王新涛 作品数:10 被引量:30 H指数:3 供职机构: 河南农业大学农学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
玉米株型相关基因ZmDwarf2的克隆及表达分析 被引量:3 2011年 以玉米紧凑型自交系豫82、平展型自交系沈137为材料,利用同源克隆法成功克隆了与水稻Dwarf基因同源的玉米Dwarf2基因,该基因水稻上通过参与BR生物合成途径调控其株型形态建成。序列分析发现,玉米Dwarf2基因cDNA序列全长1 501bp,开放阅读框1 398bp,编码465个氨基酸。与水稻Dwarf基因的同源度达84%。实时荧光定量PCR分析表明,豫82、沈137中Dwarf2基因表达趋势基本一致,3~4叶期表达量低,8~12叶期处于表达高峰,13叶期后表达量逐渐下降。沈137中表达量较豫82高;就不同器官来说,沈137在叶片、叶枕、叶鞘、茎尖等器官中表达量较豫82高,其中,叶枕处ZmDwarf2表达量相对较高,而叶鞘上ZmDwarf2表达量相对较低。可以推测,基因ZmDwarf2可能参与玉米中BR生物合成途径,进而调控其相关株型形态建成。 张伟强 吴连成 库丽霞 王新涛 张君 陈晓 陈彦惠关键词:玉米 株型 克隆 玉米光周期敏感类Hd6基因的克隆和实时定量表达分析 被引量:5 2008年 水稻Hd6基因在调节水稻光周期敏感中起重要作用。本研究以热带玉米自交系CML288为材料,利用同源基因克隆法结合3′RACE技术克隆了与水稻Hd6基因同源的玉米类Hd6基因。该基因序列中999bp的开放阅读框可编码332个氨基酸。BLAST分析发现,该基因与玉米中编码蛋白激酶CK2的一个基因高度同源,所推测的氨基酸序列包含2个CK2活性区域,1个N末端区域,1个ATP结合位点和1个丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶活性位点,与玉米、小麦、水稻和拟南芥的CK2氨基酸序列也有较高的同源性。建立了SYBRGREEN法实时荧光定量RT-PCR表达分析系统,研究了不同光周期处理下类Hd6基因在光周期敏感自交系CML288茎尖和叶片中的表达。结果发现,该基因在茎尖和叶片中均有表达。在短日条件下,该基因在6~8叶期茎尖中的表达量存在明显差异,在光周期敏感的7叶期出现表达高峰,在叶片中的表达量均低于茎尖。在长日条件下,该基因在茎尖中6叶期表达量较低,在光周期敏感的9叶期在叶片中高量表达。由此可推测,该基因与玉米光周期敏感密切相关,可能在光周期敏感调节过程中发挥一定的作用。 李思远 陈晓 王新涛 陈彦惠关键词:光周期敏感 基因克隆 实时定量RT-PCR 玉米 玉米光周期敏感基因ZmGI的克隆和功能分析 玉米(Zea mays)作为最重要的粮食作物,在保证国家粮食安全方面起着举足轻重的作用,丰富的种质资源是保证玉米育种和生产持续稳定发展与提高的基础。热带亚热带玉米具有丰富的遗传变异,但在温带地区利用中存在的一个主要障碍是... 王新涛关键词:玉米 光周期敏感 文献传递 玉米光周期敏感特性研究及长日照光周期诱导差减文库构建 被引量:2 2009年 以热带玉米自交系CML288为材料,通过对比研究表明,CML288对光周期非常敏感。通过长、短日照挪移试验发现,CML288短日照处理条件下,6~7叶期是光周期反应最敏感时期,7~9叶期是光周期敏感持续期,但敏感效应明显减弱。以CML288敏感期叶片与茎尖为材料,利用SSH技术构建了对长日照敏感而特异表达的基因文库,3000多个单克隆被有效富集。对差减文库中分离的64个特异表达EST序列分析表明,16个EST序列与玉米已知功能的蛋白序列具有较高的同源性;41个序列与其它物种编码序列同源性较高;7个EST没有同源的序列,可能代表了新基因。 陈晓 王新涛 李思远 张青珍 陈彦惠关键词:热带玉米 光周期敏感 玉米生物钟基因ZmCCA1的克隆与功能分析 生物钟作为内在的机制调控了植物发育的广泛过程,然而对主要的粮食作物玉米的生物钟却了解甚少。本研究以热带玉米自交系CML288叶片的cDNA为模板,采用RT-PCR方法获得了编码生物钟基因ZmCCA1。荧光定量表达分析表明... 