聂宇
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：NSFC-广东联合基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 免药物筛选快速获得小鼠Rosa26基因定点整合外源基因的方法
- 本发明提供了一种免药物筛选快速获得小鼠Rosa26基因定点整合外源基因的方法，其包括以下步骤：1)选择小鼠Rosa26基因打靶位点；2)设计靶向Rosa26的gRNA；3)构建CRISPR/Cas9表达质粒pX458‑R...
- 何祖勇陈瑶生黄翔刘蔚聂宇丛佩清莫德林刘小红
- 一种制备CD44基因缺陷小鼠诱导多能干细胞的方法
- 本发明具体公开了一种高效制备CD44基因缺陷小鼠诱导多能干细胞（IPSC）的方法。本发明首先利用TSA对小鼠成纤维细胞（MEF）进行预处理，然后再对MEF进行诱导重编程，IPSC的效率可以随着TSA的浓度升高而被提高。在...
- 宋振威冀倩倩赵海静聂宇丛佩清陈瑶生
- 文献传递
- 供体同源臂长度对ZFN介导的同源重组效率的影响被引量：6
- 2016年
- 应用锌指核酸酶(Zinc Finger Nuclease,ZFN)和序列同源的供体(Donor)作为模板,借助DNA的同源重组修复机制能够对动物基因组实现精确的遗传修饰。目前关于供体长度与ZFN介导的同源重组修复效率相关性的报道相对较少。本研究构建了一对靶向EGFP的ZFN并鉴定了活性,同时设计了一系列不同长度的供体,应用流式细胞分析术,在稳定整合了带有移码突变的EGFP基因的CHO细胞中系统分析了供体长度对ZFN介导的同源重组修复效率的影响。结果发现当同源臂单臂仅有50 bp时,即可有效支持ZFN介导的同源同组,随着同源臂长度的延伸,同源重组的效率有所提高,但要实现高效率的同源重组(较传统方法提高104倍),同源臂单臂长度需要延长至1 000 bp以上。这为今后如何设计合适的Donor,以提高ZFN等基因组编辑工具介导的同源重组效率提供了借鉴。
- 聂宇乔艳乐陈瑶生何祖勇
- 关键词：锌指核酸酶DNA双链断裂同源重组供体
- 免药物筛选快速获得小鼠Rosa26基因定点整合外源基因的方法
- 本发明提供了一种免药物筛选快速获得小鼠Rosa26基因定点整合外源基因的方法，其包括以下步骤：1)选择小鼠Rosa26基因打靶位点；2)设计靶向Rosa26的gRNA；3)构建CRISPR/Cas9表达质粒pX458‑R...
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- 一种高效制备CD44基因缺陷小鼠诱导多能干细胞的方法
- 本发明具体公开了一种高效制备CD44基因缺陷小鼠诱导多能干细胞（IPSC）的方法。本发明首先利用TSA对小鼠成纤维细胞（MEF）进行预处理，然后再对MEF进行诱导重编程，IPSC的效率可以随着TSA的浓度升高而被提高。在...
- 宋振威冀倩倩赵海静聂宇丛佩清陈瑶生
