冯霞 作品数:112 被引量:466 H指数:11 供职机构: 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 国家科技重大专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 经济管理 更多>>
北京市人类免疫缺陷病毒-1 B亚型分子的流行特征 被引量:2 2013年 目的分析北京市HIV-1B亚型的分子流行特征。方法采集北京市2006年至2010年新发现的HIV—1B亚型感染者抗凝血,反转录套式PCR扩增病毒gag基因,并进行系统进化和Entropy核苷酸多态性差异分析。结果成功扩增167份标本,其中欧美B亚型10份,B’亚型14份,中国B亚型101份。B’亚型进化簇内存存多条来自泰国和印度的序列,中国B亚型独立成簇,进化簇内无其他围家的序列。中国B亚型存在4个业簇,71.1%的病例为男男性传播。以欧美B进化簇为参照,B’亚型和中国B亚型进化簇分别存在55和94个有明显差异的核苷酸位点。结论北京市存在3种类型的HIV-1B亚型,其中1种为本土株。 叶景荣 苏雪丽 郝明强 辛若雷 卢红艳 白立石 余双庆 冯霞 闫红 贺雄 曾毅关键词:HIV-1 逆转录聚合酶链反应 检测痘苗病毒体外感染的病灶形成方法的优化与应用 2024年 本研究旨在建立一种快速、通用、高通量的病灶形成测定法(Focus-forming assay, FFA),用于痘苗病毒(Vaccinia virus, VACV)的研究。首先采用经典噬斑染色法与免疫噬斑法对不同VACV代表性毒株(Western Reserve strain, WR;Tiantan strain, VTT;Modified Ankara strain, MVA)在BHK-21细胞和Vero细胞上的噬斑特性进行评估,通过实验条件(包括显色液、非特异性染色、细胞培养板和病毒培养时间)的优化,提高病灶的可视化质量和测定的准确性。并基于改进优化的FFA法研究了VACV在BHK-21细胞和Vero细胞上的生长曲线,同时对FFA法的重复性进行了评估。研究发现BHK-21细胞对VACV的感染更加敏感,适宜于多种VACV滴度测定。实验条件的优化显著提高了病灶的可视化质量和测定的准确性。应用FFA法发现WR、VTT和MVA毒株在BHK-21细胞上能够有效复制,而MVA在Vero细胞上的复制受限,且FFA法在同一实验内具有良好的重复性,变异系数在0.17%到3.50%之间。改进后的FFA法是一种快速、通用、高通量的方法,适用于痘苗病毒滴度的测定,为痘苗病毒的研究和应用提供了可靠的技术支持。 楚巧鸿 冯霞 李佳 张菱芳 单徐畅 舒畅 程雪婷 霍恕婷 邓瑶 谭文杰关键词:痘苗病毒 滴度测定 表达gH/gL抗原的腺病毒载体EBV疫苗免疫BALB/c小鼠后的T细胞表位鉴定 2024年 为了鉴定表达爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus,EBV)gH/gL保护性抗原的腺病毒载体疫苗在BALB/c小鼠中的T细胞表位,本研究使用表达gH/gL蛋白的腺病毒载体EBV疫苗免疫BALB/c小鼠,利用IEDB Analysis Resource软件对序列进行亲和力预测,设计合成EBV gH基因和gL基因的肽库,并将其混合成肽池,取免疫后的小鼠脾细胞进行IFN-γ ELISPOT检测,通过肽池和单肽两轮筛选检测具有阳性反应的多肽片段,确定优势反应肽。结果显示筛选出gH基因5条特异性优势肽,其中序列为LRGPFSYPSLTSAQS的单肽反应最强;gL基因4条特异性优势肽,其中序列为ASLNSPKNGSNQLVI的单肽反应最强。本研究使用IFN-γ ELISPOT法筛选和确定了9条EBV gH抗原特异性和gL抗原特异性优势T细胞表位,为EBV免疫学与疫苗研究提供了参考。 石雪洋 郝彦哲 李晨雨 马琦 王冰丹 冯霞 李淑英关键词:T细胞表位 表达HIV-1CRF01_AE gp145的rMV MVA疫苗构建及免疫原性评价 被引量:1 2015年 目的 构建携带密码子优化型HIV-1 CRF01_AE gp145基因的重组改良型痘苗病毒安卡拉株(MVA)载体疫苗,并对其免疫效果进行初步评价.