刘振
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
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- hGLP-1类似物基因转染对糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素水平及胰岛细胞的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究尾静脉注射人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)类似物基因(2×Val2-hGLP-1)重组表达质粒对糖尿病模型大鼠血糖、血清胰岛素水平及胰岛细胞的影响。方法建立链脲佐菌素(STZ)诱导SD糖尿病大鼠模型,随机分为含有hGLP-1类似物基因的重组质粒(pIRES2-EGFP/Val2-hGLP-1)转染组、空质粒(pIRES2-EGFP)转染组、糖尿病模型对照组,每组8只。另取8只未经处理的SD大鼠作为正常对照组。重组质粒转染组和空质粒转染组分别通过尾静脉注射含相应质粒(110μg/只)的溶液,糖尿病模型对照组和正常对照组给予等量的生理盐水。实验动物共干预30d,实验结束后,观察各组大鼠血糖及血清胰岛素水平的变化,采用糖耐量及胰岛素耐量实验检测大鼠胰岛素敏感性然后处死动物,HE染色观察胰岛细胞病变情况,免疫组化法分析胰岛素分泌情况。结果与正常对照组、糖尿病模型对照组和空质粒转染组比较,重组质粒转染组血糖水平明显降低(P<0.01),血清胰岛素水平显著升高(P<0.01)。基因治疗改善了糖尿病大鼠的糖耐量,降低了胰岛素抵抗,提高了机体对胰岛素的敏感性(P<0.01)。空质粒转染组与糖尿病模型对照组比较,以上指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。同时,重组质粒转染组的胰岛素分泌水平提高,与糖尿病模型对照组比较,胰岛细胞病变程度明显改善。结论hGLP-1类似物基因转染可促进胰岛细胞增殖,提高胰岛素敏感性,从而显著降低糖尿病大鼠的血糖水平,并改善胰岛组织病变程度。
- 李晓丽刘振马卫列张志珍
- 关键词：糖尿病葡萄糖耐量试验胰岛
- 人胰高血糖素样肽-1类似物基因治疗对糖尿病大鼠机体代谢的影响被引量：2
- 2010年
- 目的观察人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)类似物基因(2×Val2-hGLP-1)对糖尿病大鼠模型机体代谢的影响。方法建立糖尿病大鼠模型,尾静脉注射携带hGLP-1类似物基因的重组表达载体(pIRES2-EGFP/Val2-hGLP-1),观察30d,期间测定相关指标。结果治疗后糖尿病大鼠体重、进食及饮水量改善明显(P<0.01)。治疗15d后,血糖水平由(27.06±1.73)mmol/L降至(17.57±2.17)mmol/L(P<0.01),血清胰岛素水平由(5.53±0.79)mIU/L升高至(9.88±0.96)mIU/L(P<0.01)。总胆固醇水平降低(P<0.05或P<0.01)。hGLP-1蛋白在胰腺、肝、肾、肌肉组织中表达。结论 hGLP-1类似物基因可导入糖尿病大鼠体内并成功表达,基因治疗降低大鼠血糖,血脂水平,改善大鼠的机体代谢。
- 李晓丽刘振马卫列张志珍
- 关键词：基因治疗血糖胰岛素
- 膜转运蛋白ABCA1与2型糖尿病被引量：1
- 2011年
- 胰岛β细胞机能失调是2型糖尿病发病机理的关键所在,而细胞内胆固醇积聚是2型糖尿病β细胞机能失调的发生机制.胆固醇转运体———三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCA1)缺乏,导致胰岛内胆固醇增加及胰岛素分泌受损,这表明胆固醇流出受损导致β细胞发生功能障碍.
- 刘振贺贞马卫列张志珍
- 关键词：ABCA1糖尿病胰岛Β细胞胆固醇
- 人胰高血糖素样肽-1类似物基因治疗对STZ诱导糖尿病大鼠的拮抗作用被引量：5
- 2010年
- 目的观察人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)类似物基因对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠的拮抗作用。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、空载体对照组及基因治疗拮抗组,每组10只。应用小剂量、多次给药的方式诱导糖尿病大鼠模型,观察hGLP-1类似物基因对大鼠血糖、血清胰岛素及胆固醇水平的影响。借助荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在不同组织中的表达情况;采用免疫组化分析胰岛细胞中胰岛素的表达水平。结果与糖尿病模型组和空载体对照组比较,基因治疗拮抗组糖尿病大鼠血糖水平下降、血清胰岛素水平升高、血清胆固醇水平下降。胰岛素免疫组化分析证实,胰岛细胞中胰岛素得以表达,基因治疗可使受损的胰岛细胞功能恢复。结论 hGLP-1类似物基因治疗对STZ诱导的糖尿病症状具有拮抗作用,改善糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素和血脂水平。
- 李晓丽刘振马卫列张志珍
- 关键词：糖尿病基因治疗拮抗
- 人胰高血糖素样肽-1类似物基因克隆及真核表达载体构建被引量：5
- 2009年
- 目的利用pIRES2-EGFP作为载体,构建人胰高血糖素样肽-1类似物基因(2×Val2-hGLP-1)重组表达载体。方法化学合成14个2×Val2-hGLP-1寡核苷酸片段,退火拼接成完整的2×Val2-hGLP-1类似物基因。退火片段克隆至pBSSK(+/-)载体中,经双酶切和测序鉴定,将目的片段插入pIRES2-EGFP中,构建pIRES2-EGFP/2×Val2-hGLP-1基因表达载体。重组载体经脂质体转染HEK-293A细胞后,Westernblot分析目的蛋白表达。结果双酶切鉴定和测序分析均证实,已成功构建pIRES2-EGFP/2×Val2-hGLP-1基因治疗载体。重组载体转染HEK-293A细胞,观察到绿色荧光蛋白表达,其转染效率达80%以上。Westernblot分析,检测到目的蛋白表达。结论pIRES2-EGFP/2×Val2-hGLP-1表达载体的成功构建,为Val2-hGLP-1基因功能研究及基因治疗提供了工具。
- 李晓丽刘振张志珍
- 关键词：克隆基因治疗
