叶明强
- 作品数:7 被引量:12H指数:2
- 供职机构:西南大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 家蚕抗菌肽及其cDNA序列与应用
- 本发明公开一种家蚕抗菌肽BmcecE及其cDNA序列与应用,该抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,编码cDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的家蚕抗菌肽对革兰氏阳性菌(苏云金芽孢杆菌),以及...
- 黄亚东叶明强邓小娟杨婉莹韩冬丁长才程廷才温硕洋夏庆友曹阳
- 家蚕抗菌肽及其cDNA序列与应用
- 本发明公开一种家蚕抗菌肽BmcecE及其cDNA序列与应用,该抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,编码cDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的家蚕抗菌肽对革兰氏阳性菌(苏云金芽孢杆菌),以及...
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- 文献传递
- 黑腹果蝇抗真菌肽Drs及其同系物基因的原核表达与蛋白纯化研究被引量:2
- 2007年
- 【目的】Drosomycin(Drs)是从黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中鉴定发现的对丝状真菌有广谱抗性的抗真菌肽因子,此外,在黑腹果蝇基因组中,还存在另外6条Drs同系物的基因序列,对它们推导的氨基酸序列具有与Drs相同的保守位点和CSαβ模体结构。为鉴定Drs及其6个同系物的抗性功能差异,研究其分子结构与功能的关系,需要对这些同系物基因进行克隆表达,获得有生物学活性的纯化样品。【方法】本文采用PCR分段互补合成的方法准确地获得了Drs同系物基因,并克隆至pET-3C载体上,转化到宿主菌E.coli Origami(DE3)中进行诱导表达,表达产物经阳离子CM SepharoseTM Fast Flow层析、凝胶过滤Sephacryl S-100 High Resolution层析和包涵体的复性及Sephadex G-25脱盐等纯化处理后,进行抑菌活性检测。【结果】经纯化的7个Drs同系物的短肽样品,除Drs-lI外,其它的Drs同系物样品对供试真菌水稻立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)均有较强的抑制作用。【结论】表明本研究中使用的纯化及复性方法对具有多个二硫键的小分子多肽是比较有效的。
- 杨婉莹温硕洋邓小娟叶明强夏庆友曹阳黄亚东
- 关键词:黑腹果蝇抗真菌肽同系物蛋白纯化
- 家蚕BmcecD1基因编码成熟肽在制备抗大肠杆菌或绿脓杆菌药物中的应用
- 本发明公开一种家蚕BmcecD1基因编码成熟肽在制备抗大肠杆菌或绿脓杆菌药物中的应用,所述家蚕BmcecD1基因编码成熟肽的氨基酸序列如SEQID NO:1所示。家蚕BmcecD1基因编码成熟肽BmcecD1对大肠杆菌的...
- 黄亚东叶明强邓小娟杨婉莹韩冬丁长才程廷才温硕洋夏庆友曹阳
- 文献传递
- 家蚕拟抗微生物肽Gloverins基因(Bmglv)的原核表达及抗菌活性鉴定被引量:4
- 2008年
- 家蚕Bombyx mori基因组全测序于2004年完成后,由家蚕基因组注释发现了35条拟抗微生物肽基因序列。本研究选取其中的5条Gloverins同系物(isoforms)基因(BmglvB,BmglvA2,BmglvA3,BmglvA5和BmglvA6),克隆至pET-21d载体,转化Escherichia coli RosettaTM(DE3)宿主菌进行表达;克隆表达的5个家蚕Gloverins同系物基因大部分以可溶形式表达,经Ni-NTA亲和层析纯化和Sephadex G-10脱盐处理后,采用平板孔穴抑菌法测定其抗菌活性。结果表明:注释发现的5条家蚕拟抗微生物肽Gloverins同系物基因,具有与在其他昆虫中已鉴定报道的Gloverin相似的抗革兰氏阴性细菌的功能,实验确认了它们就是家蚕Gloverins抗微生物肽基因。
- 韩冬邓小娟杨婉莹叶明强曹方黄亚东温硕洋曹阳夏庆友
- 关键词:家蚕抗微生物肽原核表达抗菌活性
- 家蚕拟抗微生物肽Bmatt 1基因的原核表达及抗菌活性鉴定
- 家蚕基因组存在着包括溶菌酶基因在内的编码七大类抗微生物肽或抗菌蛋白Cecropins、Moricins、Attacins、Enbocins、Gloverins、Lebocins和Lysozyme的基因群,除了Lysozy...
- 叶明强杨婉莹邓小娟韩冬曹阳温硕洋夏庆友
- 关键词:家蚕抗微生物肽原核表达抗菌活性
- 文献传递
- 黑腹果蝇抗真菌肽基因Drs和Drs-lC的原核可溶性表达及抗真菌活性测定被引量:7
- 2006年
- Drosomycin (Drs)是第1个从黑腹果蝇Drosophila melanogaster体内鉴定发现的昆虫抗真菌肽因子。它对细菌无明显的抗性,但对丝状真菌具有高效广谱的抑杀作用。此外,在黑腹果蝇基因组还存在着Drs的另外6个同系物的基因序列,其中同系物Drosomycin-lC(Drs-lC)的抗真菌谱仅次于Drs。将Drs抗真菌肽基因(Drs)和同系物Drs-lC基因(Drs-lC)进行可溶性表达,对果蔬等农产品防腐保鲜的研究有应用前景。本实验将Drs和Drs-lC分别克隆到硫氧还蛋白(Trx)融合表达载体pThiohis A中,转化宿主菌TOP10 ,进行可溶性表达,并从诱导表达的菌液起始浓度、IPTG的诱导浓度及诱导时间等方面进行了表达条件的优化。结果表明2种融合蛋白Trx-Drs和Trx-Drs-lC大部分以可溶形式表达,可溶性表达的Trx-Drs在上清液中约占菌体总蛋白的22 %。2种融合蛋白的表达产物经Ni-NTA亲和层析得到纯化。生测结果表明,2种融合蛋白分别对8种供试真菌中的5种真菌显示明显的抗性。
- 段云邓小娟叶明强杨婉莹黄亚东温硕洋曹阳
- 关键词:黑腹果蝇抗真菌肽可溶性表达抗真菌活性