方菲
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：上海师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲胎蛋白和癌胚抗原的胶体金免疫层析同步检测被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨建立一种同时快速检测甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)两种肿瘤标志物的方法。方法:用胶体金分别标记鼠抗AFP单克隆抗体和鼠抗CEA单克隆抗体,喷于胶金垫上,与之配对的抗体喷在硝酸纤维素膜(NC膜)上分别做检测线T2和T1,兔抗鼠二抗喷在NC膜上做质控线,利用免疫层析技术进行检测。结果:采用Frens方法制备的胶体金粒径在20 nm,紫外可见吸收峰在521 nm处,金标抗体的最适pH在9.0,最适抗体量为200μl,胶体金标记2.4μg抗体。测试结果表明同时检测AFP和CEA的试纸条灵敏度分别为20 ng.mL-1和5 ng.mL-1,检测时间仅需10 min,与PSA、CA125、CA15-3、Ferritin、Human Albumin等没有交叉反应,稳定性好。结论:应用胶体金免疫层析技术,实现了AFP和CEA的同步检测。
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- 关键词：胶体金免疫层析甲胎蛋白癌胚抗原
- 基于上转磷光颗粒的AFP免疫层析定量检测被引量：6
- 2009年
- 目的:建立了上转磷光免疫层析快速定量检测AFP的方法,用于原发性肝癌的诊断。方法:利用上转磷光标记的双抗夹心免疫层析技术检测血清中AFP的含量。将AFP单克隆抗体分别标记上转磷光颗粒并包被硝酸纤维膜,制成免疫层析检测试纸。评价该试纸的灵敏度、特异性和精密度。并通过临床50例血清样本,探讨上转磷光技术与化学发光检测方法的一致性。结果:该方法能在20min内完成,检测灵敏度达5ng/ml。浓度范围从5-1000ng/ml作标准曲线,呈现较好的线性。通过三组平行实验探讨其精密度,变异系数都在10%以内。应用于其它肿瘤标志物如CEA、CA199、AFU和NSE的检测,无交叉反应。与化学发光相比,决定系数R2=0.9692,一致性较好。结论:该方法简便、快速、廉价,可以实现定量,尤其适合基层门诊和体检现场使用。
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- 关键词：甲胎蛋白
- 核-壳型磁性纳米微球的制备及在核酸提取中的应用被引量：4
- 2009年
- 目的:改进传统的溶胶-凝胶方法而制备得表面包裹SiO_2的核-壳型磁性纳米微球,然后将表面连有链霉亲和素的磁性纳米微球应用于生物样品中核酸的分离方法:用透射电子显微镜(TEM)、红外光谱(FTIR)、X射线衍射仪(XRD)和磁强计(VSM)对得到的纳米微球进行表征,最后用电泳验证核酸。结果:表明制备得到的磁性纳米微球表面包裹SiO_2,粒径均匀,分散性良好,并且具有超顺磁性和较大的比饱和磁化强度。电泳结果表明磁性微球可以很好地从细胞悬液、组织、血液等样品中分离得到高质量的核酸。结论:该方法简便快速有效,其过程不需要使用任何有毒溶剂,操作简单。
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- 关键词：磁性纳米粒子溶胶-凝胶法
- 神经元特异性烯醇酶和癌胚抗原胶体金免疫层析联合检测
- 2011年
- 目的:应用双抗夹心胶体金免疫层析方法,实现对神经元特异性烯醇化酶(NSE)和癌胚抗原(CEA)两种肺癌肿瘤标志物的快速联合检测。方法:采用柠檬酸三钠还原法制备20nm胶体金颗粒,并分别对鼠抗NSE、CEA单克隆抗体进行标记,分别与之相配对的另一种单克隆抗体被喷在硝酸纤维素膜(NC膜)上,制成免疫层析检测试条。溶液中的抗原NSE、CEA与金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上固定的抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果:该试纸条只与NSE、CEA有特异性反应,与CA125、CYFRA21-1、TPA等肺癌标志物无交叉反应。标准样品中两种抗原的检测灵敏度分别可达到5ng/mL和3ng/mL。结论:胶体金免疫层析技术检测NSE、CEA特异性强、灵敏度高、简便快速,不需特殊仪器设备,有广泛应用价值。
- 孙红英方菲赵露晶邢国杰沈鹤柏
- 关键词：NSECEA胶体金免疫层析
