陈建
- 作品数:9 被引量:22H指数:3
- 供职机构:安徽中医药大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 基于MGC-803细胞微环境探讨加味小陷胸汤抑制侵袭迁移作用机制被引量:1
- 2023年
- 目的:观察加味小陷胸汤水提取物对MGC-803细胞微环境的影响,探究该方通过调控MGC-803细胞微环境抑制侵袭迁移作用与其调控Wnt5a/Ca^(2+)/活化T细胞核因子(NFAT)信号通路的可能机制。方法:转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))造模后,将MGC-803细胞分为空白组、模型组、加味小陷胸汤组(10、20、40 mg·L^(-1));Wnt5a过表达质粒转染后,分为过表达载体(pEX)-空白(NC)组、pEX-Wnt5a组、pEX-NC+加味小陷胸汤组(40 mg·L^(-1))和pEX-Wnt5a+加味小陷胸汤组(40 mg·L^(-1))。观察MGC-803细胞侵袭能力、迁移能力、微环境关键因子、上皮间质转化(EMT)基因、Wnt5a、钙调神经磷酸酶(CaN)、NFAT1、磷酸化(p)-NFAT1和NFAT1核蛋白表达及细胞Ca^(2+)浓度变化。结果:与空白组比较,模型组微环境显著上调(P<0.01);与模型组比较,加味小陷胸汤(10、20、40 mg·L^(-1))可明显抑制微环境(P<0.05,P<0.01)。进一步实验表明,与空白组比较,模型组过表达Wnt5a后侵袭细胞增多,划痕率升高,微环境因子和EMT基因呈活化态势,Wnt5a/Ca^(2+)/NFAT通路激活(P<0.01);与模型组比较,加味小陷胸汤可抑制细胞远处侵袭和减少愈合,抑制微环境、EMT发展,和Wnt5a/Ca^(2+)/NFAT信号转导,降低NFAT1核表达和NFAT1介导的转录活性,从而降低细胞Ca^(2+)浓度,且可逆转Wnt5a的作用(P<0.05,P<0.01)。结论:加味小陷胸汤可通过改善MGC-803细胞微环境调控Wnt5a/Ca^(2+)/NFAT通路,抑制胃癌侵袭转移和EMT进程。
- 丁芮王景辉王靓陈建陈建
- 关键词:微环境加味小陷胸汤MGC-803细胞胃癌
- 小陷胸汤对5-FU介导小鼠心肌纤维化及HIF-1α/VEGF信号通路蛋白表达的影响
- 2024年
- 目的:观察小陷胸汤对5-氟尿嘧啶(5-FU)介导小鼠心肌纤维化及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的影响,探讨其减轻5-FU心脏损伤的可能机制。方法:将100只SPF级雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、小陷胸汤低、中、高剂量(8.3、16.6、33.2 g·kg^(-1))组,每组20只。除正常组外,其余各组均采用腹腔注射5-FU(30 mg·kg^(-1))连续7 d建立心肌损伤模型小鼠。小陷胸汤低、中、高组造模同时灌胃相应剂量小陷胸汤,正常组和模型组给予等容积生理盐水,连续处理7 d。采用彩色多普勒超声心动仪检测左心室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS);苏木素-伊红(HE)及马松(Masson)染色观察心肌组织病理形态学改变;免疫组化法测定心肌组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测心肌组织HIF-1α、VEGF mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织HIF-1α、VEGF、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)及Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠LVIDd、LVIDs显著升高(P<0.01),LVEF、LVFS显著降低(P<0.01),心肌组织出现明显排列紊乱、炎性细胞浸润及间质纤维化等病理变化,心肌胶原容积分数%(CVF%)显著升高(P<0.01),α-SMA、ColⅠ、ColⅢ蛋白表达显著升高(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01),SOD水平降低(P<0.01),HIF-1α、VEGF mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,小陷胸汤中、高剂量组LVIDd、LVIDs明显降低(P<0.05,P<0.01),LVEF、LVFS明显升高(P<0.05,P<0.01),小陷胸汤各剂量组心肌组织损伤、炎性细胞浸润与心肌纤维化均明显减轻,CVF%明显降低(P<0.05,P<0.01),小陷胸汤中、高剂量组α-SMA、ColⅠ、ColⅢ蛋白表达显著降低(P<0.01),MDA显著
- 叶倩倩秦美洁丁芮方海雁陈建陈建
- 关键词:小陷胸汤心脏毒性缺氧诱导因子-1Α
- p38 MAPK通路的活性调控及其在类风湿性关节炎中的作用
- 2014年
