王玉姣
- 作品数:5 被引量:10H指数:2
- 供职机构:宁夏医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 细粒棘球蚴重组蛋白14-3-3和Eg10免疫差异的初步研究被引量:7
- 2014年
- 表达纯化细粒棘球蚴重组蛋白14-3-3(rEg14-3-3)和Eg10(rEg10),分别免疫小鼠,8w后进行细粒棘球蚴原头蚴攻击感染.计算免疫保护力,检测脾组织中CD4+T、CD8+T细胞亚群以及T细胞增殖情况.实验结果表明,rEg14-3-3免疫组小鼠具有85.3%抵抗细粒棘球绦虫感染的能力,而rEg10免疫组小鼠与对照组小鼠相比无免疫保护力;与PBS对照组相比,只有rEg 14-3-3免疫组的CD4+T细胞亚群的分布有明显差异,且rEg 14-3-3抗原能诱导淋巴细胞显著增殖.因此rEgl4-3-3蛋白能抑制细粒棘球蚴的生长,诱导小鼠产生高水平的免疫保护力,可作为疫苗候选分子.
- 王强王娅娜王程铖王玉姣吕士玉赵巍
- 关键词:细粒棘球绦虫免疫保护力
- 重组细粒棘球蚴(中国大陆株)线粒体苹果酸脱氢酶的表达、复性及鉴定
- 2014年
- 目的通过原核表达细粒棘球蚴(中国大陆株)线粒体苹果酸脱氢酶(EgmMDH),获取高纯度的可溶性的重组细粒棘球蚴线粒体苹果酸脱氢酶(rEgmMDH)。方法从细粒棘球蚴(中国大陆株)中获得基因mdh并克隆到原核表达载体pET28a;通过IPTG诱导表达线粒体苹果酸脱氢酶(mMDH),进而采用亲和层析的方法纯化该包涵体目的蛋白并复性,获得可溶性目的蛋白rEgmMDH;利用细粒棘球蚴(中国大陆株)攻击感染家兔后获得血清;分别采用抗原头蚴兔血清和抗His-Tag鼠单克隆抗体对可溶性rEgmMDH进行Western blot鉴定。结果①成功构建原核表达载体pET28a-mMDH/BL21;②通过亲和层析及复性,获得高纯度可溶性目的蛋白rEgmMDH;③Western blot结果表明,抗原头蚴兔血清和抗His-Tag鼠单克隆抗体可分别特异性鉴定该复性可溶性rEgmMDH。结论通过本研究获得高纯度可溶性rEgmMDH,为进一步研究其在细粒棘球蚴感染宿主过程中的作用奠定基础。
- 王玉姣王浩赵嘉庆何鑫王程铖王强赵巍
- 关键词:细粒棘球蚴蛋白纯化WESTERN
- NRF-1基因真核慢病毒表达载体的构建及表达被引量:3
- 2014年
- 目的:构建核呼吸因子-1(NRF-1)基因慢病毒表达载体并包装成重组慢病毒颗粒,感染大鼠心肌细胞H9c2(2-1)后,筛选出稳定上调表达NRF-1的大鼠心肌细胞H9c2(2-1)。方法:利用lipofectAMINE 2000试剂将pLenti6.3-NRF1-IRES2-EGFP质粒与两种包装质粒在293T细胞中包装成重组慢病毒,收集病毒并测定滴度。用重组慢病毒感染大鼠心肌细胞H9c2(2-1),然后用杀稻瘟素(blasticidin)筛选转染阳性细胞。用PCR法鉴定靶细胞基因组中NRF-1基因序列,用QPCR测定转染阳性靶细胞中NRF-1基因表达量。结果:收集的重组慢病毒滴度为5.5×107TU/ml。转染阳性靶细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光。PCR结果显示,慢病毒携带NRF-1基因序列已插入靶细胞基因组。QPCR结果显示,转染阳性靶细胞中NRF-1基因的表达量是对照组的2.25倍。结论:本研究成功地构建NRF-1基因重组慢病毒表达载体,并在大鼠心肌细胞H9c2(2-1)中表达,为进一步上调NRF-1基因表达后心肌细胞能量代谢的研究提供了实验支持,并为心力衰竭能量代谢的基因治疗奠定了基础。
- 宋熔王程铖王强王玉姣李君良赵巍
- 关键词:慢病毒表达载体心力衰竭
- 细粒棘球蚴重组抗原14-3-3和苹果酸脱氢酶诱导宿主DC-CD4~+T细胞免疫应答机制的研究
- 目的:
通过比较不同免疫保护力的细粒棘球蚴重组抗原14-3-3(rEg14-3-3)和线粒体苹果酸脱氢酶(rEgmMDH)对宿主树突状细胞(dendriticcell,DC)的成熟、DC细胞递呈并促进CD4+T细胞...
- 王玉姣
- 关键词:细粒棘球蚴DC免疫应答
- 文献传递
- 类风湿性关节炎相关间质性肺疾病患者血清KL-6表达水平检测及临床特征分析
- 目的: 探讨类风湿性关节炎相关间质性肺疾病的临床特征及与血清KL-6表达水平的相关关系,提高类风湿性关节炎相关间质性肺疾病的早期诊断。 方法: 纳入宁夏医科大学总医院呼吸与危重症医学科及风湿免疫科2015年9月-2...
- 王玉姣
- 关键词:类风湿性关节炎间质性肺疾病血清KL-6
- 文献传递