颜次慧
- 作品数：12 被引量：33H指数：4
- 供职机构：北京协和医学院血液病医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MCP-1／CCR2轴促进脐带间充质干细胞向肺癌组织归巢被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoatractant protein-1,MCP-1)/趋化因子(C-C模体)受体2[chemokine(C-C motif)receptor 2,CCR2)轴在人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs)向肺癌归巢中的作用。方法:采用组织块培养法从健康新生儿脐带组织中分离HUMSCs并鉴定,构建BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型。体外应用Transwell趋化实验、体内应用IVIS Xenogen动物活体成像系统检测HUMSCs是否向肺癌归巢,ELISA法检测肺癌细胞A549培养上清中MCP-1分泌水平,转染shRNA敲低肺癌细胞内MCP-1的表达和用抑制剂RS504393抑制HUMSCs细胞表面的MCP-1受体CCR2后,体内外检测HUMSCs向肺癌归巢能力的改变。结果:成功分离得到HUMSCs并完成鉴定,成功建立BALB/c裸鼠皮下肺癌移植瘤模型。HUMSCs在体内外均能向肺癌归巢(P<0.01),肺癌细胞高表达MCP-1。成功构建稳定低表达MCP-1的肺癌A549细胞系,与对照组相比,shRNA1和shRNA2敲低组趋化HUMSCs的数目明显减少[(80.0±33.0)、(94.0±16.0)vs(167.0±41.0)个,均P<0.05],抑制HUMSCs细胞表面MCP-1受体CCR2后,体内外均显著抑制HUMSCs向肺癌的趋化能力(P<0.05)。结论:MCP-1/CCR2轴促进HUMSCs向肺癌归巢。
- 宋新苗颜次慧吕梦果于文文张新伟任秀宝
- 关键词：间充质干细胞单核细胞趋化蛋白-1肺癌归巢
- 自噬在细胞生存和肿瘤发生中的作用被引量：11
- 2005年
- 自噬是广泛存在于真核细胞中的生命现象,它与细胞的正常生长发育进程以及多种疾病的发生发展密切联系。调控自噬的分子和信号传导途径错综复杂,作为Ⅱ型程序性死亡,自噬与凋亡相互作用,参与了细胞稳定状态的维持和疾病发生过程。近年来研究表明,自噬还可从细胞周期、凋亡相关因子、肿瘤形成过程及血管生成等方面影响肿瘤的发生与发展。
- 颜次慧梁中琴顾振纶秦正红
- 关键词：自噬肿瘤程序性死亡信号传导
- 骨桥蛋白预测早期非小细胞肺癌患者预后的意义被引量：2
- 2015年
- 目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达和预后意义。方法采用免疫组织化学法检测84例非小细胞肺癌组织中OPN表达情况,利用χ2检验和Kaplan-Meier生存曲线分析OPN表达与临床病理相关因素及患者术后总生存时间(overall survival,OS)、无疾病生存时间(disease-free survival,DFS)的关系。结果 84例非小细胞肺癌组织中OPN阳性表达率为83.3%(70/84)。在早期患者中,OPN阴性表达组DFS和OS长于OPN阳性组(χ2=9.722,P=0.019;χ2=6.064,P=0.014)。而晚期患者OPN阴性表达组DFS和OS与阳性组间比较差异无统计学意义。结论非小细胞肺癌组织中存在OPN表达,OPN可能成为预测早期NSCLC患者预后的参考指标。
- 吕梦果颜次慧宋新苗曹水
- 关键词：骨桥蛋白非小细胞肺癌免疫组织化学预后
- 抗CD20 ScFv-TRAIL融合蛋白的构建表达及其对BJAB淋巴瘤细胞生长的抑制作用
- ＜正＞目的:构建抗CD20 ScFv-TRAIL融合蛋白并检测其对BIAB淋巴瘤细胞生长的抑制作用。方法:利用PCR方法从抗CD20Fab抗体表达载体扩增抗CD20抗体轻链可变区基因（VL）、重链可变区基因（VH）,采用...
