常振战
- 作品数:17 被引量:135H指数:8
- 供职机构:北京大学基础医学院生物物理学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- 稀土元素对植物的激素样作用被引量:25
- 1997年
- 目的:探讨稀土元素在植物细胞工程中的应用及其作用机制。方法:以药用植物大黄的愈伤组织为研究对象,研究不同浓度的稀土元素EU3+对愈伤组织生长的影响。结果:低浓度稀土元素EU3+促进愈伤组织生长,高浓度则抑制生长;稀土元素EU3+对大黄愈伤组织的促进作用可被钙调蛋白的拮抗剂抑制。结论:稀土元素有类似植物激素的作用,其作用机制可能与钙调蛋白有关。
- 鲁宽科常振战陈宝卫果德安郑俊华王夔
- 关键词:植物愈伤组织诱导稀土元素
- 青蒿素生物合成关键酶CYP71AV1的表达纯化和晶体培养
- 2018年
- 疟疾是一种严重危害人类健康的世界性流行疾病,在青蒿素广泛应用之前,全世界每年约4亿人次感染疟疾,至少有100万人的死亡病例。因此疟疾被世界卫生组织列为世界三大死亡疾病之一。青蒿素的发现,开创了疟疾治疗新方法,全球数亿人因这种"中国神药"而受益。紫穗槐-4,11-二烯氧化酶是一种植物细胞色素P450蛋白(CYP71AV1),参与催化紫穗槐-4,11-二烯生成青蒿酸的三步氧化反应,是青蒿素生物合成途径上的关键酶。作者拟通过p CW Ori(+)-CYP71AV1重组质粒在原核表达系统中的可溶性表达及蛋白纯化,采用一氧化碳差式光谱分析和基于血红素辅基的生物活性测定,验证CYP71AV1蛋白的活性,培养该蛋白的晶体。结果表明,构建的重组基因p CW Ori(+)-CYP71AV1在大肠杆菌中得以功能性表达,经过亲和层析和凝胶过滤层析纯化得到了毫克级、有活性的目的蛋白,筛选出了重组CYP71AV1蛋白的晶体生长条件。这些研究为解析青蒿素生物合成关键酶CYP71AV1的晶体结构,以及通过合成生物学方法批量生产青蒿素奠定了基础,同时为其他植物来源的P450蛋白的表达纯化与结晶提供参考。
- 史超邓洁常振战
- 关键词:青蒿素生物合成
- 用生物反应器培养决明发根合成游离蒽醌化合物被引量:15
- 2000年
- 目的 :探索批量培养植物发根以生产次生代谢物的方法。方法 :用容量 5L的生物反应器培养决明发根 ,连续观测液体培养基 pH值变化 ,用分光光度计连续测定培养基中游离蒽醌类化合物的含量。 结果 :在 36d培养期内收获决明发根 76 1g ,发根鲜重增殖了 42倍。结论 :培养基 pH值的高低变化在一定程度上反映了生物反应器中游离蒽醌类化合物的合成情况。
- 常振战果德安郑俊华金明善谢梅英沈昕王沙生
- 关键词:生物反应器决明发根
- 毛蚶抗癌蛋白对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用被引量:4
- 2015年
- 目的:从毛蚶软体部位中分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,研究其对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用。方法:以新鲜毛蚶软体部分为原材料,分离获得毛蚶抗癌蛋白组分(命名为NS);倒置相差显微镜观察不同浓度(50、100、200、400μg/mL)NS组分对MCF-7癌细胞生长的影响,将200μg/mL NS组分作用MCF-7细胞不同时间(12、24、48 h)后,Giemsa染色观察癌细胞及核形态的变化,流式细胞术检测NS组分对MCF-7细胞周期及细胞凋亡的影响,Western blot检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,各浓度NS组分对人乳腺癌MCF-7细胞生长均具有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01);倒置相差显微镜下可见200μg/mL NS组分作用MCF-7细胞12 h后,部分细胞收缩变圆、脱落,24、48 h后细胞脱落现象更加明显;Giemsa染色发现,NS组分处理12 h后细胞出现有丝分裂相增加,继而出现多核或核碎裂等现象;流式细胞术检测发现NS组分主要引起细胞G2-M期阻滞;NS处理组凋亡率均较对照组明显升高(P均<0.01),且随着药物作用时间的延长,细胞凋亡比例逐渐增加。Western blot检测发现NS组分作用MCF-7细胞后p53及procaspase-3蛋白表达量均上调。结论:毛蚶抗癌蛋白NS组分体外对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒作用主要通过引起细胞发生G2-M期阻滞、诱导细胞凋亡实现的,期间伴随p53及procaspase-3蛋白表达上调。
