孟哲峰
- 作品数：33 被引量：74H指数：5
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金浙江省医药卫生重点科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定被引量：2
- 2005年
- 目的 :制备能用于肿瘤靶向治疗的重组表皮生长因子受体干扰序列 白细胞介素 18(EGF-IL-18)融合蛋白 ,并鉴定其生物学活性。方法 :利用Bac-to-Bac表达系统在昆虫细胞Sf9中表达融合蛋白 ,用离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等方法纯化表达产物 ,并以IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验初步评价融合蛋白的生物活性。结果 :经SDS-PAGE和Westernblot检测 ,Sf9细胞中表达的重组蛋白与预期的EGF-IL-18融合蛋白分子量一致 ,纯化后融合蛋白具有较高纯度和良好的免疫原性。IFN -γ诱导实验和EGFR竞争结合实验显示 ,该融合蛋白具有肿瘤导向性和抗肿瘤活性。结论 :成功表达并纯化了具有肿瘤导向性的抗肿瘤蛋白———EGF-IL-18融合蛋白 ,该蛋白具有较好的肿瘤导向性和抗肿瘤活性 。
- 孟哲峰彭颖沈波吕建新
- 关键词：昆虫细胞肿瘤靶向治疗
- 血清CXCL10在子宫内膜异位症患者中低水平表达初探
- 从1885年Von Recklinghausen首次提出并命名子宫内膜异位症(内异症)至今,内异症作为"现代病",已成为生育年龄妇女的多发病、常见病。内异症是指具有生长能力及功能的子宫内膜组织出现在子宫腔以外部位者。对于...
- 傅鹰沈波余素飞孟哲峰徐巍何小帆
- 文献传递
- 成人急性白血病血小板活化和活化功能的研究被引量：5
- 2005年
- 为了用流式细胞术(FCM)微量全血法检测血小板活化状态和血小板活化功能,探讨其与成人急性白血病出血、浸润的关系,利用FCM检测成人急性白血病(AL)患者初诊期、缓解期(CR1)和持续长期缓解期(CCR)外周血血小板活化标志物CD62P、PAC-1的表达变化,并以健康体检者作对照组。结果表明:与健康组比较ADP激活前,AL组CD62P、PAC1表达高于对照组(P<0.001)。ADP激活后,AL组CD62P表达高于对照组(P<0.05),PAC1表达低于对照组(P<0.001);CR1组PAC1表达仍低于对照组(P<0.001),CD62P无差异;CCR组PAC1、CD62P无差异。无巨核细胞恶性病变组AL与伴有巨核细胞恶性病变组AL比较,血小板ADP激活前两组CD62P和PAC1无显著性差异;激活后伴有巨核细胞恶性病变组PAC1表达低于无巨核细胞恶性病变组(P<0.001)。结论:①AL患者外周血血小板存在较高水平的活化,提示血小板活化与肿瘤细胞相互作用可能是急性白血病患者存在广泛的浸润、出血的原因之一。②AL初发时血小板减少,同时伴有血小板活化功能异常,这种异常可能是骨髓白血病细胞恶性增生,导致骨髓巨核细胞生成减少或功能异常所致。
- 罗文达陈葆国孟哲峰李伯利朱敏郭群依
- 关键词：流式细胞术急性白血病血小板活化
- HIV-1感染上调细胞系中泛素样蛋白ISG15表达被引量：1
- 2013年