- 颜次慧杨铭李双静熊冬生
- 文献传递
- 人脐带来源间充质干细胞向HepG2肝癌细胞原位移植瘤的归巢及分化被引量：7
- 2017年
- 目的:观察人脐带来源的间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cell,HUMSC)向HepG2肝癌细胞原位移植瘤的归巢及分化。方法:二步法体外诱导HUMSC向肝细胞分化,通过Real-time PCR和Western blotting检测不同时间点HUMSC中肝细胞特异性基因甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)及白蛋白(albumin,ALB)mRNA和蛋白水平的变化;Transwell实验观察HUMSC在HepG2肝癌细胞条件培养基作用下的趋化现象;采用皮下-原位移植的方法建立BALB/c裸鼠的HepG2肝癌细胞原位移植瘤模型,利用慢病毒感染的方法将HUMSC标记CMV或AFP启动子驱动的f Luc,制备成MSC.CMVLuc或MSC.AFPLuc,并将其注射入荷瘤肝组织,IVIS成像系统观察MSC.CMVLuc向肿瘤部位的迁移归巢及MSC.AFPLuc在肝癌微环境中向肝细胞分化。结果:HUMSC在体外诱导培养过程中出现细胞形态学变化证明其向肝细胞分化,同时诱导培养后AFP、ALB mRNA和蛋白的表达明显升高(均P<0.05);HUMSC向HepG2肝癌细胞的趋化呈瘤细胞密度依赖性(P<0.01);MSC.CMVLuc注射后2 d迁移并聚集于肝脏,注射后5 d肝脏内发光信号进一步增强;MSC.AFPLuc肝内注射后24 h已向肝细胞分化,注射第7天AFP启动子活性最强,注射第9天活性消失。结论:在小鼠体内外证明了HUMSC具有向肝脏归巢及分化的能力,为今后MSC应用于肝癌基因靶向治疗提供了一种新的策略。
- 范冬梅张子祥赵英新杨铭张砚君颜次慧蒋媛吕军强
- 关键词：间充质干细胞肝癌归巢分化
- 基因工程抗体抗CD19(Fab)-LDM的制备及生物学活性研究被引量：5
- 2013年
- 目的构建及表达抗CD19(Fab)-LDP(LDP为LDM辅基蛋白)融合蛋白,制备强化融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM,进行体外生物活性的研究。方法采用基因克隆技术,构建基因重组质粒pAZYanti-CD19(Fab)-LDP,测序进行鉴定,转化至大肠杆菌进行表达,表达产物经Protein G亲和层析柱纯化后,进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定;采用流式细胞检测技术(FACS)和激光共聚焦显微镜技术,检测融合蛋白与B淋巴瘤Raji细胞的结合活性;采用间接免疫荧光法,检测CD19介导细胞内化的情况;采用MTT法检测强化融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对CD19+Raji细胞的靶向杀伤活性;采用彗星电泳的方法,检测强化融合蛋白对Raji细胞DNA的损伤程度。结果用基因工程方法成功的构建、表达融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDP,Protein G亲和层析柱纯化后在SDS-PAGE上表现为相对分子质量约60 ku蛋白条带,且融合蛋白可与Raji细胞特异结合,并能介导细胞的内化;强化融合蛋白对Raji细胞具有较强的细胞毒性,并能引起细胞DNA损伤。结论强化融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM可以靶向作用于B淋巴瘤细胞,并具有较强的抗肿瘤活性,在恶性B淋巴瘤生物治疗中具有潜在的应用价值。
- 姜琳琳张孝云马莉颜次慧齐怀丰熊冬生范冬梅
- 关键词：CD19力达霉素基因工程抗体DNA损伤
- AFP启动子调控下TRAIL在脐带间充质干细胞中的特异性表达
- ＜正＞目的:研究体外诱导下脐带间充质干细胞向肝细胞分化以及AFP启动子调控下肿瘤因子相关凋亡诱导配体TRAIL的特异性表达。方法:二步法体外诱导脐带间充质干细胞向肝细胞分化,通过real-time PCR和western...
- 颜次慧杨铭李真真熊冬生
- 文献传递
- 自噬与凋亡机制在crotoxin诱导的K562和MCF-7细胞死亡中的相互作用
- 目的:研究自噬与凋亡机制在crotoxin诱导的K562(高酪氨酸蛋白激酶活性)和MCF-7(caspase-3缺陷)细胞死亡中的相互作用。 方法:采用MTT法筛选敏感瘤株,结合LDH漏出率检测不同抑制剂对cro...
- 颜次慧
- 关键词：CROTOXIN自噬凋亡
- 文献传递
- 以CD20为靶向并利用trimeric TRAIL抗B-NHL的生物治疗方法研究
- <正>目的已知CD20是B-非霍奇金淋巴瘤(NHL)的重要治疗靶点,而TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)是目前唯一一个已知的能够特异性诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞没有影响的内源性细胞因子,当在其胞外区加上异亮氨酸...
- 袁向飞颜次慧熊冬生
- 文献传递
- 白血病耐药细胞膜蛋白及其作为耐药靶蛋白的用途
- 本发明提供一种白血病耐药细胞膜蛋白及其作为耐药靶蛋白的用途。该白血病耐药细胞膜蛋白，经消减免疫法制备单克隆抗体、利用单抗和免疫共沉淀技术钓取抗原、肽指纹图谱鉴定及测序、siRNA的干扰实验表明该抗原(细胞膜蛋白)是一种富...
- 杨纯正熊冬生任思楣佘鸣纪庆王金宏邵晓枫杨铭彭洪薇李崴颜次慧
- 文献传递
