侯立婷
- 作品数：68 被引量：45H指数：5
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 靶向B细胞的口蹄疫GHloop多肽抗原的制备及免疫效力鉴定
- 2023年
- 本研究将葡萄球菌A蛋白人工合成类似物的二聚体(DD)与口蹄疫的GHloop串联,按照大肠杆菌偏好性密码子优化合成GHloop-DD,并评价其免疫原性。将GHloop-DD插入到原核表达载体pET-32a中,鉴定阳性后转入E.coli BL21进行诱导表达。利用SDS-PAGE与Western blot对目的基因表达产物的可溶性进行分析。利用镍亲和层析柱纯化目的蛋白;利用BCA试剂盒测定重组蛋白的浓度,将重组蛋白(2.5μg/只)与206佐剂乳化,制备疫苗,免疫5周龄小鼠,同时设商品化合成肽苗对照与空白对照。免疫后28 d采集试验小鼠血清,利用口蹄疫病毒多肽ELISA抗体检测试剂盒检测免疫小鼠血清的抗体水平;利用流式细胞仪测定淋巴结B细胞的数量及骨髓中长寿浆细胞的数量;利用荧光定量检测相关趋化因子的表达水平;利用细胞因子检测试剂盒检测脾脏淋巴细胞刺激后上清液中的细胞因子的水平。SDS-PAGE结果表明,GHloop-DD基因在大肠杆菌中以可溶形式获得高水平表达;Western blot结果显示,表达的重组蛋白能够与特异性抗体发生反应。免疫试验结果表明,GHloop-DD不但能够刺激免疫小鼠产生高水平的多肽特异性ELISA抗体,而且能够提高淋巴结B细胞的数目及相关趋化因子水平,使骨髓中长寿浆细胞的数量和脾脏淋巴细胞刺激后上清液中细胞因子的水平显著提高。以上结果表明,本研究制备的GHloop-DD具有良好的免疫原性,为口蹄疫多肽疫苗的研制提供了新的方向。
- 侯立婷张媛媛于晓明于晓明张元鹏杜露平乔绪稳张元鹏郑其升程海卫
- 关键词：体液免疫B细胞
- 基于连接肽的双特异纳米抗体及其编码基因和应用
- 本发明公开一种基于连接肽的双特异纳米抗体及其编码基因和其应用，所述基于连接肽的双特异纳米抗体是以新型连接肽将不同的特异性的纳米抗体的基因连接后获得目的基因片段进一步重组表达获得的目的蛋白，所制备的基于连接肽的双特异纳米抗...
- 程海卫杨利郑其升陈瑾杜露平侯立婷于晓明乔绪稳张元鹏秦竹李兰王义伟张浩明
- 含免疫增强剂CVC1302口蹄疫灭活疫苗缩短免疫应答窗口期机制的研究被引量：2
- 2021年
- 为探究免疫增强剂CVC1302缩短口蹄疫灭活疫苗(KV)免疫应答窗口期的机制,本研究将灭活的O型口蹄疫病毒(FMDV)与CVC1302按照1.50配比后,与ISA206佐剂乳化制备疫苗(KV-CVC1302);将灭活的FMDV与ISA206佐剂乳化制备疫苗(KV),将上述疫苗分别免疫6周龄BALB/c雌性小鼠。免疫后7 d、28 d、56 d、90 d、120 d、150 d和180 d采血分离血清,利用O型FMD液相阻断ELISA(LBP ELISA)试剂盒检测各组小鼠血清FMDV特异性抗体水平。免疫后1 d,取注射位点肌肉,分别利用qPCR和ELISA检测其中细胞趋化因子的转录及表达水平。免疫后1 d、3 d、5 d和7 d分别采集注射位点肌肉及腹股沟淋巴结,制备单个淋巴细胞,利用流式细胞仪检测注射位点肌肉和腹股沟淋巴结的抗原递呈细胞(APC)[树突状细胞(DC)、巨噬细胞(Mph)、单核细胞(Mo)]的数量;免疫后1 d,利用流式细胞仪检测注射位点肌肉中DC的活化情况。结果显示,KV-CVC1302组小鼠FMDV特异性抗体水平、注射位点趋化因子转录及表达水平均显著高于KV组(p<0.01、p<0.001);且注射位点APC的数量及DC的活化水平也显著提高(p<0.001),该组小鼠腹股沟淋巴结APC的数量也明显高于KV组(p<0.05、p<0.01或p<0.001)。综上结果表明,CVC1302通过增强KV于注射位点诱导产生趋化因子的能力,募集大量的APC,进而对FMDV进行有效的捕获加工和递呈,转运至腹股沟淋巴结,诱导B细胞的形成,并分泌高水平抗体,从而缩短免疫应答窗口期。本研究首次证实CVC1302是在疫苗诱导免疫应答的启动阶段发挥作用,其通过募集活化的APC捕获更为有效的抗原以激活免疫系统,缩短了免疫应答窗口期,为后续研制新型免疫增强剂提供了新思路。
- 杜露平章晨昕侯立婷侯立婷郑其升于晓明
- 关键词：免疫增强剂O型口蹄疫病毒
- 具有黏附拮抗活性的拟态弧菌OmpU黏附素蛋白结合肽、多肽组合物及其应用
- 本发明涉及具有黏附拮抗活性的拟态弧菌OmpU黏附素蛋白结合肽、多肽组合物及其应用。本拟态弧菌OmpU黏附素蛋白结合肽由氨基酸序列SEQ ID NO:1组成。而多肽组合物则由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2以...
