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王伟: 作品数：11 被引量：56H指数：4; 供职机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>; 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>

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单功能过氧化氢酶的高级结构被引量：13: 2008年; 单功能过氧化氢酶是在生物界广泛分布的抗氧化酶.近年来,人们在对单功能过氧化氢酶一级结构与生化性质深入研究的基础上,针对十几种单功能过氧化氢酶的高度保守的空间结构开展了研究.认识了其活性中心的血红素及周围保守残基,发现了酶的许多特殊结构,如方向不同的血红素,增强酶抗氧化性的侧链残基的共价键和保证酶高效催化的分子内通道等.本文综述了单功能过氧化氢酶空间结构研究现状,概括了酶构象的基本特点,分析了关注和争议较多的酶血红素、肽链侧链共价键及酶分子内通道等重点问题.深入研究单功能过氧化氢酶空间结构是一挑战性的课题,它将推动酶蛋白高级结构形成和酶催化模式等基础理论研究.; 王伟孙谧刘万顺; 关键词：血红素

碱性蛋白酶抑制剂lupI-MSSS原核表达载体的构建及其蛋白表达、纯化被引量：4: 2017年; 低温碱性金属蛋白酶MP是从菌株YS-80-122中提取纯化的,属于沙雷氏蛋白酶家族,与该家族报道的其他酶的结构类似,在MP基因下游有一抑制剂基因lup I,该抑制剂可以完全抑制蛋白酶MP的活性。在野生型抑制剂基因的基础上,通过定点突变将Lup I的N端增加Met-Ser-Ser-Ser,命名为Lup I-MSSS,通过构建p ET28alup I-MSSS原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳结果表明该蛋白的大小约11 kDa,与预测的蛋白分子量一致。对影响蛋白诱导表达的诱导剂添加时间、诱导温度、异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、诱导时间4个因素进行优化,并经初步优化得到了其诱导表达的条件为:接种量2%,诱导剂添加时间3 h,诱导剂IPTG终浓度0.5 mmol/L,诱导温度为37℃,诱导时间为8 h。表达的蛋白依次通过超滤,Superdex 200凝胶过滤层析,Q-Sepharose离子交换层析进行纯化,结果显示目的蛋白纯化倍数为20,比活力为15 720U/mg,活性回收率达60.7%,纯化后的lup I通过高效液相色谱法进行纯度分析,其纯度可达99%以上。; 王昆梁朋娟李尚勇王伟孙晶晶刘均忠孙谧郝建华; 关键词：蛋白酶抑制剂原核表达蛋白纯化

产过氧化氢酶菌株CE-1的筛选与鉴定被引量：4: 2010年; 经过含H2O2的平板初筛和摇瓶发酵复筛,从保存的水样中筛选到一株过氧化氢酶高产菌株CE-1,其所产过氧化氢酶活性和比活分别为1 356.2 U/mL和3 401 U/mg。菌株CE-1为革兰氏阴性杆状细菌,根据其形态特征、16S rRNA基因序列系统进化树分析和生理生化特性,以及属内不同种间性状差异等因素的综合分析,将菌株CE-1鉴定为气单胞属(Aeromonas)细菌。; 张增祥王伟郝建华牛瑞孙谧; 关键词：过氧化氢酶系统发育学分析

过氧化氢酶高产菌株CE-2-A的发酵条件优化被引量：2: 2010年; 为了提高气单胞菌属菌株CE-2-A的过氧化氢酶产量,对其发酵条件进行优化。首先运用了单因子试验筛选出了发酵培养基的麦芽糖含量、牛肉膏含量、CaCl2和MgCl2含量,在此基础上采用Plackett-Burman设计法,对8种影响产酶的因素进行评价。试验结果表明,牛肉膏含量、起始pH、摇瓶装液量对菌株产过氧化氢酶的活力具有显著的影响。通过Box-Behnken试验考察了牛肉膏含量、起始pH、摇瓶装液量这3个主要因素对菌株所产过氧化氢酶活力的影响。发酵条件优化结果为装液量42.6ml、牛肉膏含量3.69g/L、起始pH9.1,采用优化后发酵培养条件进行摇瓶发酵培养,过氧化氢酶的酶活力达到2532.5U/ml,与优化前酶活力(1849.7U/ml)相比提高了36.9%。; 张增祥王伟王芳孙谧; 关键词：气单胞菌过氧化氢酶发酵条件

抗菌性海藻酸钠涂膜在罗非鱼片保鲜中的应用被引量：23: 2010年; 采用测定涂膜抑菌性能、缓释效果来探讨抗菌性海藻酸钠涂膜的抑菌机理并将其应用在罗非鱼片的涂膜保鲜中。实验结果表明,抗菌膜是一种具有缓释效果的保鲜膜,对大肠杆菌Esche-richia coli、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、腐败希瓦氏菌Shewanella putrefaciens及鱼片表面其他杂菌均有较好的抑制效果,保鲜剂在40h内可从涂膜中完全释放;与未经涂膜处理的对照组相比,抗菌膜可以明显控制鱼片细菌总数的增长、维持较低的挥发性盐基氮值和改善鱼片的感官质量,综合考虑鲜度指标并本着以感官评分为基础的原则,抗菌涂膜处理可以将罗非鱼片的保鲜期延长约5.5d。; 张杰王跃军刘均忠郑媛王伟孙谧; 关键词：抗菌性缓释罗非鱼片保鲜

