基于CRISPR/Cas9系统构建ARID2基因敲除模型并探索其对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响被引量：2
- 2017年
- 目的:通过成簇的规律间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/Cas9,CRISPR/Cas9)系统在SK-Hep1肝癌细胞系中构建AT富集作用域2(AT-rich interaction domain 2,ARID2)基因敲除模型,并初步观察ARID2敲除对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:设计并合成靶向ARID2的向导RNA(single guide RNA,sg RNA)寡核苷酸序列,长度为20 bp,构建到CRISPR表达载体上,转染HEK293T细胞包装慢病毒并筛选稳定细胞株,采用克隆形成、Transwell和划痕实验分别检测细胞增殖和迁移能力。结果:目的 sg RNA寡核苷酸双链成功插入酶切后的Lenti CRISPER-V2质粒载体中且测序正确;经Western blot鉴定ARID2敲除的细胞株筛选成功;ARID2基因敲除后,与亲本细胞系相比,其蛋白表达缺失;克隆形成实验结果示ARID2敲除细胞株(1#6)培养至10 d时克隆形成数为(125.600±5.131)个,亲本细胞株克隆形成数为(69.000±5.567)个(t=12.962,P=0.000);ARID2敲除细胞株(2#1)培养至8 d时克隆形成数为(94.000±8.737)个,亲本细胞株克隆形成数为(67.000±5.292)个(t=4.635,P=0.010),差异有统计学意义。Transwell结果示ARID2敲除细胞株(1#6)在24 h的迁移细胞数为(180.000±5.542)个,亲本细胞组的迁移细胞数为(90.400±5.031)个(t=20.731,P=0.000);ARID2敲除细胞株(2#1)在24 h的迁移细胞数为(138.600±5.749)个,亲本细胞组的迁移细胞数为(78.400±5.703)个(t=12.891,P=0.000),差异有统计学意义。划痕实验结果示ARID2敲除细胞株(1#6)16 h划痕愈合度为(88.000±0.011)%,亲本细胞组划痕愈合度为(52.500±0.047)%(t=12.490,P=0.000);ARID2敲除细胞株(2#1)16 h划痕愈合度为(71.900±0.020)%,亲本细胞组划痕愈合度为(55.200±0.024)%(t=9.190,P=0.001),差异有统计学意义。结论:ARID2敲除可明显促进肝癌细胞的增殖和迁移能力,证实ARID2作为抑癌基因参与肝癌的发生和进程。ARID2敲除细胞模型为肝癌的深入研究提供新的手段。
- 高庆祝汪凯梁利张韵致郑亚秋唐霓
- 关键词：增殖迁移
