李艳君
- 作品数：5 被引量：4H指数：2
- 供职机构：青岛大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小球藻CvFad3基因在人乳腺癌细胞中的表达和作用
- 目的构建真核表达载体pEGFP-C3-n-3,检测小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3在人乳腺癌MCF-7细胞中的表达和作用。
方法通过RT-PCR法扩增得到小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3,将CvF...
- 李艳君
- 关键词：基因表达小球藻MCF-7细胞
- 文献传递
- 改性氮化碳制备皮克林乳液的方法及其应用
- 本发明公开了一种基于改性氮化碳制备皮克林乳液的方法及其应用，步骤如下：将不同比例氰胺与对苯二腈充分研磨，于马弗炉中煅烧，煅烧结束取出氮化碳研磨充分，使用浓硫酸将块状氮化碳质子化，然后在研钵中加入NaCl以去除浓硫酸，用N...
- 巩学忠杨欣欣唐建国董昭岑韩云逸侯玉伟王富智李芳活李艳君章铖管美丽
- n-3多不饱和脂肪酸脱氢酶基因fat-1在人肺癌细胞H460内的表达被引量：2
- 2011年
- n-3多不饱和脂肪酸脱氢酶基因fat-1来自于秀丽线虫(C.elegans)。为检测该基因在人肺癌细胞H460中的表达效果,本项研究构建了哺乳动物表达载体pcDNA3.1(+)myc-HisA-fat-1,以Xfet polymer介导法转染到人肺癌细胞H460中,RT-PCR检测到有效的异源基因表达,MTT法证实基因表达能有效地抑制肺癌细胞的增殖率(P<0.05),气相色谱分析基因表达前后细胞中n-6/n-3多不饱和脂肪酸比例降低(P<0.05),为将该基因用于癌症的转基因治疗奠定了基础。
- 李芳芳葛银林李艳君单虎
- 关键词：基因表达
- 人乳癌细胞小球藻CvFad3基因的表达和作用被引量：3
- 2011年
- 目的构建真核表达载体pEGFP-C3-n-3,检测小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3在人乳癌MCF-7细胞中的表达和作用。方法通过RT-PCR法扩增得到CvFad3基因,将CvFad3基因cDNA插入到真核表达载体pEGFP-C3中,构建重组表达载体pEGFP-C3-n-3,并将其转染入MCF-7细胞中,设空载体pEGFP-C3为对照组。采用RT-PCR检测CvFad3基因的表达,MTT法分析CvFad3基因对MCF-7细胞增殖的影响,气相色谱检测CvFad3基因对MCF-7细胞n-3多不饱和脂肪酸含量的影响。结果构建的重组载体pEGFP-C3-n-3转染入乳癌MCF-7细胞48 h后可检测到CvFad3基因mRNA的条带,而转染pEGFP-C3的MCF-7细胞48 h后检测不到CvFad3基因mRNA的条带。与对照组比较,转染pEGFP-C3-n-3的细胞MTT吸光度明显降低(t=6.039,P<0.01);人乳癌细胞MCF-7细胞膜n-3多不饱和脂肪酸的含量显著升高。结论重组载体pEGFP-C3-n-3构建成功,CvFad3基因能在MCF-7细胞内有效异源表达,且抑制了MCF-7细胞的增殖,增加了细胞膜n-3多不饱和脂肪酸的含量。
- 李艳君薛美兰郑征赵敏葛银林
- 关键词：基因表达普通小球藻乳腺肿瘤
- Ubc9基因重组腺病毒的构建及其在HeLa细胞中的表达
- 2011年
- 目的构建携带Ubc9基因的重组腺病毒质粒pAdEasy-1/Ubc9,制备含Ubc9基因的重组腺病毒Ad-Ubc9,并使Ubc9在HeLa细胞中高效表达。方法 PCR法扩增目的Ubc9基因;用pemI酶切将穿梭质粒pAdTrack-CMV-Ubc9线性化;将线性化的穿梭质粒pAdTrack-CMV-Ubc9与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在感受态BJ5183菌内进行同源重组,筛选阳性重组子pAdEasy-1/Ubc9;再用PacI酶切pAdEasy-1/Ubc9使之线性化,线性化的重组腺病毒质粒经脂质体转染HEK293细胞,进行重组腺病毒的包装和扩增。收集重组腺病毒,感染HeLa细胞,用Westernblot方法检测Ubc9在HeLa细胞中的表达。结果通过PacI酶切证实携带Ubc9基因的腺病毒载体构建成功,包装出携带Ubc9基因的腺病毒能有效感染HeLa细胞。结论利用细菌内同源重组方法成功地构建了携带Ubc9的重组腺病毒载体,并能在HeLa细胞中高效表达。
- 李薇刘晓萍徐祥谭艳于业军李艳君任书亭贾跃伟
- 关键词：腺病毒科HELA细胞基因表达质粒
