宋宁宁
- 作品数：7 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目公益性行业(农业)科研专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺的化学发光间接竞争免疫分析方法的建立被引量：6
- 2013年
- 将莱克多巴胺(RAC)与戊二酸酐反应,用混合酸酐法使反应产物与牛血清白蛋白(BSA)偶联生成免疫原,并采用淋巴细胞杂交瘤技术制备RAC单克隆抗体,建立检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺化学发光间接竞争免疫分析法。结果显示:飞行质谱法测得RAC-戊二酸单酯分子量为416.2,RAC-戊二酸单酯与BSA偶联比为3.4∶1;RAC单克隆抗体最佳稀释倍数为1∶8×104,包被抗原最佳质量浓度为0.5μg/mL;标准曲线呈线性,回归方程为Y=-0.188 2x+0.392 2,R2=0.993 4,IC50值为0.267 ng/mL;与RAC类似化合物及其他药品无明显的交叉反应。尿样回收率为76.8%～90.8%,批内变异系数为6.8%～11.5%,批间变异系数为7.2%～13.8%;猪肉样回收率为75.2%～87.4%,批内变异系数为7.1%～11.6%,批间变异系数为8.6%～14.1%。结果表明:用RAC-戊二酸单脂与BSA偶联物作免疫原成功地研制了针对RAC的特异性抗体,以单抗为基础建立了检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺化学发光间接竞争免疫分析法,为进一步研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。
- 王权赵新宇蒋蔚陈永军刘迎春宋宁宁石金磊
- 关键词：莱克多巴胺单克隆抗体
- 一种抗流感病毒的单链抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种抗流感病毒的单链抗体ScFv及其制备方法和应用，以及编码该单链抗体的基因，含有该基因的载体和宿主细胞等。该抗流感病毒的单链抗体，其是下列蛋白质之一：1)由抗体重链可变区和轻链可变区通过接头肽连接而成的单链...
- 蒋蔚王权陈永军刘迎春史子学马志永顾惠明杨康宋宁宁石金磊李欣彤
- 文献传递
- 五种中草药对弓形虫体外增殖的抑制效果
- 探索治疗弓形虫病的有效药物组方,从而为临床合理用药提供科学的指导,通过体外试验,培养Ana-1细胞作为弓形虫宿主细胞,采用MTT法测定了甘草、黄答、百部、苦参和贯众5种中药对细胞的安全浓度,将弓形虫RH株速殖子与Ana-...
- 荆振宇蒋蔚陈永军杨康宋宁宁崔常勇王权
- 关键词：刚地弓形虫中草药体外
- 呋喃妥因残留代谢物人工抗原的合成与鉴定被引量：2
- 2012年
- 利用对醛基苯甲酸对呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(1-Aminohydantoin hydrochloride,AHD)进行衍生化,衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)通过混合酸酐法与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联,用紫外扫描(UV)和变性凝胶电泳(SDS-PAGE)对偶联物进行验证。将偶联成功的人工全抗原(CPAHD-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过间接酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清抗体效价为1:32 000。用间接竞争ELISA鉴定抗体特性,结果显示:抗体对AHD与对硝基苯甲醛的衍生物(NPAHD)的灵敏度高,IC50为30.63μg/L,特异性好,与CPAHD有部分交叉反应外,与其他3类硝基呋喃类药物及代谢产物无交叉反应(交叉反应率<0.01%)。结果表明,用CPAHD-BSA作免疫原免疫小鼠可诱导产生针对AHD衍生物(NPAHD)的特异性抗体,为进一步制备AHD单克隆抗体和研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。
- 宋宁宁刘迎春陈永军蒋蔚石金磊杨康王权
- 关键词：人工抗原
- 五种中草药对弓形虫体外增殖的抑制效果被引量：13
- 2011年
- 探索治疗弓形虫病的有效药物组方,从而为临床合理用药提供科学的指导,通过体外试验,培养Ana-1细胞作为弓形虫宿主细胞,采用MTT法测定了甘草、黄芩、百部、苦参和贯众5种中药对细胞的安全浓度,将弓形虫RH株速殖子与Ana-1细胞在含不同浓度药物的细胞培养液中共同培养,在加药后第4、8、12、24、48小时,观察细胞和弓形虫的生长状态和形态,选取第48小时观察药物体外抑制虫体增殖的效果,并以磺胺嘧啶钠作为阳性药物对照。结果显示,黄芩、百部、甘草可显著抑制弓形虫的增殖,而贯众和苦参效果不佳。
- 荆振宇蒋蔚王权陈永军杨康宋宁宁崔常勇
- 关键词：刚地弓形虫中草药体外
- 抗猪流感噬菌体单链抗体库的构建与筛选被引量：3
- 2012年
- 利用噬菌体展示技术构建猪流感病毒噬菌体抗体库,并筛选出猪流感高特异性、高亲和力的单链抗体(scFv)。以猪流感病毒免疫BALB/c小鼠,提取脾细胞总RNA,反转录后以cDNA为模板扩增获得VH基因和VL基因,并采用重叠延伸PCR(SOE-PCR),用柔性多肽Linker接头(Gly4Ser)按VH-Linker-VL方式将VH基因和VL基因拼接成scFv基因片段。将scFv基因和pCANTAB5E载体分别双酶切(SfiⅠ/NotⅠ)后连接,转化宿主菌TG1,经过辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体单链抗体库。以猪流感病毒为抗原包被96孔酶标板,经过3轮的亲和富集筛选,用Phage-ELISA鉴定阳性重组抗体。本研究成功构建出库容约为4×106cfu/mL抗猪流感病毒的单链抗体库,并筛选出4株特异性抗猪流感病毒的scFv抗体,能够与鼠源阳性多抗进行竞争结合猪流感病毒,为抗猪流感病毒转基因猪的研究奠定基础。
- 杨康蒋蔚刘迎春陈永军孙卫东宋宁宁王权
- 关键词：猪流感病毒噬菌体展示技术单链抗体
- 一种抗流感病毒的单链抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种抗流感病毒的单链抗体ScFv及其制备方法和应用，以及编码该单链抗体的基因，含有该基因的载体和宿主细胞等。该抗流感病毒的单链抗体，其是下列蛋白质之一：1)由抗体重链可变区和轻链可变区通过接头肽连接而成的单链...
- 蒋蔚王权陈永军刘迎春史子学马志永顾惠明杨康宋宁宁石金磊李欣彤
- 文献传递
