陈兰明 作品数:36 被引量:68 H指数:4 供职机构: 上海海洋大学食品学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术委员会资助项目 上海市地方高校能力建设项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 农业科学 更多>>
白羽鸡致病性大肠杆菌、沙门氏菌的分离鉴定及抗生素耐受性分析 2024年 【背景】大肠杆菌、沙门氏菌是肉鸡养殖中的主要致病菌,可造成巨大的经济损失,其耐药情况不容忽视。【目的】从病死鸡体内分离致病性大肠杆菌、沙门氏菌并对其进行鉴定,分析其耐药特性。【方法】常规方法分离纯化目标菌株,结合生化试验、16SrRNA基因序列分析、生长曲线验证进行鉴定,采用纸片扩散法进行药敏试验,分析其耐药率及多重耐药性。【结果】共分离得到10株大肠杆菌和10株沙门氏菌(包括4株肠道亚种、1株亚利桑那亚种和5株邦戈尔沙门氏菌种);大肠杆菌仅对碳青霉烯类药物敏感,对其他类药物耐药性较强;沙门氏菌对碳青霉烯类药物敏感,对其他类药物则呈现不同程度的耐药性;所有分离菌均为多重耐药菌。【结论】分离得到了病原菌并确定了其耐药特性,为白羽鸡养殖中大肠杆菌、沙门氏菌的防治提供了参考。 赵泰霞 周圆圆 田雯欣 罗忠宝 黄宝钦 胥海霞 华咏诗 郑谦波 陈兰明 范俐关键词:鸡源致病性大肠杆菌 耐药性 南美白对虾养殖水体中霍乱弧菌的毒力、耐药及重金属抗性研究 被引量:4 2014年 旨在分析南美白对虾养殖水体中霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的毒力、抗菌素耐药性以及重金属抗性特性,为致病性霍乱弧菌流行预警的研究提供数据支撑。利用聚合酶链反应技术检测了84株霍乱弧菌分离菌株的毒力以及整合接合元件(ICEs)相关基因;采用美国临床与实验室标准研究所(CLSI)标准Kirby-Bauer纸片扩散法以及最小抑菌浓度法测定了受试菌株的抗菌素和重金属抗性;运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对部分受试菌株进行了分子分型。结果显示:受试霍乱弧菌菌株均不携带致病性肠毒素基因ctxA B以及毒素相关基因sto、tcpA、ace、zot;含有毒素表达调控蛋白基因toxR,其中19.05%菌株还含有RTX家族毒素基因rtxA;携带SXT-R391家族ICEs保守功能模块部分相关基因(int、traI、traC、setR、attR)。受试霍乱弧菌菌株对六大类十种抗菌素的耐药性存在显著差异,其中对氨苄西林的耐药率最高为13.10%,其次是庆大霉素(2.38%);利福平、链霉素、氨苄西林、卡那霉素、壮观霉素的中介耐药率为25.00%~1.19%;对四环素、氯霉素、甲氧胺苄嘧啶、复方新诺明均敏感。此外,30%的受试霍乱弧菌菌株对重金属铅、锌具有高度抗性,而对铬、镉、铜、镍、汞、钡敏感;PFGE分子分型可分为5种Not I-PFGE型13种亚型,相似性值为56%~100%。本研究结果为进一步探讨致病性霍乱弧菌的进化起源奠定了基础。 唐毓祎 谈建国 缪海振 彭丽 杨丹丹 潘迎捷 陈兰明关键词:南美白对虾 霍乱弧菌 重金属抗性 分子分型 一种霍乱弧菌附属毒素蛋白编码基因的检测方法和应用 本发明公开了一种霍乱弧菌附属毒素蛋白编码基因的检测方法和应用,其样品检测反应液中DNA模板为提取的霍乱弧菌基因组DNA,最低检测限为192fg/μL,针对附属毒素蛋白编码基因hlyA、rtxA、tlh,各设计六条特异性引... 陈兰明 许梦婕文献传递 一种新型核酸等温扩增反应组件 本发明公开了一种新型核酸等温扩增反应组件,包括反应管、适配架和暖贴,反应管自开口处起依次分为:密封区、加样区和反应区;反应管还包括管盖,且与密封区的密封口适配;加样区大小规格与1~20μL的微量移液吸头适配;反应区为针形... 陈兰明 苏晨丽文献传递 一种羧酸酯酶基因及其编码的蛋白 本发明涉及分子生物学领域,提取无色杆菌基因组DNA,利用功能驱动的筛选策略和基因克隆技术,提供了一种双功能羧酸酯酶基因,其核苷酸序列包括SEQ ID No.1所示的序列;其编码的蛋白是一种双功能羧酸酯酶,具有硫酯酶和酰基... 潘迎捷 时玉萍 陈兰明 李柏林 欧杰 陈兴华文献传递 耐受五种抗菌素的非O1/O139型霍乱弧菌菌株及应用 本发明提供了一种耐受五种抗菌素的非O1/O139型霍乱弧菌菌株及应用,该菌株为Vibrio cholerae CHN‑J2‑13菌株,保藏编号为:CCTCC NO:M 2020258;其编码的特异性lolB基因的序列如S... 