- 类风湿性关节炎过程涉及多细胞间的信号网络持续的调控。该网络包括胞外介质如细胞因子、趋化因子和基质金属蛋白酶,其协调各细胞参与慢性炎症过程。相对应的是胞内转录因子通路,其主要将炎症刺激信息传递给细胞核。丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路中p38 MAPK信号通路对慢性炎症的诱导及维持起至关重要的作用,因此针对该通路上的分子靶点研制出相应的小分子抑制剂用于控制炎症发展。本文通过总结p38 MAPK通路的多种功能作用和活性调节,对其在类风湿性关节炎中的作用做简要综述。
- 陈缙筠吴虹李辉代苗苗胡顺莉陈建
- 关键词:类风湿性关节炎信号转导通路
- 基于网络药理学结合药动学及靶点验证探究黄芩清热除痹胶囊治疗类风湿关节炎质量标志物被引量:2
- 2023年
- 黄芩清热除痹胶囊(Huangqin Qingre Chubi capsule, HQC)作为临床治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的有效方剂,质量控制尚属空白。本研究拟通过网络药理学、药动学结合实验验证探究HQC治疗RA的质量标志物(quality markers, Q-marker)。通过构建“药效成分-靶点-通路”可视化网络,初步预测HQC治疗RA潜在质量标志物。建立风湿热痹证胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)大鼠模型,阐明HQC药效成分在大鼠疾病状态下的动态量化规律。建立肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)诱导的RA成纤维样滑膜细胞(MH7A)体外炎症模型,检测活性成分对鞘氨醇激酶1 (sphingosin kinase-1, Sphk1)、p-SphK1蛋白表达影响。网络药理学结果显示,黄芩苷、栀子苷、木犀草素、薏苡素和苦杏仁苷为HQC治疗RA的重要活性成分。定量分析结果进一步验证这5种成分的可测性。蛋白免疫印迹证实栀子苷和黄芩苷显著抑制Sphk1和p-SphK1蛋白表达。以上研究确定上述5种成分可作为HQC治疗RA的质量标志物。本实验经安徽中医药大学实验动物伦理委员会审核通过(批准号:AHUCM-rats-2021049),所有程序均严格按照动物使用和护理的原则进行。
- 董心同柯江涛甘珮荣陈芳园徐凤陈建刘健吴虹
- 关键词:类风湿关节炎热痹药动学
- 苦丁茶提取物质量分析被引量:3
- 2014年
- 目的 对苦丁茶药材水提物进行质量分析.方法 以槲皮素、山柰素作为对照品,采用薄层色谱法对苦丁茶药材中黄酮类化合物进行定性鉴别;采用反相高效液相色谱法测定苦丁茶药材中槲皮素和山柰素含量.结果 薄层色谱鉴别结果表明,供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上,显现相同颜色的斑点.槲皮素、山柰素进样量分别在0.1~3.2 μg、0.01~0.32 μg范围内,与峰面积线性关系良好(槲皮素r1=0.999 9;山柰素r2=0.999 8),槲皮素及山柰素的平均加样回收率分别为102.34%和101.24%,RSD分别为3.26%和3.15%(n=9).结论 薄层色谱法和反相高效液相色谱法简便、准确,重复性好,可作为苦丁茶药材水提物的质量分析方法.
- 胡顺莉俞致吴虹李辉陈缙筠陈建代苗苗王伟孙亮亮
- 关键词:苦丁茶薄层色谱法反相高效液相色谱法
- 苓桂术甘汤含药血清对TGF-β_(1)诱导的心肌成纤维细胞α-SMA和胶原蛋白合成的影响被引量:3
- 2021年
- 目的:探讨苓桂术甘汤(LGZGD)含药血清对转化生长因子-β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))诱导心肌纤维化的保护作用。方法:利用酶消化,结合差速贴壁的方法体外分离及培养乳鼠的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasys,CFB)。分为:空白组、20%空白大鼠血清组、模型组、5%LGZGD含药血清组、10%LGZGD含药血清组和20%LGZGD含药血清组,除空白组和空白大鼠血清组外分别予5 ng/mL TGF-β_(1)刺激12 h,再用LGZGD含药血清(5%、10%、20%)进行干预后继续培养24 h。采用免疫荧光法及蛋白质印迹法(western blot,WB)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)及WB检测I型胶原蛋白(Collagen I)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达。结果:与空白组比较,模型组Collagen I、CollagenⅢ、α-SMA和FN的表达均显著升高(P<0.01),与模型组比较,实验各浓度组Collagen I及CollagenⅢ的表达均显著降低(P<0.01);α-SMA和FN的表达显著降低(P<0.01)。结论:LGZGD对胶原蛋白合成以及α-SMA和FN的表达有抑制作用,表明LGZGD的抗纤维化作用与其有关。
- 葛瑞瑞王翔汤同娟王靓翟梦婷左梦雨陈建陈建黄金玲
- 关键词:苓桂术甘汤心肌成纤维细胞Α-平滑肌肌动蛋白胶原蛋白纤维连接蛋白
- 栀子苷在佐剂性关节炎大鼠体内生物利用度、血浆蛋白结合率及其代谢产物的研究
- 目的:研究表明栀子苷(Geniposide,GE)对佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis)模型大鼠的足爪肿胀、关节炎评分、关节滑膜的病理形态学具有改善作用,作为抗炎候选药物具有良好的开发前景。并且,通过前期...