一株海洋过氧化氢酶高产菌的鉴定及产酶条件优化被引量：3: 2014年; 对来自青岛近海海域底泥的一株产过氧化氢酶菌株YS0810进行形态学观察、16S rDNA序列同源性分析及生理生化特性的鉴定,在250 ml摇瓶中进行发酵产酶条件优化。初步确定该菌属于不动杆菌属Acinetobacter。发酵培养的最佳碳、氮源分别为蔗糖20 g/L和蛋白胨15 g/L,无机盐MgSO4·7H2O、NaCl、KH2PO4最佳浓度分别为0.9、5.0和1.0 g/L;菌株在培养基起始pH=7.0、4%接种量、50 ml装液量和25℃的条件下发酵24 h获得较高的酶产量。在最佳培养条件下酶产量为2469 U/ml,是优化前的5倍。; 陈世建王伟孙谧; 关键词：海洋微生物过氧化氢酶不动杆菌属培养条件优化

产酯酶B1海洋枯草芽孢杆菌C5发酵条件优化被引量：4: 2012年; 为提高芽孢杆菌C5产酯酶B1的能力,采用响应面法对其发酵条件进行优化.首先通过单因素实验筛选氮源、碳源、接种量、起始发酵pH、装液量、发酵温度和转速这7个因素,当酶活达到最高值时,各单因素的值分别为氮源玉米浆30 mL/L,碳源麦芽糖35 g/L,接种量4%(φ),起始pH 7.0,装液量15 mL,培养温度36℃,转速在实验室现有条件下最高选择220 r/min;再通过Plackett-Burman(PB)设计法,评价了这7个因素对酯酶B1产量影响的大小,确定氮源玉米浆的浓度、发酵起始pH和发酵温度为酯酶产生的3个主要影响因素;利用中心组合设计(CCD)及SAS软件分析获得了主要因素的最优条件,即玉米浆浓度28.70 mL/L,起始发酵pH为7.10,发酵温度为35.8℃.预测最高酶活力为139.18U/mL,实验最终酶活达到138.40 U/mL,与原发酵条件相比提高了228.15%.其实验值与预测值基本相符,说明预测模型可应用于酯酶发酵条件的优化.; 包兴艳郝建华陈世建王芳王伟孙谧; 关键词：酯酶 PLACKETT-BURMAN 响应面法甲基对硫磷

南极德雷克海峡表层海水酵母菌多样性研究被引量：1: 2017年; 为了研究德雷克海峡的微生物多样性,采集南极德雷克海峡表层海水,通过传统分离培养法获得可培养的酵母菌株,对其18S r DNA保守序列进行测序及系统发生分析。结果表明:共分离出45株酵母菌,属于9个属,12个种;其中,优势属为Meyerozyma属,优势种为Meyerozyma guilliermondii。对所有菌株的过氧化氢酶活性进行检测,发现23株酵母菌具有强烈的过氧化氢酶活性,13株具有弱过氧化氢酶活性,即可分解过氧化氢的菌株占总菌株数的80%。; 李昭王伟郝建华孙谧; 关键词：过氧化氢酶

中性蛋白酶发酵液脱色工艺优化被引量：2: 2016年; 为了脱除中性蛋白酶发酵液中的色素,降低色素在产品应用中的影响,研究并比较了树脂、活性炭、H2O2对中性蛋白酶发酵液的脱色效果。实验结果表明,阴离子交换树脂D380(Cl)型能使其有效脱色并保留较高的蛋白酶活性;利用响应面实验建立数学模型,并确定D380(Cl)型树脂脱色最适流速为2.35柱体积/h(bed volume/h,BV/h),最佳上样量为0.4 BV,最适上样酶活力为40 000 U/m L,最适p H值为6,此时,中性蛋白酶发酵液脱色率为86%,酶活回收率为95%。D380(Cl)型树脂连续使用10次仍有较强脱色能力,脱色率在80%以上,酶活回收率在90%以上。; 桂丽孙谧刘均忠王伟; 关键词：中性蛋白酶脱色树脂响应面

海洋碱性蛋白酶性质研究及其在羊毛加工中的初步应用被引量：2: 2011年; 文章对一种新型海洋碱性蛋白酶的部分性质及其简单应用做了初步的研究。实验结果表明:该蛋白酶的最适pH值为9,最适作用温度为50℃,在温度低于35℃时该酶可以较好地保持酶活性,在pH值6～10的区间内也可以保持良好的酶稳定性。该酶对金属离子的耐受能力较强,Cu2+对该酶活有激活作用,与常见的增稠剂及化学试剂配伍性良好。在处理羊毛方面,该蛋白酶可以较好的水解磷脂层,而对皮质层的损害比较轻微,表现出良好的处理羊毛特性及发展潜力。; 郝建华刘均忠王跃军王伟王芳孙谧; 关键词：化学性质羊毛处理

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