莫倩珍
- 作品数：5 被引量：10H指数：3
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家留学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 弓形虫mMAG嵌合型类病毒颗粒在烟草中的高效瞬时表达研究
- 弓形虫是一种重要的机会性致病原虫,可引起人兽共患弓形虫病,研制价廉易用的动物用弓形虫转基因植物口服疫苗,对于保护畜牧业和切断人类弓形虫病传播途径,具有重要意义。Magnifection新型植物高效瞬时表达技术平台的成功构...
- 莫倩珍麦荣嘉陈敏芳赖华芳陈强周晓红
- 关键词：转基因植物无土栽培
- 文献传递
- 日本血吸虫小热休克蛋白Sjp40的RNA干扰效应被引量：3
- 2012年
- 目的研究日本血吸虫小热休克蛋白(sHSP)Sjp40基因的RNA干扰效应及其干扰后日本血吸虫HSP60、HSP70、HSP90基因在mRNA水平出现的协同效应,观察各期虫体Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA表达水平。方法以双链RNA(dsRNA)实现RNA干扰。体外转录合成dsRNA,将Sjp40的dsRNA(dsSjp40)及阴性对照GFP的dsRNA(dsGFP)通过浸泡法转染到日本血吸虫成虫中,体外培养7 d后用TRIZOL法提取其总RNA及总蛋白,实时荧光定量PCR(qPCR)检测Sjp40基因及SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达,Western blot检测Sjp40蛋白表达产物。提取各期虫体总RNA,qPCR检测Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达。结果转染后Sjp40 dsRNA转染组目的基因的转录水平较阴性对照GFP dsRNA转染组下降了80%左右;蛋白质水平较空白对照及阴性对照组(dsGFP)出现明显降低,qPCR结果显示在Sjp40基因RNA干扰后SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达水平未发现明显变化。此四种HSPs在日本血吸虫生活史不同时期mRNA表达存在明显差异,Sjp40基因在虫卵期mRAN水平表达相对其他HSPs基因高。结论 dsSjp40 RNAi可特异性抑制Sjp40的表达,但对SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达没有明显的影响。
- 陈敏芳麦荣嘉莫倩珍周晓红
- 关键词：日本血吸虫RNA干扰DSRNA
- 弓形虫SAG1肽在烟草中的瞬时快速表达研究
- 转基因植物疫苗,使用简便,成本低廉,具有较好的安全性。目前已有多种优势疫苗分子在转基因植物中成功表达,且部分针对病毒和细菌的转基因植物疫苗已进入临床试验阶段,展示其具有广阔的应用前景。 弓形虫是一种寄生在人和动物体内的机...
- 莫倩珍
- 关键词：弓形虫
- 文献传递
- 快速高效植物瞬时表达的实验室烟草无土栽培体系的构建被引量：3
- 2012年
- 目的构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系。方法优化烟草的无土栽培条件,基于Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统,观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达绿色荧光蛋白(GFP)的影响,以Western blot和ELISA分析GFP表达情况。结果烟草无土培育的最佳条件为:光照强度9000LX/层,光照时间16 h/d,日/夜温度28/21℃,相对湿度80%。侵染工程菌的最佳D600为0.8;叶片采收最佳时间为侵染后4 d;本明烟和豫烟5号最佳侵染时机分别为第6周和第5周;工程菌pBYGFPDsRed.R/LBA4404侵染的本明烟和豫烟5号均能高效表达GFP;豫烟5号的平均生物量高于本明烟。结论基于人工气候箱成功构建了实验室烟草无土栽培体系,并可实现GFP在本明烟和豫烟5号的快速高效表达。
- 莫倩珍麦荣嘉杨志晓陈敏芳杨铁钊赖华芳杨培梁陈强周晓红
- 关键词：烟草无土栽培绿色荧光蛋白
- 转基因番茄Zeneca B,Da,F实时荧光定量PCR检测体系的建立被引量：4
- 2011年
- 目的构建转基因番茄Zeneca B,Da,F品系的质粒标准分子及其实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系。方法基于反向遗传学原理构建分别含有番茄内标准基因apx检测序列(ERG-apx),转基因番茄B,Da,F品系pg基因的基因特异性序列(GS-pg)及其构建特异性序列(CS-16S、CS-16A)的番茄内参质粒标准分子pEasy-T3-APX,转基因番茄B,Da,F品系的构建特异性质粒标准分子pEasy-T3-16A、pEasy-T3-16S;以Beacon Designer 7.5设计用于定性PCR和qPCR检测的引物对和Taqman探针;基于质粒标准分子建立了定性PCR和qPCR检测体系,对方法的特异性、敏感性、重复性、检测下限等指标进行评估;使用PicoGreen试剂盒对质粒标准分子进行定量,以质粒pEasy-T3-APX为背景DNA定量混有pEasy-T3-16A或pEasy-T3-16S制备成含量为1%和0.1%(w/w)的两组核酸标准物质,进行所构建qPCR检测体系的定量性能评价。结果锚定qPCR检测靶序列:ERG-apx 108 bp,GS-pg 108 bp,CS-16S 109 bp、CS-16A 102 bp;酶切鉴定所构建的质粒标准分子均可得到预期大小的插入子片段;所建立的实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系,重复性的相对标准差(RSD)0.2%～1.5%,检测下限25 copies,标准曲线方程线性关系R2值在0.994～0.998,效率在93.3%～102.4%。经换算系数Cf换算,对PicoGreen定量的样品进行验证,其实测值与真值的偏差是-9.7%～17.3%。结论成功构建了转基因番茄Zene-ca B,Da,F品系的质粒标准分子及其qPCR检测体系,为转基因番茄Zeneca B,Da,F品系转基因成分的监测建立了可行的可供使用的定性与定量检测体系。
- 麦荣嘉陈敏芳莫倩珍胡良勇黎事伦唐敏然顾晓敏蔡永洪周伦彬周晓红
- 关键词：转基因番茄核酸检测技术荧光定量PCR