- 陈建
- 关键词:栀子苷佐剂性关节炎生物利用度血浆蛋白结合率代谢产物
- 文献传递
- 加味小陷胸汤干预Wnt/β-catenin信号通路抑制人胃癌MGC803细胞上皮间质转化被引量:8
- 2022年
- 目的:研究加味小陷胸汤对人胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)抑制作用及与分泌型糖蛋白Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路关系。方法:采用人胃癌MGC803细胞悬液种植法构建BALB/c裸鼠皮下异位移植性肿瘤动物模型。造模成功后随机分为模型组、加味小陷胸汤低、中、高剂量组(16.0,32.0,64.0 g·kg^(-1)),卡培他滨组(400 mg·kg^(-1)),每组8只,灌胃给药,每日1次,连续给药28 d,其中卡培他滨组给2周停1周。观察裸鼠一般状态、体质量,测量移植瘤大小,处死后称质量并计算抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色法观察移植瘤组织病理学变化;用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Wnt1,β-catenin的基因和蛋白表达水平及Western blot检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9),血管内皮生长因子(VEGF),N-钙黏蛋白(N-cadherin),E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin),锌指蛋白(Snail)蛋白表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测环氧合酶2(COX2),前列腺素E;(PGE;)的表达水平。结果:各组移植瘤体积随时间呈现不同的增长趋势,模型组增长趋势最为明显,与模型组比较,加味小陷胸汤低、中、高剂量组、卡培他滨组瘤体积呈现不同程度的生长抑制、增长趋势降低,且随时间延长作用明显,给药7,14,21,28 d加味小陷胸汤低、高剂量组、卡培他滨组移植瘤体积明显降低(P<0.05,P<0.01),给药14,21,28 d加味小陷胸汤中剂量组移植瘤体积显著降低(P<0.01)。与模型组比较,给药7,14,21,28 d,加味小陷胸汤高剂量组、卡培他滨组裸鼠移植瘤相对肿瘤体积显著降低(P<0.01),给药14,21,28 d,加味小陷胸汤低、中剂量组移植瘤相对肿瘤体积明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,加味小陷胸汤低、中、高剂量组、卡培他滨组移植瘤抑瘤率显著升高(P<0.01)。与模型组比较,加味小陷胸汤中低、中、高剂量组、卡培他滨组均能下调瘤组�
- 谷金繁王翔陈建汤同娟左梦雨洪星辉王靓王靓
- 关键词:加味小陷胸汤胃癌移植瘤
- UHPLC-MS/MS同时测定黄芩清热除痹胶囊中6种活性成分被引量:3
- 2021年
- 目的建立超高效液相色谱-串联质谱同时测定黄芩清热除痹胶囊中6种成分(黄芩苷、栀子苷、木犀草素、齐墩果酸、薏苡素、苦杏仁苷)含量的方法。方法采用Phenomenex Luna Omega C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm),以含10 mmol/L甲酸铵的0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸的乙腈(B)为流动相,进行梯度洗脱,柱温为30℃,流速为0.25 mL/min,进样量5μL,分析时间10 min。采用电喷雾离子源,以多反应监测模式在负离子条件下进行检测。结果所测6种活性成分在测定浓度范围内线性关系良好(r≥0.9990),精密度、稳定性和重复性良好,平均加样回收率为98.62%~103.7%,RSD≤2.70%。结论该方法准确度高、分析速度快、检测限低、重复性高,适用于黄芩清热除痹胶囊质量控制。
- 董心同甘珮荣柯江涛陈芳园吴虹陈建刘健
- 关键词:液相色谱-质谱联用活性成分