吕丹 作品数:15 被引量:5 H指数:1 供职机构: 北京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人UNC5CL原核蛋白的表达及多克隆抗体的制备和鉴定 被引量:3 2010年 目的:构建UNC5CL基因的原核表达载体,纯化GST-UNC5CL融合蛋白,并以其为抗原免疫家兔,制备抗人UNC5CL多克隆抗体,并鉴定其反应性和特异性。方法:用PCR方法扩增UNC5CL基因(表达其280-518位氨基酸)片段并克隆至pGEX-4T-2原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21诱导融合蛋白GST-UNC5CL(aa 280-518)表达;所获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化,免疫家兔制备抗血清,再采用ELISA、Western blot和免疫组化的方法检测抗体的效价及特异性。结果:测序证实原核重组质粒构建成功;经IPTG诱导,可表达Mr为52 000的GST-UNC5CL(aa280-518)的融合蛋白;谷胱甘肽亲和层析柱纯化的融合蛋白免疫家兔制备的抗血清经Western blot和免疫组化检测证实可识别目的蛋白。结论:制备了兔抗人UNC5CL的多克隆抗体,且抗体对内源性UNC5CL具有较好的反应性和特异性,为进一步研究UNC5CL的功能奠定了基础。 吕丹 钱晓萍 田晓军 张毓 张君关键词:融合蛋白 多克隆抗体 新的抑癌基因UNC5D及其编码蛋白的新应用 本发明提供了新的抑癌基因UNC5D基因及其编码蛋白的新应用,具体涉及:UNC5D基因和/或其编码的蛋白在制备治疗癌症的药物中的应用;检测UNC5D基因或其编码的蛋白的试剂在制备用于癌症的辅助诊断和/或预后判断的组合物中的... 张君 张毓 吕丹 董冬UNC5CL及其编码蛋白的应用 本发明提供了UNC5CL基因及其编码蛋白的应用,具体涉及UNC5CL基因或其编码的蛋白在制备治疗癌症特别是肾癌的药物中的应用,并且涉及UNC5CL基因或其编码的蛋白在抑制肿瘤细胞的生长和/或细胞迁移中的应用,以及在抑制肿... 张君 张毓 吕丹文献传递 小鼠抗人FOXO3保守区多克隆抗体的制备和鉴定 被引量:1 2017年 目的纯化叉头盒蛋白O3(FOXO3)基因保守区蛋白,并制备其多克隆抗体。方法利用生物信息学分析预测FOXO3蛋白的保守区,通过PCR扩增编码FOXO3蛋白第290~472位氨基酸DNA片段并克隆至pET28a原核表达载体中,转化到大肠杆菌BL21,诱导表达并获得可溶性蛋白,经镍离子柱亲和纯化,免疫小鼠制备抗血清,随后采用ELISA、Western blot法和免疫沉淀实验检测抗体的效价、特异性以及应用范围。结果成功构建表达载体pET28a-FOXO3(aa290-472),实现可溶性FOXO3蛋白的表达和抗体制备。SDS-PAGE和Western blot实验结果证实,FOXO3蛋白与预期结果一致,抗血清能够特异性地识别原核、真核FOXO3蛋白以及其天然抗原表位。结论成功制备了小鼠抗人FOXO3的多克隆抗体,且抗体对内源性FOXO3具有较好的反应性和特异性。 李蕾 吕丹关键词:多克隆抗体 融合蛋白 调节PTIR1表达的试剂在制备肿瘤免疫治疗的药物中的应用 本发明涉及抑制PTIR1表达的试剂在制备肿瘤免疫治疗的药物中的应用,属于药物制备技术领域。本发明提供了抑制PTIR1蛋白或PTIR1基因表达的试剂在制备肿瘤免疫治疗的药物中的应用。抑制PTIR1蛋白或PTIR1基因表达能... 尹玉新 吕丹 宋佳文献传递 一种二嵌段共聚物或其药学上可接受的盐在制备抗病毒药物中的应用、药物组合物 本发明提供了一种二嵌段共聚物或其药学上可接受的盐在制备抗病毒药物中的应用、药物组合物,属于药物应用技术领域。本发明提供的二嵌段共聚物为pH敏感材料,其pKa范围为6.0~8.0,可以裂解或破坏病毒外膜,直接作用于病毒而非... 林志强 吕丹 龚礼栋 孙祎喆文献传递 检测RIG-I-Short的表达水平的试剂在制备肿瘤诊断和/或预后的产品中的应用 本发明提供了检测RIG‑I‑Short的表达水平的试剂在制备肿瘤诊断和/或预后的产品中的应用,属于生物技术领域。本发明中,所述RIG‑I‑Short的蛋白质序列如SEQ ID No.1所示。RIG‑I‑Short是RIG... 尹玉新 吕丹 宋佳文献传递 Netrin-1及其受体与肿瘤的关系 被引量:1 2011年 神经轴突导向分子Netrin-1通过与其受体结直肠癌缺陷基因(deleted in colorectal cancer,DCC)或UNC5同源物(UNC-5Homolog,UNC5A-C,UNC5H1-3)家族成员结合传递信号,参与神经轴突的生长、定向迁移和神经元发育等生理功能。Netrin-1受体在没有配体结合的情况下,诱导细胞凋亡,故被归为"依赖性受体"(dependence receptor,DR)家族。Netrin-1受体在结直肠癌等多种肿瘤中下调或不表达,导致其表达下调的可能机制包括杂合性缺失、表观遗传学改变和转录调控等;过表达Netrin-1受体可抑制肿瘤细胞的增殖和迁移。Netrin-1及其受体家族是近年来鉴定出来的肿瘤参与分子,很可能是未来肿瘤治疗的新靶点。 吕丹 张君 张毓关键词:NETRIN-1 肿瘤 凋亡 候选抑癌基因UNC5D在肿瘤中的表达特点及其表达调控机制研究 研究背景:UNC5D属于UNC5受体家族成员,家族中的其它成员还包括UNC5A、UNC5B、UNC5C。UNC5受体家族在1997年被报到是神经生长因子netrin-1的受体,而UNC5D在UNC5家族中是发现最晚的。N... 吕丹 董冬 张君 张毓关键词:甲基化 杂合性缺失 新的抑癌基因UNC5D及其编码蛋白的新应用 本发明提供了新的抑癌基因UNC5D基因及其编码蛋白的新应用,具体涉及:UNC5D基因和/或其编码的蛋白在制备治疗癌症的药物中的应用;检测UNC5D基因或其编码的蛋白的试剂在制备用于癌症的辅助诊断和/或预后判断的组合物中的... 张君 张毓 吕丹 董冬文献传递