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安明
作品数:
4
被引量:8
H指数:1
供职机构:
清华大学
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发文基金:
北京市科技新星计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
罗晖
清华大学
宋文斯
清华大学化学工程系生物化工研究...
沈忠耀
清华大学化学工程系生物化工研究...
于慧敏
清华大学化学工程系生物化工研究...
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环中
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基因
1篇
基因合成
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7-氨基头孢...
机构
4篇
清华大学
1篇
北京科技大学
作者
4篇
安明
3篇
于慧敏
3篇
沈忠耀
3篇
宋文斯
3篇
罗晖
传媒
1篇
清华大学学报...
年份
1篇
2010
2篇
2008
1篇
1987
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4
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储存环中束流不稳定性问题
安明
关键词:
束流
储存环
一种头孢菌素C酰化酶及其载体和应用
本发明公开了一种CPC酰化酶,该酶的编码基因为SEQ ID NO:4所示的DNA序列以及与它具有80%以上同源性的DNA序列。本发明还公开了含有编码CPC酰化酶的载体和转化体以及该酶的用途。该酶表达活性高、催化活性高、并...
于慧敏
宋文斯
安明
罗晖
沈忠耀
文献传递
CPC酰化酶基因的人工合成与重组表达
被引量:8
2008年
7-氨基头孢烷酸(7-ACA)是头孢菌素类抗生素的中间体,在医药工业中具有重要的应用价值。该文通过人工设计、合成并在重组大肠杆菌中表达头孢菌素C(CPC)酰化酶基因来实现7-ACA的一步酶法催化合成。以Pseudomonassp.SE83菌株的CPC酰化酶蛋白质序列为模板,对CPC酰化酶基因分两段进行了全局优化设计,包括密码子替换、鸟嘌呤和胞嘧啶含量调整以及酶切位点修改等。通过装配聚合酶链式反应方法最终获得了目标基因,并克隆至表达载体pET-28a,成功构建了诱导型重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET28-acy。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导,在Luria-Bertani培养基中,新建重组大肠杆菌所表达的可溶CPC酰化酶占菌体总蛋白的75%以上;经优化培养基摇瓶发酵,重组菌的CPC酰化酶酶活高达2956U/L。采用上述方法获得的CPC酰化酶,在一步酶法合成7-ACA的工业化生产中具有广阔的应用前景。
安明
于慧敏
罗晖
宋文斯
沈忠耀
关键词:
7-氨基头孢烷酸
重组大肠杆菌
基因合成
一种头孢菌素C酰化酶及其载体和应用
本发明公开了一种CPC酰化酶,该酶的编码基因为SEQ ID NO:4所示的DNA序列以及与它具有80%以上同源性的DNA序列。本发明还公开了含有编码CPC酰化酶的载体和转化体以及该酶的用途。该酶表达活性高、催化活性高、并...
于慧敏
宋文斯
安明
罗晖
沈忠耀
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