韩堃
- 作品数：11 被引量：28H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金教育部“春晖计划”内蒙古自治区人才开发基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 趋化因子及其受体在肿瘤转移中作用的研究进展被引量：3
- 2012年
- 肿瘤的转移是疾病恶化的重要指征,也是由多种细胞因子参与的复杂的调控过程。研究揭示,除诱导正常细胞发生基因突变之外,趋化因子与趋化因子受体在肿瘤转移的多个阶段均发挥调控作用。本综述按照肿瘤的发展过程,对趋化因子及其受体在肿瘤转移中的调控作用进行总结。
- 韩堃黎燕陈国江
- 关键词：趋化因子趋化因子受体
- 共表达羊布氏菌P39基因与增强型绿色荧光蛋白基因逆转录病毒质粒的构建
- 2011年
- 目的构建共表达羊布氏菌胞质结合蛋白P39基因和增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的逆转录病毒质粒。方法提取羊布氏菌全基因组DNA,PCR扩增P39基因,连接至pMD19-T载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α,经克隆筛选并进行序列测定后,将P39基因连接至逆转录病毒载体pRevIRES-EGFP的多克隆位点上,转化感受态大肠杆菌DH5α,提取重组逆转录病毒质粒pRevP39-IRES-EGFP,进行酶切鉴定。结果从羊布氏菌基因组中扩增出约1 400 bp的P39基因,与GenBank中登录的羊布氏菌16M菌株P39基因序列同源性达99%;重组逆转录病毒质粒pRevP39-IRES-EGFP经双酶切鉴定构建正确。结论已成功构建了共表达羊布氏菌P39基因和EGFP基因的重组逆转录病毒质粒pRevP39-IRES-EGFP,为后续研究奠定了基础。
- 石艳春韩堃毛颖佳郑源强
- 关键词：绿色荧光蛋白质类逆转录病毒
- 羊布鲁氏菌omp25基因原核表达载体的构建与鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的:利用PCR反应从羊布鲁氏菌基因组DNA中克隆omp25基因,并将其构建到原核表达载体pET-32a中。方法:试剂盒法提取羊布鲁氏菌基因组DNA,设计合适的引物,通过PCR反应从基因组中扩增外膜蛋白OMP25的编码基因(omp25)。将得到的基因片段连接到克隆载体pMD19-T的多克隆位点(MCS)中,将连接体pMD19-T-omp25转化感受态大肠杆菌DH5(并进行筛选和克隆扩增,提取质粒并进行酶切分析与序列测定。利用酶切与连接反应将目的基因(omp25)插入载体pET-32a的多克隆位点中,将连接体pET-32a-omp25转化感受态大肠杆菌DH5(并进行筛选和克隆扩增,提取质粒并进行酶切分析。结果:PCR扩增得到的基因片段与GenBank中已公布的羊布鲁氏菌omp25基因同源性为99%。酶切分析结果表明,omp25基因成功地插入载体pET-32a中。结论:成功地扩增得到了羊布鲁氏菌omp25基因并构建了携带该基因的重组原核表达载体pET-32a-omp25,为后续的研究提供了可靠的基础。
- 石艳春韩堃郑源强吴岩毕力夫
- 关键词：原核表达载体克隆
- Neddylation in Immunity:More Known and More Need to Know
- NEDD8,a ubiquitin-like molecule,can be covalently conjugated to target proteins through an enzymatic cascades ...