- 利用体外细胞感染模型,分别检测HIV-1感染的细胞系中转录和翻译水平ISG15的表达及细胞上清中p24蛋白水平,探讨HIV-1感染对ISG15表达的影响及后者对前者的抑制效应。6种HIV-1易感细胞系中,以IFN-α 2b刺激作为阳性对照,利用HIV-1感染性克隆pNL4-3转染293T、TZM-bl和HeLa细胞;HIV-1假病毒感染Jurkat、MT-4和THP-1细胞,24h收细胞提取RNA,利用荧光定量PCR(qPCR)的方法检测转录水平ISG15的表达情况。48h后收细胞提取总蛋白,Western blot检测蛋白水平ISG15的表达情况。HIV-1感染或转染后明显上调ISG15转录水平,且THP-1和TZM-bl细胞中上调尤为显著。但除了TZM-bl细胞,其他5种细胞系中没有表现出ISG15蛋白水平的上调。ISG15真核表达质粒与HIV-1感染性克隆pNL4-3共转染结果显示,293T细胞中ISG15能直接抑制HIV-1子代病毒颗粒的产生和成熟,并且这种抑制作用具有时间剂量依赖性;TZM-bl中虽然也有显著的抑制作用,但是趋势不同。HIV-1感染明显上调ISG15转录但却无ISG15蛋白产生,预示该病毒能对抗固有免疫细胞的识别活化及其效应功能,具体机制还有待进一步阐明。
- 吴还梅孙俊孟哲峰张晓燕徐建青
- 关键词：ISG15
- HIV-1感染对细胞内宿主因子TSG101及与Alix表达的影响被引量：1
- 2011年
- 探讨HIV-1感染宿主细胞后对其宿主蛋白肿瘤易感基因101蛋白(Tumor Susceptibility Gene 101,TSG101)及ALG-2相互作用蛋白X(ALG-2-interacting protein X,Alix)表达的影响。以HIV-1感染性克隆病毒pNL4-3感染TZM-bl PM1、Jurkat细胞株和人外周血单个核细胞(PBMCs),感染24h后收获细胞提取总RNA,逆转录PCR检测在RNA水平各因子的表达差异;感染48h后收获细胞提取总蛋白,Western-blot检测各因子在蛋白水平的表达差异。结果显示:HIV-1感染对原代PBMC与细胞系表达Alix与TSG101影响显著不同,细胞系主要表现为下调,而原代PBMC主要表现为TSG101上调;细胞系中的下调又细分为Jurkat细胞的Alix与TSG101的双下调、TZM-bl细胞的Alix单下调以及PM1细胞无影响三种情况。HIV-1感染对细胞宿主分子TSG101及Alix在RNA和蛋白水平的表达均有影响,这种影响因细胞的不同而有差异。HIV-1感染调节Alix与TSG101的机制生物学意义尚有待于进一步阐明。
- 胡辉亮孟哲峰张晓燕吕建新
- 关键词：HIV-1TSG101ALIX
- Scirpusin A和scirpusin B体外抗人类免疫缺陷病毒1型的作用
- 2014年
- Scirpusin A和scirpusin B是从药用植物中发现的2种天然茋类二聚体,具有一定的抗病毒效应。本研究利用人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)包膜和水疱性口炎病毒G蛋白(VSV-G)包膜的HIV假病毒及实验室适应株HIV-1ⅢB,在体外评价2种药物的抗病毒效果并初步探讨其作用机制。研究发现,scirpusin A和scirpusin B不仅能在体外有效抑制HIV假病毒感染TZM-bl细胞(一种HIV-1易感细胞),还能抑制实验室适应株HIV-1ⅢB。Scirpusin B的作用优于scirpusin A。对实验室适应株HIV-1ⅢB,scirpusin B的半数抑制浓度(IC50)为1.33μmol/L,scirpusin A的IC50为4.77μmol/L。此外,scirpusin A和scirpusin B还能抑制VSV-G包膜假病毒,提示其作用可能与病毒在细胞内的复制过程相关。Scirpusin A在病毒进入细胞后仍可发挥抑制作用,但具体机制尚待深入研究。
- 朱景玙杨国勋孟哲峰徐建青张晓燕
- 关键词：人类免疫缺陷病毒1型中药
- 急性髓系白血病细胞c-kit受体表达与外周血白细胞数量的关系探讨
- 目的探讨急性髓系白血病细胞C-Kit受体表达与外周血细胞WBC数量的关系。方法以流式细胞术分析54例髓系急性白血病患者骨髓细胞C-Kit受体表达及血细胞仪检测外周血WBC数量。结果低WBC组（61.14±27.28%）C...