陈兰明 许梦婕 单馨影养殖鱼塘中铜绿假单胞菌致病性及耐药相关基因的研究 被引量:2 2012年 旨在分析养殖鱼塘水体中铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)分离菌株的致病性、耐药性及其可能机制,为保障水产食品的安全提供科学依据。使用美国临床与实验室标准研究所的标准纸片扩散法,以及聚合酶链反应技术对PA分离菌株进行了抗菌素耐药性,以及毒性、固有和获得性耐药相关基因的检测与分析。结果显示,受试PA分离菌株的50%为exoS+/exoU-侵染型分子型,无临床分离菌株的exoS-/exoU+的细胞毒型分子型。PA菌株对6大类9种抗菌素的耐药性存在明显差异,其中甲氧胺苄嘧啶和利福平的耐药率最高为100%,其次是氨苄西林、卡那霉素和四环素,分别为90%、90%和80%,庆大霉素的耐药率最低为10%。多药抗性PA菌株均含有MexAB-OprM、MexXY-OprM和MexVW-OprM外排泵系统,其中20%菌株检测为β-内酰胺酶基因(ampC)阳性;而MexEF-OprN、MexJK-OprM、MexCD-OprJ和MexGHI-OpmD外排泵基因全部或部分缺失。此外,在PA菌株中均未检测到Ⅰ~Ⅲ类整合子的整合酶基因(comINT),但是整合接合元件(ICEs)保守模块功能基因(ICEint、soj、pilS2、pilD)均检测为阳性,提示PA菌株携带的ICEs具有潜在的转移活性,为进一步探讨PA多药抗性的散播奠定了基础。 于盼 金浩 潘迎捷 李柏林 宋雨泽 靳兰兰 陈兰明关键词:养殖水体 铜绿假单胞菌 毒性 耐药性 携带SXT/R391家族整合接合元件多重耐药菌株的高效筛选与分析 被引量:3 2015年 本研究建立了一种抗生素平板与分子检测相结合的高效筛选水产品中携带SXT/R391家族整合接合元件(integrative and conjugative elements,ICEs)的多重耐药菌株的方法。采用美国临床与实验室标准研究所标准Kirby-Bauer纸片扩散法、需氧菌液体微量稀释法,以及接合实验,对筛选、鉴定获得的携带SXT/R391家族ICEs的变形杆菌(Proteus vulgaris)进行了抗菌素、重金属抗性以及ICEs元件接合转移活性的分析。结果表明:运用本研究建立的筛选法可有效获得含有多重耐药基因的ICEs元件,其检出率为3%,远高于常规聚合酶链式反应技术的检测水平(<1‰)。受试菌株对六大类10种抗菌素均表现出抗性,并且对重金属镉、铜、锌和汞具有高度耐受性。接合实验证明了受试菌株所携带的ICEs元件在普通变形杆菌与大肠杆菌(Escherichia coli)MG1655之间的自我转移活性。 孙凤娇 贺羽 陈兰明关键词:多重耐药 重金属抗性 副溶血性弧菌整合接合元件核心基因表达对温度变化的响应 2015年 采用实时荧光定量聚合酶链式反应方法分析在1 5~4 2℃温度范围内副溶血性弧菌(Vi b r i o parahaemolyticus)CHN25整合接合元件(integrative and conjugative elements,ICEs)ICEVpa Chn1核心基因表达对温度变化的响应。结果表明:温度介导ICEVpa Chn1元件保守模块核心基因表达发生显著变化,其中,编码进入排斥蛋白Eex(entry exclusion)的基因对温度变化最为敏感,低于或高于37℃的温度条件均强烈抑制eex基因表达(〉10倍)。此外,在15~37℃范围内,温度的升高显著激活编码整合酶Int(integrase)、接合转移蛋白Tra I(transfer protein I)和Tra G、DNA修复蛋白Rum A基因的表达,且在37℃达到最大值;与其他检测基因明显不同,温度升高抑制转录抑制子Set R基因的表达,促进int等基因转录激活子Set C和Set D的积累,进而刺激切离,促进ICEVpa Chn1元件的接合转移。实验结果揭示了环境温度对ICEs元件核心基因表达的影响,发现低温(〈15℃)和高温(〉37℃)条件均可能阻遏ICEVpa Chn1元件及其携带基因信息在不同种属细菌间的接合转移。 朱春花 李云霞 陈兰明关键词:副溶血性弧菌 基因表达 宏基因组学技术在微生物功能酶开发中的应用 2012年 宏基因组学技术以特定环境样品中微生物复杂群落的基因组总和为研究对象,突破了传统微生物纯培养方法的局限,为不可培养微生物中丰富的基因资源的开发和利用提供了强有力的工具,已经取得了令人瞩目的研究进展。对宏基因组学技术及其在微生物功能酶新基因发现中的应用进行综述。 金浩 李柏林 潘迎捷 欧杰 陈兰明关键词:宏基因组学 环境微生物