韩斌
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：甘肃农业大学草业学院更多>>
- 发文基金：甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 溶菌酶-绿色荧光蛋白(Lyz-GFP)双元基因对苜蓿转化的研究
- 苜蓿（Medicago sativa L.）属豆科多年生草本，是世界上最重要的饲料作物，在苜蓿的生产实践中往往会遇到一些病原微生物的侵染而导致苜蓿病害，病害严重时造成苜蓿减产和毁灭性损伤，带来极大的生产和经济损失。将抗病...
- 韩斌
- 关键词：饲料作物苜蓿种植抗病育种
- GFP基因在苜蓿转化组织中的荧光表达量分析被引量：1
- 2010年
- 利用农杆菌介导法将溶菌酶(Lyz)与绿色荧光蛋白(GFP)基因转入"甘农3号"紫花苜蓿(Medicago sativa)中,获得含有双元基因的紫花苜蓿转基因植株。在荧光显微镜下对不同处理、不同培养时期的苜蓿转化愈伤组织及再生转化植株进行荧光检测和荧光表达量的对比分析。结果表明:经预培养的转化愈伤组织中的荧光表达量明显高于未经预培养的转化子;3 d为共培养的最佳时间;侵染时经过摇床上摇动的负压处理,荧光表达量高于静止状态;共培养3 d后的转化荧光表达量达最强,随培养时间延长,表达量少量减少,但能够稳定表达。
- 韩斌马晖玲李云霞
- 关键词：苜蓿荧光检测
- Lyz-GFP双元基因在苜蓿愈伤组织中的转化被引量：2
- 2010年
- 利用农杆菌介导法将溶菌酶（Lyz）与绿色荧光蛋白（GFP）基因转入＂甘农1号＂杂花苜蓿（Medicago sativaMartyn）和＂甘农3号＂紫花苜蓿（Medicago sativaL.）品种中,获得含有该双元基因的苜蓿转基因愈伤组织;采用荧光检测和PCR扩增技术,检测到溶菌酶Lyz和绿色荧光蛋白GFP基因在苜蓿愈伤细胞中的表达;研究该双元基因在苜蓿品种＂甘农1号＂和＂甘农3号＂中转化的若干影响因素,确定适宜的转化条件以期提高基因转化效率。结果表明：75 mg.L-1的卡那霉素对苜蓿愈伤组织的生长具有显著抑制效应;300 mg.L-1头孢霉素能够有效地抑制农杆菌LBA4404的生长;OD600值为0.4~0.5的农杆菌适宜的侵染时间是10 min;经预培养3~4 d的材料侵染后再共培养3 d之后,在愈伤组织诱导培养基MS＋2,4-D 2.0 mg.L-1＋KT 0.5 mg.L-1＋0.6%琼脂＋2.5%蔗糖的培养基上诱导出抗性愈伤组织;＂甘农1号＂和＂甘农3号＂的抗性愈伤组织诱导率分别为35%和32%。
- 韩斌马晖玲李云霞
- 关键词：苜蓿愈伤组织农杆菌介导
