游猛
- 作品数：11 被引量：33H指数：4
- 供职机构：扬州大学兽医学院江苏省人兽共患病学重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 展呈H5N1亚型禽流感病毒M2e表位鞭毛蛋白的构建及其免疫原性
- 以重组质粒pET-fliC和pUC57-M2e2为模板,通过重叠PCR将M2e2基因插入fliC的高变区域,构建嵌合鞭毛基因片段fliC/M2e2。将fliC/M2e2片段插入原核表达载体pET30a+,获得重组质粒pE...
- 游猛潘志明方强耿士忠康喜龙杨芸焦新安
- 关键词：鞭毛蛋白禽流感病毒免疫原性
- 文献传递
- 稳定携带新城疫病毒DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及其免疫原性
- 采用PCR技术从重组质粒pVAX1-F中扩增出新城疫病毒JS5株的融合蛋白(F)基因,将其克隆入真核表达质粒pmcDNA3.1+中,获得重组表达质粒pmcDNA3.1-F。通过电穿孔转化法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌...
- 潘志明程宁宁游猛崔一晨黄金林焦新安刘秀梵
- 关键词：新城疫DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌质粒稳定性免疫效力
- 文献传递
- 展呈H5N1亚型禽流感病毒M2e表位鞭毛蛋白的构建及其免疫原性
- 以重组质粒pET-fliC和PUC57-M2e2为模板，通过重叠PCR将M2e2基因插入fliC的高变区域，构建嵌合鞭毛基因片段fliC/M2e2。将fliC/M2e2片段插入原核表达载体pET30a+，获得重组质粒pE...
- 潘志明游猛方强康喜龙杨芸焦新安
- 关键词：禽流感病毒鞭毛蛋白免疫应答
- 展呈H5N1亚型禽流感病毒M2e表位鞭毛蛋白的构建及其免疫原性
- 游猛潘志明方强耿士忠康喜龙杨芸焦新安
- 新城疫病毒F基因在大肠杆菌中的高效表达及其免疫原性分析被引量：4
- 2009年
- 应用PCR技术,以含有新城疫病毒F48E8株全长融合蛋白(F)基因的真核表达质粒pVAX1-F为模板,扩增出594bp大小的F基因的部分片段。经克隆筛选和测序后,构建成重组原核表达质粒pGEX-6P-1-F。重组质粒转化表达菌BL21,获得重组菌BL21(pGEX-6P-1-F)。经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表明,F基因在原核表达体系中获得高效表达,表达量占菌体总蛋白的23%。Western blotting结果显示,在相对分子质量46ku位置有特异性条带。动物实验结果表明,F蛋白免疫鸡产生的针对新城疫病毒F蛋白的血清抗体效价显著高于空白对照组(P<0.05),说明原核表达系统表达的F蛋白具有良好的免疫原性。
- 游猛潘志明耿士忠文科陈俊华张磊方强蔡雯婷焦新安
- 关键词：新城疫病毒融合蛋白原核表达免疫原性
- 甲型H1N1流感病毒HA基因的原核表达及免疫反应性分析被引量：6
- 2010年
- 目的构建甲型H1N1流感病毒HA基因的原核表达质粒,获得融合表达蛋白,并对表达蛋白的免疫反应性进行分析。方法人工合成A/California/05/2009 H1N1流感病毒的HA基因,以合成基因为模板,通过PCR方法扩增出去除信号肽的HA部分基因片段,然后将去除信号肽的HA基因克隆至pET30a(+)原核表达载体中,构建出原核表达质粒,再将重组质粒转化E.coliBL21(DE3)表达菌株;重组菌经IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳分析,Western blot分析表达产物的免疫反应性。结果获得了HA基因的原核表达重组菌,细菌经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见约67.4 ku大小的目的蛋白表达条带,Western blot结果显示,表达产物与人甲型H1N1流感患者阳性血清具有反应性。结论成功表达出甲型H1N1流感病毒的HA蛋白,该蛋白具有良好的免疫反应性,为甲型H1N1流感的快速诊断方法的建立提供了生物材料。
- 马全刚潘志明游猛黄金林耿士忠李晓波顾健焦新安
- 关键词：甲型H1N1流感病毒血凝素原核表达免疫反应性
- 稳定携带新城疫病毒DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及其免疫原性被引量：13
