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杨宁宁: 作品数：14 被引量：17H指数：2; 供职机构：河南科技大学动物科技学院更多>>; 发文基金：洛阳市科技攻关计划项目河南省科技攻关计划河南省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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减毒沙门氏菌介导的t-PA基因表达及生物学活性研究: 沙门氏菌是一种侵袭性胞内菌，可作为活载体携带原核表达质粒和真核表达质粒，并能有效呈递抗原，激发抗沙门氏菌和诱导外源蛋白的特异性体液与细胞免疫反应，并能同时诱导粘膜免疫与全身免疫。减毒沙门菌是异源抗原的优良载体，具有良好的...; 杨宁宁; 关键词：T-PA 表达质粒 BHK细胞; 文献传递

重组减毒沙门菌ΔcrpSL1344(pET28-tPA)在BHK细胞中的表达及活性检测: 2012年; 为了探讨原核表达质粒中的真核基因在减毒沙门菌中表达的多肽是否能在真核细胞中加工修饰成具有生物活性的蛋白,试验根据人t-PA的编码序列设计1对引物,扩增t-PA目的基因片段,构建pET28-tPA原核表达质粒,将表达质粒电转化导入减毒鼠伤寒沙门菌ΔcrpSL1344中并转染BHK细胞,应用SDS-PAGE技术检测t-PA表达情况,ELISA法检测其表达水平,琼脂糖平板溶圈法检测纤溶活性。结果表明:重组菌ΔcrpSL1344(pET28-tPA)在BHK细胞中有66.0 ku的蛋白表达,转染96 h的表达量为108μg/L,细胞裂解液和转染表达质粒的细胞培养上清液均有促纤溶活性。说明携带t-PA原核表达质粒的减毒沙门菌具有较强的促纤溶活性。; 杨宁宁李银聚程相朝张春杰吴庭才; 关键词：减毒鼠伤寒沙门菌表达质粒 BHK细胞活性检测

减毒沙门氏菌介导的t-PA基因在BHK细胞中的表达及生物学活性检测: 通过对减毒沙门氏菌介导的t-PA的原核表达质粒和真核表达质粒在BHK细胞中表达和活性检测，探讨原核和真核质粒携带的外源基因在细胞中的表达和翻译后加工情况，为减毒沙门氏菌作为外源基因的载体可行性提供依据。本研究证实了原核和...; 杨宁宁李银聚程相朝张春杰吴庭才李小康张明亮李正; 关键词：组织型纤溶酶原激活剂减毒沙门氏菌免疫化学

鼠伤寒沙门氏菌SL1344株△crp△cya缺失株的构建及其生物学特性初步研究被引量：13: 2012年; 为研制更加安全并保持良好免疫原性的弱毒株鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)及疫苗活载体,本研究通过自杀性质粒介导的细菌同源重组技术,将已缺失cya基因的SL1344株进一步缺失crp基因,构建S.typhi-murium SL1344△crp△cya双基因缺失突变株,并对其生物学特性进行初步研究。双基因缺失株的构建是以含有重组自杀性质粒pRE△crp的大肠杆菌χ7213为供体菌,SL1344△cya为受体菌进行接合转移,两步法筛选crp/cya基因双缺失突变株,并通过PCR和测序鉴定。对双缺失菌株的生物学特性鉴定表明,SL1344△crp△cya血清型与亲本株SL1344△cya及野生株SL1344保持一致,并且能够稳定遗传缺失后的crp基因;其生化特性与亲本株基本相近,但与野毒株相比发生明显变化,生长速度也更为缓慢;对雏鸡致病性测定试验显示,双缺失株毒力比SL1344至少降低了约106倍。实验结果表明,S.typhimurium SL1344△crp△cya缺失株具有良好的遗传稳定性,毒力明显降低,为深入研究以S.typhimurium为载体的口服疫苗奠定了基础。; 李正程相朝张春杰李银聚李静张明亮田芳华杨宁宁

鼠伤寒沙门氏菌SL1344△crp△cya缺失株的构建: 本研究以鼠伤寒沙门氏菌SL1344 Δ cya株作为减毒株，应用重组自杀性质粒介导细菌等位交换技术获得SL1344 Δ crp Δ cya基因缺失突变株，为开发遗传背景清晰、符合生物安全性要求的减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗及载...; 李正程相朝赵战勤张春杰李银聚昊庭才李小康张明亮杨宁宁; 关键词：鼠伤寒沙门氏菌缺失突变株基因载体

豫西地区PRRSV新近流行株ORF5基因变异及Nsp2基因特征的分析: 引言/目的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是以持续感染和免疫抑制为主要特征的猪病毒性传染病。近年来,毒力增强的PRRSV变异毒株不断出现,给该病的预防和控制带来了新的挑战。本研究旨在对豫西地区PRRS V新近流行株ORF5...; 张明亮张春杰程相朝李银聚吴庭才王臣李小康李正杨宁宁

表达PRRSV GP5重组沙门氏菌的构建及鉴定: 引言/目的猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)是一种猪的高度接触性传染性疾病,给我国养猪业带来了严重的损失。疫苗免疫预防是防控PRRS的最佳方法。然而,通常的灭活苗和活疫苗都不能产生令人满意的免疫效果,为此,开发有效、安全的新...; 张明亮张春杰程相朝赵战勤李银聚吴庭才李小康李正杨宁宁

表达PRRSV GP5重组沙门氏菌的构建及鉴定: 目的：构建了携带猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)ORF5基因的减毒沙门氏菌重组菌，从而探讨PRRS活载体疫苗的可行性。方法：在△crpC78-1缺失株的基础上筛选猪霍乱沙门氏菌C78-1株△crp△asd双缺失株;将...; 张明亮张春杰程相朝赵战勤李银聚吴庭才李小康李正杨宁宁; 关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒 GP5基因沙门氏菌分子鉴定

减毒鼠伤寒沙门氏菌介导真核表达质粒在鸡体内的分布与表达: 引言沙门氏菌是一种细胞内侵袭菌,通过基因缺失方法构建的减毒的沙门氏菌,能够保持良好的侵袭力,但降低了对动物的致病性,目前已用于新型DNA疫苗和活性蛋白基因载体的研究。为探讨减毒鼠伤寒沙门氏菌作为活性蛋白基因转移活载体的可...; 李银聚王晓利程相朝张春杰吴庭才杨宁宁

鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔcya缺失株的构建: 引言/目的鼠伤寒沙门氏菌是一种肠道致病菌,具有广泛的宿主谱和致病性,在兽医、人医和公共卫生上都具有重要意义。基于耐药性和食品安全方面的考虑,疫苗接种是本病防控的一个理想选择。cya基因编码腺苷酸环化酶,crp基因编码腺苷...; 李正程相朝赵战勤张春杰李银聚吴庭才李小康张明亮杨宁宁; 文献传递