- 李槿年戚莉芳孔令严高会会侯立婷
- 文献传递
- 用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用
- 本发明提供用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用，涉及到疫苗制造领域。该复合免疫增强剂，含有羧甲基茯苓多糖、透明质酸和α‑GC。本发明还提供所述复合免疫增强剂在猪伪狂犬灭活疫苗中的应用。本发明复合免疫增强剂，能够提...
- 于晓明陈瑾侯立婷张元鹏郑其升侯继波
- PEDV亚单位疫苗免疫增强剂的筛选被引量：6
- 2016年
- 为了研究PEDV的新型亚单位疫苗,提高PEDV亚单位疫苗的免疫原性,选取免疫增强剂CVC1302、CVC1303与国家兽用生物制品工程技术研究中心构建的可溶性表达PEDV S蛋白核心表位COE的重组蛋白(p QZCOE-LTB)混合乳化制成疫苗,免疫4周龄的ICR小鼠,首免14 d后加免1次,随后采集首免14(加强免疫前),21,28,55 d的小鼠血清,分别用琼扩试验的方法定性检测血清IgG抗体以及用ELISA试剂盒定量检测小鼠血清IgG抗体滴度动态变化,肠组织sIgA抗体滴度。结果表明,重组蛋白与CVC1303配合使用免疫小鼠能产生显著高于灭活苗(CV777)阳性对照组的IgG和sIgA抗体水平,说明CVC1303免疫增强剂能有效增强该重组蛋白的免疫原性,提高亚单位疫苗免疫效果。
- 陈瑾黄春娟于晓明侯立婷乔绪稳郑其升侯继波
- 关键词：猪流行性腹泻病毒免疫增强剂免疫效力
- 拟态弧菌的绿色荧光蛋白标记及其在感染草鱼体内的动态分布被引量：6
- 2015年
- 为了示踪研究拟态弧菌感染草鱼的动态过程,将增强型绿色荧光蛋白编码基因EGFP克隆至质粒p BAD24,并转化到拟态弧菌04-14菌株构建荧光标记重组菌。重组菌经阿拉伯糖诱导后,能高效表达EGFP蛋白;荧光显微镜观察和流式细胞仪检测均发现重组菌能够发出明显的绿色荧光信号,且传至30代后质粒稳定率仍为100%;生物学特性检测结果显示,与野生株相比,重组菌的形态、生长特性和细胞黏附性均未发生明显改变。用标记重组菌浸泡感染草鱼,定点采集鳃、肠道、肌肉、头肾、脾脏和肝脏,借助荧光信号检测4 d内细菌在不同组织脏器中的动态分布。结果发现感染4 h后即可在肠道和鳃中检测到绿色荧光信号,标记菌检出量分别为3.60×108和2.36×106CFU/g,直至10 h,其含量无明显变化,12 h后含菌量逐渐下降,但持续存在直至鱼死亡。标记菌在肌肉、头肾、脾脏和肝脏中呈现相似的动力学,感染24 h后才检测到荧光信号,24-85 h时间段含菌量呈现先增加后下降的变化,48 h达到峰值,检出量分别为9.58×104（肌肉）、8.75×104（头肾）、1.50×104（脾脏）和4.50×104CFU/g（肝脏）,但均低于肠道中的检出量,结果表明肠道是拟态弧菌黏附定植与繁殖的主要靶器官。
- 高会会侯立婷李槿年黄安宁
- 关键词：草鱼拟态弧菌增强型绿色荧光蛋白
- 一种兽用疫苗佐剂、制备方法及其应用
- 本发明提供一种兽用疫苗佐剂、制备方法及其应用，兽用疫苗领域。所述兽用疫苗佐剂，包括分别负载有重组CTA1‑DD蛋白和PGN多肽的羧甲基壳聚糖‑硫酸葡聚糖纳米颗粒，所述重组CTA1‑DD蛋白的序列如SEQ ID NO:3所...
- 张元鹏秦竹郑其升陈瑾杜露平于晓明王义伟李兰侯立婷程海卫乔绪稳杨利张浩明侯继波
- 一种Toll样受体7激动剂纳米颗粒及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种Toll样受体7激动剂纳米颗粒，它是以硫辛酸与胺杂环化合物为原料先制成硫辛酸纳米颗粒，硫辛酸纳米颗粒再与结构如式Ⅰ所示的TLR7激动剂反应制得TLR7激动剂‑硫辛酸纳米颗粒。本发明TLR7激动剂‑硫辛酸纳...
- 秦竹郑其升史海健陈瑾张元鹏侯立婷于晓明乔续稳杜露平李兰侯继波
- 猪德尔塔冠状病毒高效亚单位疫苗
- 本发明提供猪德尔塔冠状病毒高效亚单位疫苗，涉及生物疫苗制造领域。该猪德尔塔冠状病毒高效亚单位疫苗，采用如下方法制备（1）将聚赖氨酸水溶液与鞭毛蛋白水溶液混合，搅拌5‑10h，冻干后得到免疫增强剂纳米颗粒冻干粉；所述鞭毛蛋...
- 侯立婷陈瑾于晓明郑其升杜露平程海卫乔绪稳秦竹王义伟侯继波杨利张元鹏李兰张浩明