- 付莹赵晨常振战林华英孙震晓
- 关键词:毛蚶乳腺癌MCF-7细胞细胞凋亡
- 决明Ri质粒转化根离体培养研究被引量:5
- 1999年
- 目的:用Ri质粒转化决明,检测转化根培养物中蒽醌化合物的产物。方法:用叶盘转化决明外植体诱导Ri质粒转化根并用Southern霜交加以鉴定,测定转化根的生长周期,用高效液相色谱法测定光培养及暗培养转化根中游离蒽醌化合物的质量分数。
- 常振战沈昕果德安王沙生金明善谢梅英郑俊华
- 关键词:决明发育RI质粒蒽醌类
- 天山大黄发根培养物中蒽醌化合物的产生被引量:17
- 1998年
- 目的:探索用发根培养法生产植物次生代谢物的途径。方法:用发根农杆菌Agrobacteriumrhizogenes9402所含Ri质粒遗传转化药用植物天山大黄以诱导发根用纸电泳法检测发根中冠瘿碱的存在;用高效液相色谱法测定发根中芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚8甲醚等游离蒽醌化合物的含量。结果:诱导出了天山大黄发根,并建立了发根离体培养系;从发根中检测到甘露碱、农杆碱的存在;定量分析发现,天山大黄发根中含有多种蒽醌类成分,其中大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚8甲醚的含量分别高于原植物根中的含量。
- 常振战沈昕果德安鲁宽科王沙生郑俊华
- 关键词:蒽醌类
- 银胶菊丙二烯氧化物合成酶的表达纯化及其活性分析被引量:1
- 2012年
- 植物来源细胞色素P450的表达和结晶都十分困难,成为成功解析该类蛋白晶体结构的瓶颈。探索了使用大肠杆菌表达系统表达、纯化银胶菊丙二烯氧化物合成酶(allene oxide synthase,AOS)的方法。氨基酸序列比对分析显示,银胶菊AOS缺失N-末端的膜锚定序列和信号肽序列,推测其在大肠杆菌中应表达为水溶性蛋白质。试验中纯化得到的银胶菊AOS是一个分子量为54.5 kD的八聚体分子,均一性好,不含去垢剂,达到毫克量级,适合下一步的晶体培养研究;还原一氧化碳差示光谱显示该酶在450 nm处有特征吸收峰,酶活性测定得到该酶的米氏常数为45.3μmol/L,显示该重组AOS具有很高的酶活性。
- 刘云华周秋虎张灵芝常振战
- 关键词:细胞色素P450表达纯化酶活性分析
- 掌叶大黄发根及愈伤组织、悬浮细胞中蒽醌类成分的比较研究被引量:12
- 1998年
- 目的:比较Ri质粒转化的掌叶大黄发根与愈伤组织、悬浮细胞以及掌叶大黄生药中游离蒽醌成分的含量。方法:用发根农杆菌Agrobacteriumrhizogenes9402野生型菌株感染掌叶大黄外植体以诱导发根,建立发根离体培养系,用Southernblot鉴定发根;分别诱导掌叶大黄愈伤组织和悬浮细胞;用高效液相色谱法测定发根、愈伤组织、悬浮培养细胞以及掌叶大黄生药中芦荟大黄素等游离蒽醌化合物的质量含量。结果:从子叶柄上诱导出了发根,并建立了培养体系;Southern杂交结果证明Ri质粒TDNA转移并整合到植物细胞基因组中;用叶片作外植体诱导出了愈伤组织;悬浮培养细胞用叶片、叶柄外植体诱导的愈伤经液体培养获得;掌叶大黄发根中各种游离蒽醌化合物含量普遍高于愈伤组织,但低于生药和悬浮培养细胞。结论:用掌叶大黄发根培养物生产蒽醌化合物是一条值得探索的新途径。
- 常振战沈昕果德安柳林王沙生郑俊华
- 关键词:发根愈伤组织蒽醌类
- 沿人体经络穴位排汗现象的发现
- 2024年
- 经络学说是中医核心理论之一,许多中医文献载有经络与穴位的内容,针灸铜人等教具亦标有穴位,常见的针灸经穴图通常标有十四经穴位。但是经络与穴位究竟是如何发现的至今仍是一个谜,经络与穴位的真实性也一度受到质疑。道家认为练功者能够通过返观内视觉察到经络穴位的存在,这些主观觉察结果尚需客观证据的证明及科学方法的验证。笔者发现在练拳、针刺、喝黄酒等刺激之后,人体会有十四经穴位排汗现象,该现象在冬至等节气前后更明显。这些发现不仅有助于揭示经络穴位发现之谜、证实经络穴位的客观存在,也为深入探索经络本质提供新途径。
- 常振战赵钟玉严靓黄力新
- 关键词:经络学说十四经脉
- Ri质粒转化植物生产天然活性成分的研究进展(Ⅱ)被引量:22
- 1998年
- 综述了影响发根生长和次生代谢产物合成的因素,用生物反应器培养植物发根的方法,提高发根次生代谢物含量的措施,以及发根培养物的次生代谢产物。
- 常振战果德安郑俊华
- 关键词:RI质粒发根次生代谢物植物