李琳
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：上海理工大学医疗器械与食品学院食品科学与工程研究所更多>>
- 发文基金：上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 盐酸克伦特罗完全抗原的制备及其鉴定被引量：2
- 2008年
- 利用重氮化法将小分子半抗原盐酸克伦特罗(CL)偶联到牛血清白蛋白(BSA)上制得盐酸克伦特罗完全抗原(CL-BSA)。采用紫外分光光度法快速确定了BSAC∶L偶联比为11∶7,并通过SDS-PAGE法验证了CL与BSA偶联;间接ELISA法检测免疫Balb/c小鼠血清,结果显示11∶000稀释后的血清在中和掉BSA的抗体后呈阳性;最后,通过细胞融合获得了一株能稳定分泌CL-McAb的细胞株4H5,经鉴定为IgG1,说明合成偶联比为11∶7的完全抗原能刺激小鼠产生针对盐酸克伦特罗的单克隆抗体。
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- 关键词：盐酸克伦特罗
- 1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD的克隆与原核表达被引量：1
- 2008年
- 大肠杆菌1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶被yqhD的基因编码,能催化羟基丙醛生成1,3-丙二醇。采用PCR方法从大肠杆菌中扩增到yqhD,测序结果显示该片段大小为1164 bp。将目标片段克隆到原核表达载体pET28(α+)中并转化到大肠杆菌Novablue,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳鉴定,结果表明克隆得到的yqhD基因能在大肠杆菌Novablue-pET28中实现蛋白表达;在25℃条件下,IPTG诱导12 h后,1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力达到124 U/mg,而野生型的酶活力仅为1.4 U/mg;重组菌全细胞发酵结果显示,产物1,3-丙二醇的产率能达到65%,而野生型仅为9.5%。
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- 关键词：克隆原核表达
- 地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶酶解改性玉米蛋白的研究被引量：3
- 2008年
- 地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶有限水解可改变玉米蛋白的结构和乳化性能,考察了pH值,温度,底物浓度等因素对水解反应的影响。结果表明:在pH值9,水解温度65℃,水解时间90 min,玉米蛋白质量分数5%以及[E]∶[S]比0.06 AU/g条件下水解度能达到34.05%;随水解程度的增大,玉米蛋白的水溶性和乳化活性呈线性相关性增加,水解度达到34.05%时,对应改性蛋白的乳化活性从原蛋白的8.2 m2/g提高到最大值37.8 m2/g。玉米蛋白的表面疏水性先增加后降低,分子柔性却随着水解度的增大而增加,但在整个水解过程中,玉米蛋白分子主要被降解为两个大的相似片段。
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- 关键词：碱性蛋白酶玉米蛋白乳化活性表面疏水性
- 辣根过氧化物酶酶标抗原催化α-萘酚微量热被引量：3
- 2009年
- 采用戊二醛法将盐酸克伦特罗(CL)和辣根过氧化物酶(HRP)偶联制备不同偶联率的酶标抗原,利用MicroDSCⅢ微量热仪测定不同偶联率的酶标抗原催化α-萘酚放热量。结果表明:采用戊二醛法进行偶联HRP的酶活损失微弱,且在相同CL浓度下偶联率低的酶标抗原放热量较大。在同等条件下,0.15mol/LNaCl反应体系中酶促反应的放热量优于0.1mol/LPBS反应体系,在0.15mol/LNaCl缓冲体系下,酶活力为2U时催化放热的最佳底物浓度为20mmol/L。
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- 关键词：盐酸克伦特罗微量热
- 抗克伦特罗单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2008年
- 利用重氮化法,将小分子半抗原克伦特罗（CL）与牛血清白蛋白（BSA）偶联,制备得到CLBSA完全抗原,并用其免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合、连续克隆筛选能稳定分泌高特异性抗CL的单克隆抗体细胞株。结果显示:使用偶联率为17的克伦特罗完全抗原免疫Balb/c鼠,间接ELISA法检测其中三只小鼠血清效价较高;细胞融合检测得到其融合率为85.26%,阳性率为15.23%;经四次连续克隆得到了一株特异性最佳的细胞株4H5,间接ELISA法检测其培养上清的OD450nm达到1.265±0.060,与BSA交叉反应OD450nm仅为0.060±0.006,腹水效价达3.2×106;最后经鉴定确定该单克隆抗体亚型为IgG1,轻链为κ。
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- 关键词：克伦特罗单克隆抗体IELISA