方法 利用前期研究获得并改造的HIV-1CRF01_AE env共享基因,去除其胞内区序列得到gp145基因,将此基因克隆至重组MVA载体系统的穿梭质粒pSC11上,以穿梭质粒转染提前感染了野生型MVA病毒的BHK-21细胞,通过同源重组获得携带gp145基因的重组MVA疫苗,即rMVA-AEgp145.经鉴定证实重组MVA疫苗可表达Gp145蛋白后,在BALB/c小鼠中进行rMVA-AEgp145疫苗单独免疫的效果评价.结果 重组MVA疫苗可有效表达Gp145蛋白,单独免疫BALB/c小鼠能诱导较高水平的细胞免疫反应.结论 成功构建了表达HIV-1 CRF 01_AEgp145基因的重组MVA疫苗,在小鼠体内单独免疫可以诱导较强的env特异性CTL应答。 湛倩倩 陈丹瑛 叶景荣 余双庆 徐柯 曾毅 冯霞关键词:艾滋病疫苗 表达SIV Gag/Env基因的DNA疫苗、重组腺病毒和重组痘苗病毒三载体疫苗联合免疫小鼠的细胞免疫研究 被引量:2 2016年 获得性免疫缺陷综合征即艾滋病是人类面临的严重公共卫生威胁,目前常用的药物疗法仍存在一定的缺陷,尚不能彻底治愈AIDS并阻断HIV的传播。将治疗型疫苗用于HIV感染的治疗具有一定的发展潜力,但缺乏适宜的HIV感染动物模型阻碍了治疗型HIV疫苗的研制。SIV能够感染非人灵长动物并引起类似AIDS的猴免疫缺陷病,因而常被用作研究HIV及其疫苗的替代动物模型。为了对SIV疫苗在猴感染模型中治疗SIV感染的效果进行评价,我们分别构建了表达SIV gag和env基因的DNA疫苗、重组腺病毒和重组痘苗病毒疫苗,并联合使用这三种疫苗免疫小鼠,对包括不同抗原组合、不同免疫次序及间隔的免疫策略进行探索和优化。IFN-γ酶联免疫斑点和小鼠体内杀伤试验的结果显示,通过三载体疫苗联合免疫,能够在小鼠体内诱导出强度较高、持续时间较长的SIV Gag/Env特异性细胞免疫反应。并且,重复免疫后仍可以诱导较高水平的免疫反应。该结果为在SIV感染猴模型中评价多载体疫苗序贯和重复免疫治疗SIV感染的研究奠定了基础,也为治疗型HIV疫苗的研究提供了参考。 何小周 陈丹瑛 王琬玓 徐柯 曾毅 冯霞关键词:SIV DNA疫苗 重组腺病毒 重组痘苗病毒 rAd5和rAAV2/1载体疫苗诱导载体特异性和外源基因特异性免疫反应的研究 被引量:1 2011年 目的 在小鼠体内比较携带相同外源基因的rAd5和rAAV2/1载体疫苗诱导的载体特异性和外源基因特异性免疫应答的差异.方法 分别用携带HIV-1 gag基因的rAd5和rAAV2/1疫苗免疫BALB/c小鼠,在免疫后不同时间点用Elispot方法和ELISA方法检测小鼠体内的rAd5或rAAV2/1载体特异性及HIV-1 gag特异性细胞免疫反应和抗体反应.结果 rAd5-gag能够诱导较强的gag特异性细胞免疫反应,显著高于针对Ad5载体的细胞免疫反应;而rAAV2/1 -gag诱导的gag特异性及AAV2/1载体特异性细胞免疫反应水平都较低.rAd5-gag诱导的P24特异性和Ad5特异性IgG抗体水平都较高,并且二者相当;与rAd5-gag相比rAAV2/1 -gag可诱导更高水平的P24 IgG抗体,而且rAAV2/1 -gag诱导的P24 igG高于AAV2/1载体特异性IgG水平.结论 rAd5载体可诱导强的外源基因特异性细胞免疫和抗体反应,针对载体的细胞免疫反应较弱而抗体反应较强;rAAV2/1载体可诱导强的外源基因特异性抗体反应,明显高于针对载体的抗体反应,外源基因特异性和载体特异性细胞免疫反应水平都很低. 杨柳 李芸 杨玲 张凌斐 冯霞 余双庆 陈丹瑛 李泽琳 曾毅关键词:腺病毒科 免疫 抗体生成 抗双链DNA抗体阳性肝功能异常患者临床及生化特征 2007年 抗双链DNA抗体(antibodies to double stranded DNA,anti—dsDNA)是系统性红斑狼疮的标志性抗体。但随着自身抗体检测的普及和检测水平的不断提高,在其他自身免疫性疾病中也可检出anti—dsDNA,为探讨anti-dsDNA在肝功异常患者中检出情况及这部分患者的临床及生化特征,我们收集2005年7月-2006年7月间884例肝功异常患者的血清进行anti-dsDNA检测,现将结果报道如下。 赵艳 闫惠平 谭玉芬 刘妍 马冬梅 冯霞 李伟华关键词:抗双链DNA抗体 生化特征 抗体阳性 肝功能异常 自身抗体检测 协同办公系统在疾控应急状态下的公文处理实践 2015年 协同办公系统是一个将现代办公思想和计算机、网络、通讯等现代化工具集成在一起的办公应用产品。