- 李伯利陈葆国孟哲峰张丽
- 关键词：C-KIT急性髓系白血病白细胞计数
- 文献传递
- miRNA在HIV-1感染中的生物学功能
- 2013年
- 由人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)感染引发的艾滋病始终威胁着人类的健康和生命。根据联合国艾滋病规划署2012年最新报道,2011年全球新发HIV感染者约为250万,170万人死亡,截至2011年末约有3 400万人忍受着艾滋病的折磨。非洲、撒哈拉一带仍然是全球感染最严重的地区。
- 吴还梅孟哲峰张晓燕
- 关键词：MICRORNAS人类免疫缺陷病毒RNA干扰
- CXCL10基因对乳腺癌细胞株MCF-7肿瘤相关基因表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的构建CXCL10-pcDNA3．1（＋）重组质粒及稳定转染乳腺癌细胞系MCF-7细胞株，探讨CXCL10对MCF-7细胞株肿瘤相关基因表达的影响。方法从1干扰素（IFN-1）刺激的人外周血单个核细胞中克隆CXCL10基因，构建CXCL10-pcDNA3．1（＋）重组质粒，用CXCL10-pcDNA3．1（＋）和对照质粒pcDNA3．1（＋）分别以脂质体转染MCF-7细胞株，经G418筛选后获得稳定转染细胞株，以逆转录（RT）-PCR鉴定CXCL10基因表达，免疫印迹（WB）及ELISA鉴定CXCL10蛋白表达及分泌。以琼脂克隆形成实验分别计算实验组[转染CXCL10-pcDNA3．1（＋）的MCF-7细胞株]、对照组[pcDNA3．1（＋）的MCF-7细胞株]及未转染组（未转染的MCF-7细胞株）的细胞增殖活性；RT—PCR鉴定肿瘤相关基因基质金属蛋白酶9（MMP9）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）及信号转导和转录激活因子3（STAT3）在各细胞株中的表达。结果重组质粒CXCL10-pcDNA3．1（＋）及质粒pcDNA3．1（＋）稳定转染MCF-7细胞株构建成功；克隆形成率在实验组、对照组及未转染组分别为78．2％、79．9％及87．8％，3组间比较差异无统计学意义（χ2=3．8，P〉0．05）；实验组细胞能高效表达CXCL10mRNA，3组间比较差异有统计学意义（F=50．5，P〈0．01）；ELISA结果显示细胞培养上清液中CXCL10的表达量3组间比较，差异有统计学意义（F=54．8，P〈0．01）；MMP9基因转录水平在实验组、对照组及未转染组分别为0．067±0．003、0．103±0．007及0．085±0．026，均很低，且组间差异无统计学意义（F=4．2，P〉0．05）；VEGF在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0．183±0．003、0．787±0．019及0．789±0．011，3组间比较差异有统计学意义（F=2232，P〈0．01）；STAT3在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0．573±0．016、0．707±0．008及0．711±0．013，3组间比较差异有统计学意义（F=115，P〈0�
- 沈波傅鹰徐巍余素飞朱敏孟哲峰
- 关键词：乳腺肿瘤趋化因子CXCL10基因表达
- 基于全长基因组的HIV-1 CRF07_BC毒株流行特征及病毒基因功能研究
- CRF07_BC重组毒株是我国HIV主要流行毒株之一,该毒株传播和流行迅速,急需了解其流行株基因组特点和病毒生物学特征。本研究选择其主要流行地区——四川和新疆,进行代表株的基因组特征及地区间毒株传播关系的研究,同时,构建...
- 孟哲峰
- 关键词：感染性克隆
- 文献传递
