金建刚
- 作品数：19 被引量：70H指数：4
- 供职机构：解放军第309医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细胞因子在白血病异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病中的水平及其意义被引量：3
- 2007年
- 目的:探究细胞因子TNF-α、IL-6和IL-8在白血病异基因造血干细胞移植后的变化和病情及预后的关系。方法:用放射免疫分析检测了白血病异基因造血干细胞移植患者(48例)、正常健康人(30例)血清TNF-α、IL-6和IL-8水平,对移植后发生或未发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)及发生或未发生慢性移植物抗宿主病(cGVHD)进行了比较,并对预后也进行比较。结果:急、慢性GVHD组与未发生急、慢性GVHD组患者的血清TNF-α、IL-6及IL-8水平均高于正常对照组(P<0.05,除未发生cGVHD组的TNF-α浓度低外);急、慢性GVHD组与未发生急、慢性GVHD组比血清TNF-α、IL-6及IL-8水平均升高(P<0.05);移植后死亡组生存时间≤6月及>6月(除>6月的IL-8水平外)各组TNF、IL-6与IL-8水平均高于同期的存活组(P<0.05)。结论:异基因造血干细胞移植术后动态监测TNF、IL-6、IL-8水平变化有助于对发生aGVHD或cGVHD的可能提供另一种检测方法,并对判断愈后有一定的临床意义。
- 叶丽萍叶一秀施兵刘丽辉金建刚俞志勇户江伟陈虎
- 关键词：细胞因子造血干细胞移植移植物抗宿主病
- 受者同系骨髓间充质干细胞对大鼠心脏移植急性排斥反应的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察受者同系骨髓间充质干细胞（MSC）对大鼠心脏移植急性排斥反应的影响,并初步探讨其免疫调节机制。方法成年雄性Wistar大鼠20只为受体,随机分为空白对照组和MSC处理组,每组10只,行Lewis大鼠→Wistar大鼠颈部心脏移植。空白对照组手术后24h,经尾静脉注射3ml 0.9%氯化钠注射液;MSC处理组手术后24h,经尾静脉注射MSC2×10~6（悬浮在3ml 0.9%氯化钠注射液中）。术后1周,每组随机取4只大鼠,进行组织学检查及下腔静脉血检测血清白介素（IL）-2及IL-10水平。其余6只用以继续观察移植物存活时间。结果 （1）空白对照组大鼠移植心脏存活（7.2±1.3）d,MSC处理组大鼠移植心脏存活（14.8±2.9）d,差异显著（P〈0.01）。（2）血清IL-2空白对照组为（233.99±30.19）ng/L,MSC处理组为（249.11±20.34）ng/L,两组无统计学差异（P〉0.05）;血清IL-10空白对照组为（81.44±11.01）ng/L,MSC处理组为（158.39±18.70）ng/L,差异显著（P〈0.01）。（3）病理学分级,空白对照组3B级1例、4级3例,MSC处理组2级1例、3A级2例、3B级1例,MSC处理组病理分级总体较空白对照组低。结论静脉注射受者同系骨髓MSC,可以延长大鼠颈部移植心脏的存活时间,减轻急性排斥反应的程度。
- 刘德忠刘奎利金建刚李海斌石炳毅孙锁柱龙宪连张晓毅邹练
- 关键词：心脏移植免疫抑制移植物排斥
- 大鼠脐带源间充质干细胞的分离及生物学性状被引量：4
- 2010年
- 背景:关于大鼠骨髓来源的间充质干细胞用于移植免疫耐受及进行组织修复的研究很多,但尚无脐带来源间充质干细胞的相关研究。目的:建立从大鼠脐带分离间充质干细胞的方法,并观察其生物学性状。方法:大鼠脐带经酶消化和组织块培养两种方法进行分离培养,于DMEM-LG培养基中培养,倒置显微镜观察细胞形态,细胞计数绘制生长曲线,流式细胞仪测定细胞周期及细胞表型,免疫组织化学染色检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力。结果与结论:两种方法均能成功地从大鼠脐带中获得大量的间充质干细胞:原代培养显示,胶原酶消化法比组织块培养法的效率更高,大约10d就可以进行传代,而组织块培养法要14d才能传代;传代扩增两者之间没有差别。免疫表型分析显示,大鼠脐带源细胞表达黏附分子和基质细胞标记CD90、CD106,不表达造血细胞标记CD34、CD45。体外诱导实验证实,大鼠脐带间充质干细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。