- 2008年
- 采用PCR技术从重组质粒pVAX1-F中扩增出新城疫病毒JS5株的融合蛋白(F)基因,将其克隆入真核表达质粒pmcDNA3.1+中,获得重组表达质粒pmcDNA3.1-F。通过电穿孔转化法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pmcDNA3.1-F)。体内、体外试验结果表明,重组质粒pmcDNA3.1-F在沙门氏菌中的稳定性显著高于pcDNA3.1-F。将重组菌SL7207(pmcDNA3.1-F)和SL7207(pcDNA3.1-F)分别以1×109CFU剂量两次口服免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可产生针对新城疫病毒F蛋白的血清抗体和黏膜抗体。重组菌以5×109CFU剂量两次口服免疫4日龄SPF鸡,免疫鸡产生的针对新城疫病毒F蛋白的血清抗体和小肠黏膜抗体效价水平与空载体组之间存在显著性差异(P<0.05)。免疫保护试验结果显示,SL7207(pmcDNA3.1-F)和SL7207(pcDNA3.1-F)免疫组的免疫保护率均与空载体组之间存在显著性差异(P<0.05),且SL7207(pmcDNA3.1-F)免疫组的保护率较SL7207(pcDNA3.1-F)免疫组提高了20.0%,说明稳定携带新城疫病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌具有良好的免疫原性和免疫保护性。
- 潘志明黄金林程宁宁崔一晨游猛唐丽华张晓明焦新安刘秀梵
- 关键词：新城疫DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌质粒稳定性免疫效力
- 沙门菌鞭毛蛋白增强新城疫病毒融合蛋白在小鼠中的免疫原性被引量：4
- 2009年
- 目的:分析沙门菌鞭毛蛋白对新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F蛋白)免疫原性的增强作用。方法:提取鼠伤寒沙门菌SL7207株鞭毛蛋白,将鞭毛蛋白与F蛋白以皮下注射的方式联合免疫C3H/HeJ小鼠,间隔2周免疫,共免疫3次。分别在第2次免疫后2周和第3次免疫后2周采集血清,应用ELISA法测定小鼠血清抗体;在第3次免疫后2周取免疫小鼠脾脏细胞,检测IFN-γ和IL-4特异性分泌细胞。结果:鞭毛蛋白与F蛋白联合免疫能诱导产生特异性的免疫应答,血清抗体水平显著高于F蛋白单独免疫组;在脾脏细胞中,检测到较高水平的IFN-γ和IL-4分泌细胞,免疫应答以Th1型为主。结论:鞭毛蛋白与F蛋白的联合免疫,可显著增强F蛋白的免疫原性,显示出鞭毛蛋白良好的免疫佐剂效应。
- 潘志明文科游猛耿士忠方强焦新安
- 关键词：鞭毛蛋白融合蛋白免疫原性
- 鞭毛蛋白与NDV F蛋白的融合表达及其产物对小鼠的免疫原性分析
- ＜正＞1引言/目的新城疫（Newcastle disease,ND）是危害养禽业的主要传染病之一,被国际兽疫局（OIE）确定为法定通报疾病,免疫预防是控制该病的重要手段。新城疫病毒（Newcastle disease v...
- 游猛潘志明耿士忠方强焦新安
- 文献传递
- 鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白与新城疫病毒F蛋白的融合表达及免疫原性分析被引量：8
- 2010年
- 应用PCR技术分别扩增鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白fliC基因以及含有新城疫病毒F蛋白部分表位的基因片段,通过柔性肽(Gly4Ser)2编码序列将二者串联并克隆到质粒pET30a+上,获得重组原核表达质粒pET-fliC-F,将其转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。Western blot证实重组菌表达的fliC-F融合蛋白能与小鼠抗fliC和抗F蛋白两种多抗血清发生特异性反应。动物试验显示,fliC-F融合蛋白能够刺激C3H/HeJ小鼠产生针对F蛋白的特异性血清抗体,说明原核表达系统表达的fliC-F融合蛋白具有较好的免疫原性。
- 游猛潘志明耿士忠马全刚方强焦新安
- 关键词：鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白新城疫病毒融合蛋白免疫原性
