王荣
- 作品数:6 被引量:14H指数:2
- 供职机构:太原市中心医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 银屑病患者骨髓基质细胞分泌转化生长因子β1、干细胞因子、角质形成细胞生长因子、肿瘤坏死因子α水平检测被引量:2
- 2012年
- 目的通过检测银屑病患者骨髓基质细胞分泌转化生长因子(TGF-β1)、干细胞因子(scF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和角质形成细胞生长因子(KGF)水平,探讨银屑病患者骨髓造血微环境的变化。方法寻常性银屑病患者20例,进行期10例,静止期10例,银屑病皮疹面积和严重程度(PAsI)范围为0.6~22.8,平均10.97。健康对照组20例为骨髓象正常者。采用密度梯度离心法分离骨髓单一核细胞,通过贴壁法培养骨髓基质细胞。收集传3代后继续培养72h的骨髓基质细胞及上清液,用流式细胞仪鉴定细胞表面标志,ELISA法检测上清液中TNF-α、TGF—β1、KGF和SCF的表达水平。银屑病组和对照组间各检测指标比较采用t检验,细胞因子与PASI相关性分析采用Pearson相关分析。结果倒置显微镜下,银屑病组与健康对照组的骨髓基质细胞形态无显著差异,90%以上表面抗原CD29高表达,而CD34、CD45及HLA—DR表达为阴性。银屑病患者骨髓基质细胞分泌的TNF—α(22.93±10.11μg/L)显著低于健康对照组(35.73±15.15μg/L,两组比较,t=3.14,P〈0.05),SCF表达水平(76.80±16.19μg/L)明显高于健康对照组(59.86±22.41μg/L,两组比较,t=2.74,P〈0.05),而KGF、TGF—β1的分泌量与健康对照组比较差异均无统计学意义(P〉0.05)。银屑病患者组SCF、TNF-μ、KGF、TGF—β1分泌水平与PASI无相关关系(P值均〉0.05)。结论银屑病患者骨髓基质细胞分泌的TNF—α、SCF存在异常,表明银屑病患者骨髓造血微环境存在异常。
- 潘智慧王丽贾珍刘瑞风王荣张永翠李欣张开明
- 关键词:转化生长因子Β1干细胞因子肿瘤坏死因子Α成纤维细胞生长因子
- 皮肤间充质干细胞的原代培养被引量:8
- 2012年
- 目的评估体外分离培养皮肤间充质干细胞(sMSCs)的适宜方法。方法采用低血清培养和无血清培养两种不同的原代培养法,体外培养皮肤间充质干细胞,通过观察细胞形态特征及流式细胞技术进行鉴定,比较其差异。结果两种培养法均能培养出形态均一、成熟的皮肤间充质干细胞,但是低血清法培养细胞所用时间8.93d明显小于无血清培养法所需时间15.93d,差异有统计学意义(P<0.001),且低血清法培养出的细胞较无血清培养方法得到的皮肤间充质干细胞的CD44阳性率较高,CD45阴性率较低,差异有统计学意义(P<0.001)。结论低血清培养法是一种适用于临床试验研究皮肤间充质干细胞的原代培养方法。
- 潘智慧王丽刘瑞风张永翠李欣王荣刘小民张开明
- 关键词:间充质干细胞皮肤体外培养
- 银屑病患者外周血T细胞差异表达基因的初步探讨
- 2012年
- 银屑病是一种以表皮过度增殖及T细胞浸润为主要病理特征的皮肤病,T细胞免疫异常在其发病中发挥重要作用。但是对T细胞的研究大多集中在其细胞活性和分泌的细胞因子.对T细胞差异表达基因的研究尚未见详细的报道。我们采用Illumina Genome Analyzer技术对银屑病患者外周血T细胞差异表达基因进行了分析。结果报告如下。
- 李欣郑瑞李俊琴李新华侯瑞霞潘智慧王荣张永翠张开明
- 关键词:银屑病T细胞差异表达基因
- 骨髓间充质干细胞对骨髓CD34^+细胞增殖影响的体外研究
- 2012年