- 刘奎利石炳毅刘德忠金建刚李海斌史迎昌冯凯肖漓
- 关键词：脐带间充质干细胞生物学性状脐带干细胞
- 受者同系骨髓间充质干细胞对心脏移植大鼠的免疫调节作用被引量：4
- 2012年
- 目的观察静脉注射受者同系骨髓间充质干细胞(MSC)对大鼠心脏移植免疫反应的影响。方法以20只成年雄性Lewis大鼠作为心脏供体,20只成年雄性Wistar大鼠作为受体,将其随机分为2组,每组10只,行颈部心脏移植:对照组(A组)手术后24h,经尾静脉注射3ml 0.9%氯化钠注射液;MSC处理组(B组)手术后24h,经尾静脉注射2×106个MSC(悬浮于3ml 0.9%氯化钠注射液中)。术后1周,每组随机取受体大鼠4只,检测静脉血及移植物CD4+、CD8+、CD4+CD25high、CD4+CD25highfoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例,计算CD4+/CD8+比值。其余6只大鼠用于继续观察移植物存活时间。结果 A组大鼠移植心脏存活7.2±1.3d,B组大鼠移植心脏存活14.8±2.9d,两组间差异有统计学意义(P<0.01)。B组静脉血中CD4+/CD8+值、CD4+CD25highT细胞占总淋巴细胞的比例、CD4+CD25highFoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例(分别为1.18±0.07、2.51%±0.56%、2.05%±0.62%)均明显高于A组(分别为0.49±0.05、0.96%±0.19%、0.82%±0.09%),差异有统计学意义(P<0.01)。移植心脏中CD4+/CD8+值在两组间无统计学差异(P>0.05);B组移植心脏中CD4+CD25highT细胞及CD4+CD25highFoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例(分别为2.74%±0.28%、2.54%±0.31%)均明显高于A组(分别为0.61%±0.06%、0.53%±0.06%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论静脉注射受者同系骨髓MSC可诱导大鼠心脏移植免疫耐受,延长移植心脏的存活时间。
- 刘德忠石炳毅刘奎利金建刚李海斌肖漓张晓毅邹练
- 关键词：间质干细胞心脏移植免疫调节移植物排斥
- 人骨髓间充质干细胞体外对异基因T淋巴细胞表型的影响被引量：27
- 2005年
- 为了研究间充质干细胞 (mesenchymalstemcell,MSC)的免疫调节作用 ,探讨防治异基因骨髓移植中移植物抗宿主病 (GVHD)和移植排斥反应 (HVGR)的可能途径 ,从人骨髓中分离培养间充质干细胞 ,并通过其形态的均一性及流式细胞术检测表面标志以鉴定其纯度 ,将MSC分别以 8× 10 4 (A组 )、4× 10 4 (B组 )和 2× 10 4 (C组 )个细胞 孔分别接种于 6孔板 ,并与经分离的外周血T淋巴细胞共培养 7天 ,以单独培养的外周血T淋巴细胞为对照组 ,用流式细胞仪分别在培养 0、2 4、72小时和 7天测定各组T细胞上CD3、CD4、CD8、CD2 5表达的变化。结果表明 :T细胞和MSC共培养组与T细胞单独培养组相比 ,A组和B组CD4 + CD2 5 + 免疫调节性T细胞和CD8+ T细胞明显增多 ,A组和B组之间无明显差别。实验组和对照组相比CD3、CD4、CD2 5表达无明显差别。结论 :骨髓MSCs在体外可使外周血T细胞表型发生改变 ,CD4 + CD2 5 + 免疫调节性T细胞和CD8+ T细胞明显增多 ,本研究结果为临床异基因造血干细胞移植预防GVHD时MSCs的输注数量提供了参考。
- 宁红梅金建刚扈江伟冯凯陈虎
- 关键词：间充质干细胞CD4^+CD25^+T细胞CD8^+T细胞GVHD免疫耐受
- 间充质干细胞诱导体外分化来的初始T细胞表型变化的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的将体外由CD34^＋细胞分化而来的初始T细胞与异基因骨髓间充质干细胞（MSC）共孵育，观察初始T细胞表型的变化。方法传3代以上的MSC与脐血CD34^＋刍细胞分化的初始T细胞共孵育1周，用流式细胞仪检测其表型变化。结果与对照组相比，CD8^＋细胞明显增加（共孵育组（35．9±6．3）％，单纯初始T细胞培养组（18．4±4．5）％]，且CD8^＋；CD3^＋细胞明显增加[共孵育组（27．6±2．8）％，单纯初始T细胞培养组（15．2±3．1）％]。结论骨髓MSC在体外与异基因初始T淋巴细胞共孵育使CD8^＋初始T细胞表达增加，这种变化可能与其诱导免疫耐受相关。
