韩琳
- 作品数:6 被引量:16H指数:3
- 供职机构:吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:博士后科研启动基金吉林省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 植物组织培养的三大难题及解决方法被引量:5
- 2012年
- 植物组织培养是以细胞全能性为理论基础建立的一种离体培养技术,阐述了植物组织培养快繁中褐变、玻璃化、污染和移栽成活率低等问题出现的原因,提出预防和控制措施。
- 韩琳佟珊珊崔喜艳
- 关键词:植物组织培养污染玻璃化褐化
- 混合盐碱胁迫对五种类型烟草苗期叶片丙二醛含量的影响
- 2011年
- 以五种不同类型的烟草品种:白肋TN90。烤烟NC89,延晒三号,河南香料,黄花烟为材料,设置三种混和盐碱梯度,3个处理时间24h,48h,72h,分别对五类烟草进行盐碱胁迫处理。测定其苗期叶片内丙二醛(MOA)含量。结果表明:随着不同处理时间的延长和混合盐碱浓度的增加,五类烟草品种的丙二醛含量均呈现上升的趋势,在相同的胁迫处理下,各品种丙二醛含量表现为:TN90〉NC89〉延晒-三号〉香料烟〉黄花烟。
- 罗亮刘晶韩琳刘忠野么中元
- 关键词:烟草混合盐碱胁迫丙二醛
- 大豆rbcS基因启动子的遗传转化及功能分析
- 所有的高等植物中都存在Rubisoo,此酶在光合作用时的起到主要作用的,它既对CO2的固定起到催化作用,又是高等植物中的氮的主要储藏形式,是目前植物酶中研究比较深入的酶。Rubisco中的小亚基rbcS基因的SRS4启动...
- 韩琳
- 关键词:大豆GUS活性
- 文献传递
- 几种玉米叶片总RNA提取方法的比较研究被引量:4
- 2012年
- 本研究以玉米(B73)叶片为实验材料,比较了Trizol法、CTAB法和改进的SDS酚法提取后RNA的质量。琼脂糖凝胶电泳结果表明,CTAB法和Trizol法提取物中含有大量多糖,RNA质量不足以进行后续的研究工作,而通过加入适量的乙醇等实验步骤改进的SDS酚法,提取的RNA纯度高,电泳效果好。通过特异引物扩增试验发现,利用改进的SDS酚法能扩增出预期的目的基因片段,可很好的应用于基因克隆等后续分子生物学实验。
- 刘晶韩琳刘忠野崔喜艳
- 关键词:玉米RNA
- 大豆rbcS基因启动子的克隆及在转基因烟草中的功能缺失分析被引量:6
- 2015年
- 【目的】进一步验证栽培大豆rbcS基因启动子功能,为植物基因工程相关研究提供启动子资源。【方法】从栽培大豆中克隆了rbcS基因5′端上游1 538bp的DNA序列,根据光诱导表达调控元件及顺式作用功能元件所在的位置,设计含1 089,712和190bp 3个5′端缺失体,并将rbcS基因启动子(1 538bp)及3个5′端系列缺失体序列分别与gus基因融合,构建植物表达载体并命名为pGmrbcS、pA、pB和pC,用农杆菌介导法转化烟草,通过gus基因活性变化检测不同缺失体的表达特性。【结果】克隆了1 538bp的大豆rbcS基因启动子序列及1 089,712和190bp的5′端缺失体启动子片段。GUS活性检测表明,在pGmrbcS转基因烟草的叶中GUS活性最高,且与pCAMBIA1301转基因烟草叶片中CaMV35S启动子驱使gus基因的表达量相当,而茎、根中GUS活性较低。GUS定量分析表明,T1代转基因烟草光下培养时,3种缺失体启动子叶片中的GUS表达活性均与CaMV35S启动子相当,其中pB活性最高,是CaMV35S启动子活性的1.4倍,pA、pC活性低于pB,分别为pB活性的84%和71%;含pA的转基因烟草于黑暗中萌发的幼苗叶片gus基因不表达,光下萌发幼苗叶片有gus基因表达,而含有pB、pC的转基因烟草,在黑暗和光下萌发的幼苗叶片中均有gus基因表达,且表达量以pB最高。【结论】含有长度为1 089bp(pA)光诱导元件的rbcS基因缺失体启动子具有光诱导和组织特异表达特性,长度为712bp(pB)的缺失体启动子的启动活性最高。
- 崔喜艳陈众峰范贝韩琳刘晓庆董雅致张治安
- 关键词:栽培大豆转基因烟草
- 玉米淀粉分支酶SBEⅡb基因片段酵母双杂交诱饵载体的构建及检测
- 2012年
- 为探寻玉米淀粉分支酶(starch branching enzyme,SBEⅡb)与其互作蛋白的作用位点,构建了酵母双杂交诱饵载体。根据CDD和NCBI对SBEⅡb蛋白氨基酸序列的分析,确定玉米SBEⅡb的功能域及非功能域,PCR扩增功能域及非功能域基因的目的片段,经回收纯化,用相同的限制性内切酶将其与载体pGBKT7进行双酶切后,分别将目的基因片段与载体pGBKT7进行连接。构建了酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SBEⅡb-X(X=1,2,3,4,5,6),转化酵母菌AH109的菌液,OD600值在0.8以上,证明诱饵载体pGBKT7-SBEⅡb-X对酵母菌AH109没有毒性作用;转化诱饵载体后的酵母菌AH109,在SD/-Trp/X-α-Gal平板上长出白色菌落,在SD/-His/-Trp/X-α-Gal、SD/-Ade/-Trp/X-α-Gal平板上不能生长,排除了pGBKT7-SBEⅡb-X具有自激活宿主菌AH109的作用。构建的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SBEⅡb-X(X=1,2,3,4,5,6),其表达对酵母细胞无毒性及对报告基因无自激活作用,可为下一步分析SBEⅡb与其互作蛋白的作用位点奠定基础。
- 崔喜艳刘晶刘忠野韩琳
- 关键词:玉米诱饵载体酵母双杂交