在应用中能规范工作流程,快速有效地处理单位内部的办公业务,使办公室事务工作自动化、网络化、无纸化,达到协同工作的目的[1]。近年来,随着办公自动化的不断发展,越来越多的机关、企事业单位开始使用协同办公系统。 李廓 冯霞 张盛 苏晓婷关键词:协同办公系统 应急 公文处理 酶联免疫斑点法检测乙型肝炎病毒感染者抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞 被引量:4 2009年 目的通过观察乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞毒性T细胞(CTL)抗原表位肽刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生γ干扰素(IFN-γ)的能力,分析不同类型HBV感染人群特异性CTL免疫应答差异。方法合成4条人类白细胞抗原(HLA)-A2限制性HBV特异性CTL抗原表位肽[分别为多聚酶P的575-583序列FLLSLGIHL(Tp),HBsAg28-39序列IPQSLDSWWTSL(Te1),HBsAg183—191序列FLLTRILTI(Te2)和HBcAg18-27序列FLPSDFFPSV(Tc)]。流式细胞术鉴定HLA基因表型。用合成的CTL表位肽分别刺激慢性乙型肝炎组(CHB)、慢性乙型重型肝炎组(CSH),既往HBV感染者(N1)组和健康献血员(N2)的PBMC,采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测分泌IFN-γ的CTL细胞的频率。结果(1)HLA—A2基因分布频率:44例CHB组为45.5%(20/44),18例CSH组为55.6%(10/18),10例N1组为60%(6/10),10例N2组全部选择以往研究已确定的HLA—A2阳性者。(2)ELISPOT检测结果:①4条HBV特异性抗原多肽反应阳性率在CHB组、CSH组、N1组和N2组分别为50%(10/20)、10%(1/10)、83.3%(5/6)和10%(1/10)。N1组反应阳性率高于CSH组(χ^2=9.000,P=0.008)和N2组(χ^2=9.000,P=0.008)。②各组对Tp、Te1、Te2和Tc四条肽的平均反应强度用斑点形成细胞(SFC)/10^6PBMC表示,采用非参数秩和检验,N1组对Tp、Te1、Te2和Tc肽的平均反应强度大于CSH组和N2组(分别为77SFC/10^6PBMCvs10SFC/10^6PBMCvs15SFC/10^6PBMC,59SFC/10^6PBMCvs0SFC/10^6PBMCvs0SFC/10^6PBMC,100SFC/10^6PBMCvs0SFC/10^6PBMCvs22SFC/10^6PBMC和57SFC/10^6PBMCvs20SFC/10^6PBMCvs30SFC/10^6PBMC,均P〈0.01)。结论各种类型HBV感染者不论病毒清除与否,都可对HBV特异性多肽产生T细胞免疫反应,这种免疫反应以既往感染者最强,慢性乙型肝炎组较弱,慢性乙型重型肝炎组缺乏,提示HBV特异性CTL应答可能是自 张海萍 闫惠平 张永宏 冯霞 赵艳 廖慧玉 刘燕敏 陈煜 檀玉芬 刘妍关键词:抗原 肝炎 乙型 细胞毒性 核酸扩增技术 HIV-1新发感染快速检测方法的建立与初步评价 被引量:4 2014年 目的建立用于I型艾滋病病毒(HIV-1)新发感染检测的斑点金免疫渗滤快速检测方法,并研究其可行性及适用性。方法以特定浓度的HIV-1多亚型重组gp41抗原作为探针,包被硝酸纤维素膜,胶体金标记的抗人IgG作为显色试剂,建立新发感染的快速检测方法。比较该方法与BED捕获酶联法、限制性抗原亲和力方法的一致性。结果采用已知阳转时间的样本用于快速检测方法的建立,检测5例已知感染时间的样本的结果全部正确。分别用3种方法检测90例样本,快速检测方法与BED方法的符合率为88.9%(80/90),与亲和力方法的符合率为94.4%(85/90),快速检测方法与这两种方法检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论斑点金免疫渗滤法检测HIV-1新发感染具有快速、简便、经济、直观的特点,可节省检测时间和成本,提高检测效率,具有良好的适用性。 颜浩 高志云 张桂云 冯霞 邱茂锋 张誌 吴丽金 蒋岩关键词:斑点金免疫渗滤试验