- 金建刚冯凯石炳毅陈虎
- 关键词：间质干细胞初始T细胞免疫调节
- 套管法建立同系与异系大鼠颈部心移植模型的比较被引量：3
- 2010年
- 目的：观察套管法建立同系与异系大鼠颈部心移植模型后的动物存活与形态学变化，进而探讨该方法的操作技巧，以提高成功率。方法：套管法制备同系（Wistar-Wistar）与异系（Lewis—Wistar）大鼠颈部心移植模型，另对异系移植动物行腹腔注射环胞霉素。术后观察移植物的搏动，并记录每组动物存活时间。移植后7d，移植心切片行H—E染色，按照国际心脏与肺移植协会制定的标准对其组织病理变化进行分级。结果：同系、异系动物间移植后，其存活率分别为（27．5±6．1）d和（7．2±1．3）d。环胞霉素的施加，可将异系移植的存活时间提高至30d以上。异系移植可致明显急性排斥反应，其病理分级以4级为主，远较同系移植和环胞霉素处理为高。结论：环胞霉素可有效缓解因异系心移植所致的急性排斥反应，延长动物存活时间。在确保良好供心的基础上，防止出血和血栓形成是模型成功制备的关键。
- 刘德忠刘奎利金建刚李海斌张晓毅孙锁住邹练石炳毅
- 关键词：心脏移植套管法
- 异基因骨髓移植小鼠GVHD模型的建立被引量：4
- 2007年
- 目的：建立异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病（GVHD）模型。方法：将供体C57BL／6雄性小鼠骨髓细胞和脾细胞按不同细胞数混合，输入接受照射后的受鼠雌性BALB／c小鼠，观察受鼠的一般情况、生存期、组织病理学和嵌合体检查。结果：给予5×10^6个以上的供者脾细胞的各组小鼠都发生了急性GVHD，但小鼠GVHD出现的时间不同。结论：成功地建立了异基因骨髓移植小鼠GVHD模型，输入5×10^6-5×10^7个供鼠脾细胞均适用于小鼠GVHD防治的研究，可以根据实验需要选择供鼠脾细胞的数量。
- 扈江伟金建刚王莉莎宁红梅俞立权冯凯陈虎
- 关键词：异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病
- 酶联免疫斑点试验检测技术在血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病诊断中的应用被引量：7
- 2010年
- 目的评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测外周血中结核分枝杆菌抗原特异性γ干扰素水平,在诊断免疫功能低下的血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性的结核病患者时的应用价值。方法采用以结核分枝杆菌特异性重组ESAT-6和CFP-10融合蛋白为刺激抗原的ELISPOT检测技术,分析了51例发热的血液病怀疑合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病患者的外周血,作能分泌结核特异的γ干扰素的T淋巴细胞测定,以传统的诊断方法为对照。结果确诊血液病合并结核病24例,排除活动性结核病27例;ELISPOT的灵敏度为73.6%,高于PPD皮肤试验的54.5%(P<0.05),高于抗结核抗体试验的37.5%(P<0.01);准确度82.6%高于抗结核抗体的62.5%(P<0.05),高于PPD的77.77%;特异度88.88%,与抗结核抗体检测(87.5%)及PPD(93.75%)相似;ELISPOT与抗结核抗体、PPD试验结果联合分析,其诊断率为79.2%。此外,ELISPOT检测结果与性别、年龄、结核病史、抗结核抗体、机体免疫状态、外周血淋巴细胞数等影响因素之间的相关性进行了初步探讨。结论ELISPOT是血液病患者合并活动性结核的重要辅助诊断工具。
- 叶丽萍梁艳施兵刘丽辉金建刚张玉珠胡文清刘明娟阳幼荣陈虎吴雪琼
- 关键词：血液病结核病酶联免疫斑点试验
- MSCs诱导移植物免疫耐受的研究进展被引量：2
- 2009年
- 上世纪60-80年代，Friedenstein和他的同事发现骨髓细胞培养后有一种贴壁生长的成纤维样细胞可以在体内成骨，称之为骨髓间充质干细胞（MSCs）。随后发现，作为多系细胞的祖细胞，MSCs可以从脂肪组织、胎肝和脐带等多种组织中分离出来，在体内外可以分化为多种间充质组织，故可用于再生医学领域。另外，MSCs还具有免疫调节活性，在体外阻断T细胞增殖，
- 金建刚冯凯石炳毅
- 关键词：间充质干细胞免疫耐受