- 研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC)对骨髓CD34+细胞增殖的影响,为骨髓CD34+细胞体外扩增的深入研究提供依据。用MACS进行骨髓CD34+细胞的分选;用流式细胞术进行CD34+细胞纯度鉴定;用密度梯度离心法分离引产胎儿骨髓单个核细胞,结合贴壁法进行BMMSC的体外扩增培养;用流式细胞术进行BMMSC表面标志鉴定;用Transwell培养板培养CD34+细胞与BMMSC;用自动细胞计数仪计数有活性的CD34+细胞数量;用MTT比色法检测骨髓CD34+细胞增殖活性。流式细胞术检测结果显示分选所得的CD34+细胞纯度达到90%以上;流式细胞术检测显示传至第3代继续培养72h后的BMMSC高表达CD44、CD29,而HLA-DR、CD45、CD34表达阴性,说明所培养的BMMSC纯度很高;Transwell培养板培养CD34+细胞与BMMSC,在倒置显微镜下观察以及自动细胞计数仪计数发现,实验组有活性的CD34+细胞数量高于对照组(P<0.05);采用MTT比色法检测骨髓CD34+细胞的增殖活性,实验组高于对照组(P<0.05)。以上结果说明BMMSC有促进骨髓CD34+细胞增殖的作用,这种作用可能与其分泌的细胞因子有关。
- 王荣刘瑞风侯瑞霞李俊琴闫鑫杨元文潘智慧尹国华张静张开明
- 关键词:CD34+细胞增殖
- 骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化过程在银屑病发病中的作用被引量:3
- 2012年
- 目的:将银屑病患者骨髓间充质干细胞(BMMSCs)体外分化为血管内皮细胞(VEC),并对定向分化的VEC活性进行初步研究,为银屑病患者BMMSCs生物特性的深入研究提供依据。方法:寻常型银屑病患者20例,健康对照组15例为骨髓象正常者。采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,通过贴壁法培养BMMSCs,流式细胞仪鉴定细胞表面标志;加入血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导BMMSCs向VEC分化,流式细胞仪进行细胞表型鉴定;免疫细胞荧光技术鉴定VEC标志物VWF的表达;体外血管成形试验检测诱导的内皮细胞体外成形能力。结果:流式测定显示两组培养的BMMSCs高表达CD44、CD29,而HLA-DR、CD45、CD34阴性表达;银屑病组CD34、CD45、ICAM-1、HLA-DR阳性表达,且明显高于对照组(P﹤0.05);免疫细胞化学显示两组都可分化为VEC,与正常对照组比较具有统计学差异(P﹤0.05),银屑病患者诱导的VEC体外血管成形能力较强。结论:银屑病患者BMMSCs生物学活性异常,且易于转分化为VEC。银屑病患者BMMSCs-VEC发育分化系统在银屑病患者皮损真皮乳头层微血管异常增生过程中可能发挥重要的作用。
- 张永翠刘瑞风任国华朱爱茹王荣李新华尹国华张开明
- 关键词:银屑病骨髓间充质干细胞血管内皮细胞
- 不同来源骨髓间充质干细胞对CD34^+细胞增殖的影响被引量:1
- 2012年
- 背景:作者前期研究显示,银屑病患者与正常人骨髓间充质干细胞的生物学特性、免疫学反应及抗原提呈功能有明显差异,而与流产胎儿骨髓间充质干细胞无明显差异。目的:观察不同来源骨髓间充质干细胞对正常人骨髓CD34+细胞增殖的影响。方法:密度梯度离心法分离银屑病患者和流产胎儿骨髓单一核细胞并培养、传代,传至第2代72h后收集培养上清液,流式细胞仪鉴定骨髓CD34+细胞及骨髓间充质干细胞纯度。倒置显微镜下观察培养细胞的生长状态,细胞磁珠分选仪分选出的正常人骨髓CD34+细胞加入骨髓间充质干细胞培养上清液培养24h后,四甲基偶氮唑盐比色法检测骨髓CD34+细胞的增殖活性。结果与结论:CD34+细胞加入银屑病患者和流产胎儿骨髓间充质干细胞培养上清培养24h后,细胞形态无差别。银屑病患者和流产胎儿骨髓间充质干细胞培养上清液对正常人骨髓CD34+细胞增殖的影响差异无显著性意义(P>0.05)。
- 王荣刘瑞风张永翠潘智慧李欣刘小民尹国华张静张开明
- 关键词:银屑病CD34+细胞骨髓间充质干细胞增殖活性