严绍德
- 作品数:6 被引量:11H指数:1
- 供职机构:福州大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一株产氨甲酰妥布霉素工程菌及其应用
- 本发明属于医药技术领域,涉及一种灭活<I>aprH-aprM</I>功能的主产氨甲酰妥布霉素的工程菌及其应用,所述工程菌为黑暗链霉菌HM106(△aprHM),已于2011年9月13日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微...
- 洪文荣严绍德
- 文献传递
- 一株产氨甲酰妥布霉素工程菌及其应用
- 本发明属于医药技术领域,涉及一种灭活<I>aprH-aprM</I>功能的主产氨甲酰妥布霉素的工程菌及其应用,所述工程菌为黑暗链霉菌HM106(△aprHM),已于2011年9月13日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微...
- 洪文荣严绍德
- 黑暗链霉菌中安普霉素生物合成的阻断研究被引量:1
- 2012年
- 以黑暗链霉菌Tt-49基因组为模板,利用PCR方法,扩增安普霉素生物合成关键基因aprH^M的上、下游序列,作为同源交换臂,并以温敏复制型质粒pKC1139为基础,构建用于阻断黑暗链霉菌Tt-49中安普霉素生物合成的重组质粒pHM106。质粒经接合转移进入黑暗链霉菌Tt-49,并筛选得到发生同源双交换工程菌,命名为黑暗链霉菌HM106。通过PCR鉴定,证明工程菌HM106中的aprH^M被tetr替换。对工程菌HM106进行发酵产物分析,结果是其发酵效价下降明显,仅为出发菌株的40%左右。采用薄层层析(TLC)对其组分分析,其安普霉素组分消失,因此,初步判断已成功阻断安普霉素的生物合成。
- 严绍德洪文荣
- 关键词:黑暗链霉菌安普霉素生物合成
- 黑暗链霉菌Tt49次级代谢流的阻断研究
- 严绍德
- 关键词:黑暗链霉菌妥布霉素基因工程
- 黑暗链霉菌DNA同源重组系统的构建被引量:11
- 2011年
- 以黑暗链霉菌Tt-49基因组为模板,利用PCR方法,扩增安普霉素生物合成关键基因aprF-G的上、下游序列,作为同源交换臂,并将红霉素抗性基因筛选标记及其启动子插入两交换臂之间,以温敏型质粒pKC1139为基础,构建用于阻断黑暗链霉菌Tt-49安普霉素生物合成的重组质粒pFD8。该质粒通过E.coli ET12567/pUZ8002去甲基化修饰后,经接合转移进入黑暗链霉菌Tt-49,利用红霉素抗性筛选得到3株阳性转化子,分别命名为Tt-49 AG1、Tt-49 AG2和Tt-49 AG3。通过PCR鉴定,证明pFD8已插入黑暗链霉菌Tt-49基因组的目标位点。以亲株作对照,对3株工程菌进行红霉素抗性能力考察,发现3株工程菌的抗红霉素能力均高达1 000μg/mL以上。
- 朱碧银洪文荣严绍德朱宝泉林玉双封成军
- 关键词:黑暗链霉菌同源重组安普霉素
- 黑暗链霉菌中妥布霉素阻断载体的构建
- 以黑暗链霉菌Tt-49基因组为模板,妥布霉素生物合成基因tobX-Z为靶基因,利用PCR方法 ,扩增靶基因上、下游序列,作为同源交换臂,以温敏型质粒pKC1139为基础,将红霉素抗性基因筛选标记插入其中一个交换臂与载体之...
- 严绍德洪文荣
- 关键词:黑暗链霉菌妥布霉素基因敲除