- 韩堃张纪岩沈倍奋
- 关键词：NEDDYLATION
- 文献传递
- 两种CpG寡核苷酸对乙型肝炎疫苗免疫小鼠淋巴细胞增殖的影响被引量：4
- 2008年
- 目的观察人工合成的两种CpG寡核苷酸(CpG ODN)对乙型肝炎疫苗免疫小鼠淋巴细胞增殖效应的影响。方法BALB/c小鼠分别经乙肝疫苗、乙肝疫苗+CpG1826和乙肝疫苗+CpG2006免疫后,取小鼠脾和胸腺淋巴细胞,进行非特异性和特异性淋巴细胞增殖试验,应用MTT法分别检测淋巴细胞增殖效应。结果CpG两组与疫苗组及对照组相比,脾淋巴细胞增殖效应均显著增强,CpG1826组均优于CpG2006组,且差异有统计学意义;CpG两组的胸腺淋巴细胞非特异性增殖效应也显著增强,但CpG两组之间差异无统计学意义。结论CpG1826和CpG2006均能明显刺激BALB/c小鼠脾脏及胸腺淋巴细胞增殖,且CpG1826显示出更强的脾淋巴细胞免疫刺激效应。
- 韩堃郑源强韩新荣石艳春
- 关键词：CPG寡核苷酸乙型肝炎疫苗增殖效应佐剂
- 羊布氏菌P39基因重组真核表达质粒的构建及其免疫效果被引量：2
- 2011年
- 目的构建羊布氏菌P39基因重组真核表达质粒,并检测其免疫效果。方法将前期克隆的P39基因片段连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-P39,转化E.coli DH5α,筛选阳性克隆,提取重组质粒,进行双酶切鉴定。以鉴定正确的重组质粒免疫BALB/c小鼠,凝集试验检测小鼠血清特异性抗体水平,ELISA法检测小鼠血清中细胞因子含量,MTT掺入法检测小鼠脾脏淋巴细胞的增殖效应。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1-P39经双酶切鉴定构建正确;该重组质粒能够刺激小鼠产生特异性抗体(抗体峰值滴度为1∶320),显著增加Th1型细胞因子的产生,并能够增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖反应。结论成功构建了羊布氏菌P39基因重组真核表达质粒pcDNA3.1-P39,该重组质粒能够诱导BALB/c小鼠产生特异性免疫应答。
- 石艳春韩堃郑源强毕力夫
- 关键词：真核细胞基因表达免疫效果
- GTP酶激活蛋白(Src同源结构域3)结合蛋白1表达下调对人肺癌细胞A549体外迁移的抑制作用
- 2012年
- 目的研究GTP酶激活蛋白(Src同源结构域3)结合蛋白1〔GTPase activating protein(Src homology domain 3)binding protein 1,G3BP1〕是否在人非小细胞肺癌细胞系A549体外迁移中起作用,以判断该蛋白质是否可以作为抗肿瘤药物靶点。方法人非小细胞肺癌细胞系A549及乳腺癌细胞系MDA-MB-231培养于10%(V/V)的RPMI1640培养基中。以G3BP1过表达的乳腺癌细胞系MDA-MB-231作为阳性对照,采用Western印迹法检测A549细胞内G3BP1的表达情况;向A549细胞内转染以G3BP1的mRNA为靶标的小干扰RNA(siRNA)以抑制G3BP1的表达;分别检测G3BP1表达抑制后A549细胞穿过8μm聚碳酸酯膜细胞数、定向运动距离及穿过人工基底膜细胞数。结果 Western印迹法显示G3BP1在非小细胞肺癌细胞系A549中过表达;转染siRNA后72 h内提取A549细胞蛋白质,Western印迹法检测显示G3BP1表达被完全抑制;G3BP1表达抑制后A549细胞穿过8μm聚碳酸酯膜细胞数、定向运动距离及穿过人工基底膜细胞数均显著减少(P<0.05)。结论下调G3BP1表达抑制人肺癌细胞A549的体外迁移。
- 韩堃张宁耿华陈国江黎燕
- 关键词：非小细胞肺癌
- 细胞核移植技术的发展及其应用
- 2007年
- 自“克隆”一词被提出到克隆羊“多莉”的降生,克隆已经发展了近一个世纪,其中细胞核移植技术始终是克隆技术的核心。本文综述了细胞核移植技术的克隆背景、分类、发展历程、影响因素及应用的研究进展。
- 韩堃刘东军
- 关键词：克隆
- 人类辅助生殖技术研究进展被引量：15
- 2008年
- 自从世界上第1例"试管婴儿"诞生以来,人类辅助生殖技术已经走过了30年的发展历程。随着人们对配子与胚胎培养条件的不断优化,辅助生殖技术的成功率显著提高,现已成为治疗不孕不育症的理想治疗措施之一。近年来,一系列辅助生殖相关技术,如卵子体外成熟、移植前遗传学诊断、单胚胎移植以及冷冻技术等获得了较大的发展,为降低常规体外受精—胚胎移植的费用、风险等提供了可能。该文主要就当前临床及实验性辅助生殖技术的相关研究进展作以综述。
- 韩堃郑源强石艳春
- 关键词：辅助生殖技术体外受精胚胎
- G3BP1在乳腺癌与肺癌细胞体外迁移中作用的研究
- 目的:研究GTP酶激活蛋白-Src同源结构域3-结合蛋白1[GTPase activatingprotein-(Src homology domain3)-binding protein1，G3BP1]是否参与了人乳腺癌...
- 韩堃
- 关键词：乳腺癌肺癌细胞迁移信号通路免疫印迹法