王新涛 陈彦惠关键词:玉米 荧光定量PCR 文献传递 玉米光周期敏感基因ZmELF4的克隆及其亚细胞定位 被引量:1 2011年 以热带玉米自交系CML288为供试材料,根据拟南芥ELF4基因保守序列设计引物,采用RT-PCR方法克隆了ELF4在玉米上同源基因的全长cDNA序列(GenBank上的登录号为HQ009862)。序列分析表明,该基因cDNA序列全长683 bp,开放阅读框为432 bp,编码了144个氨基酸,与拟南芥、水稻的氨基酸序列同源性分别高达62%和75%,此外它们还共同包含一个高度保守的DUF1313未知功能结构域。利用基因重组技术分别构建了能够高效表达的过量表达载体pBI-ZmELF4和带有GFP标记的融合表达载体pGIT-ZmELF4-GFP,利用融合表达载体进行洋葱表皮瞬时表达实验,结果将ZmELF4定位于细胞核内,说明该基因在细胞核内起作用。 张少方 王新涛 吴连成 吴刘记 谢丽莉 郭书磊 陈彦惠关键词:玉米 亚细胞定位 玉米和狗尾草光周期敏感性的比较研究 被引量:2 2012年 光周期是影响植物生长发育的关键因素之一。玉米和狗尾草都是短日照禾本科植物,且都具有光周期敏感性。对玉米和狗尾草的光周期敏感性比较研究,探索易于研究的狗尾草光周期敏感性机理,借以解析玉米光周期敏感性反应的机理。以玉米自交系CML288、黄早四和狗尾草自交系A10为材料,研究在长日照、短日照和在不同生育时期长短日照相互挪移处理下的光周期反应。结果表明,玉米和狗尾草在长日照条件下都表现出营养生长旺盛和生育期延迟,二者在长日照条件下的光周期敏感阶段都比短日照条件下的光周期敏感阶段长;玉米在进入光周期敏感期之前有一段时间的光周期钝感期,而狗尾草从发芽出苗就直接进入光周期敏感期。两个光周期敏感程度不同的玉米自交系比较,光周期敏感自交系CML288比光周期相对不敏感自交系黄早四的光周期敏感阶段长。 谢丽莉 吴连成 库丽霞 吴刘记 张君 王新涛 陈彦惠关键词:玉米 狗尾草 光周期 光周期敏感性 玉米Hd6-like基因植物表达载体的构建及其功能分析 被引量:1 2009年 利用已克隆的玉米Hd6-like基因构建植物过量表达载体PBI-Hd 6,将Hd6-like插入带有启动子CaMV35 S和终止子nos的PBI 121中间载体中,经过酶切鉴定表明,目的基因已正确地插入该载体中.利用根癌农杆菌侵染花序法侵染拟南芥,将Hd6-like基因转入拟南芥,获得转基因Hd6-ox植株,经PCR检测表明,该基因已整合到拟南芥的基因组中.转基因Hd6-ox植株的花期推迟了24 d左右. 王新涛 李思远 吴连成 库丽霞 常丽丽 杨爽 陈彦惠关键词:玉米 表达载体构建 植物FLOWERING LOCUS T/TERMINAL FLOWER1基因家族的研究进展 被引量:11 2008年 植物FLOWERING LOCUS T/TERMINAL FLOWER1(FT/TFL1)基因家族是一个进化上高度保守的基因家族,它在植物的花发育过程中具有重要作用:其成员FT基因编码的蛋白产物是可以长距离转运的成花激素,在花形成过程中起关键作用;另一成员TFL1基因则在花序的形成和维持过程中起重要作用.本文就近年来国内外对植物FT/TFL1基因家族的结构、成员,以及各个成员在花发育转换过程中的功能等研究现状进行综述,并对该基因家族的研究前景提出展望. 常丽丽 吴连成 库丽霞 孙朝辉 王新涛 陈彦惠关键词:磷脂酰乙醇胺 花发育 基因家族 基因型和环境对玉米籽粒粗蛋白及赖氨酸含量的影响 被引量:2 2008年 以河南省生产上主要推广的15个玉米品种为材料,于2004-2005年在8个不同的环境条件下进行了2年多点试验,研究基因型和环境对玉米粗蛋白和赖氨酸含量的影响。结果表明:基因型、环境以及基因型与环境的互作效应对玉米粗蛋白和赖氨酸含量均有显著影响,独立效应大于互作效应,在独立效应中,基因型效应大于环境效应;HE-1、HE-2、豫单101和豫单2002粗蛋白含量高于11%,赖氨酸含量高于0.35%,是较理想的高蛋白、高赖氨酸优质专用的玉米品种;郑州、南阳和洛阳比较适宜种植高蛋白、高赖氨酸优质专用玉米。 吴连成 库丽霞 陈彦惠 赵博 赵文明 王付娟 李思远 常丽丽 孙朝辉 王新涛关键词:玉米 粗蛋白 赖氨酸 基因型