刘丹丹
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：吉首大学生物资源与环境科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省科技计划项目湖南省大学生研究性学习与创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 红斑丹毒丝菌SpaA蛋白保护区域的免疫学检测被引量：4
- 2013年
- 为了确定菌体表面保护性抗原A(SpaA)的免疫保护区域,通过PCR从红斑丹毒丝菌C43065株基因组DNA中分别扩增出编码成熟SpaA及其N端342个氨基酸序列(SpaA-N)和C端160个氨基酸序列(SpaAC)的基因片段,将它们分别克隆到表达载体pET32a上,转化入大肠埃希菌BL21,IPTG诱导,亲和层析法纯化重组蛋白,并检测它们对小鼠的保护作用。SDS-PAGE结果显示重组SpaA、SpaA-N和SpaA-C以可溶性形式表达在大肠埃希菌BL21细胞质中并具有良好的免疫原性。保护试验结果表明重组SpaA、SpaA-N和NaOH提取抗原完全保护小鼠受强毒株C43065的致死性感染,但重组SpaA-C没有保护作用。结果表明SpaA-N可以作为预防猪丹毒的亚单位疫苗。
- 刘丹丹恩特马克.布拉提白杨振龙吾鲁木汗.那孜尔别克
- 关键词：红斑丹毒丝菌原核表达
- Pseudomonas koreensis JDM-2株ACC脱氨酶基因的克隆和表达被引量：2
- 2011年
- 应用PCR从杜仲内生Pseudomonas koreensis JDM-2株基因组中扩增出ACC脱氨酶基因acdS,将其克隆到pMD18-T载体并段进行DNA测序,通过BamHⅠ和HindⅢ酶切从重组质粒pMD18ACDS中切下acdS基因序列,将其连接到pQE30质粒的BamHⅠ和HindⅢ位点,构建表达质粒pQE30ACDS,转化大肠杆菌BL21,利用比色法测定ACC脱氨酶活力.测序结果表明,JDM-2菌株acdS基因大小为1 017bp,与已报道不同菌种acdS基因的同源性在86%～99%之间.SDS-PAGE结果显示在大肠杆菌BL21中表达了分子量为38kDa的ACC脱氨酶.酶活性检测结果显示重组菌ACC脱氨酶的酶活力为0.214U/mg.
- 龚凤娟张宇凤刘丹丹恩特马克.布拉提白吾鲁木汗.那孜尔别克
- 关键词：PSEUDOMONASACC脱氨酶
- 猪丹毒丝菌C43065株spaA基因缺失突变株的构建及其生物学功能
- 大量研究表明,红斑丹毒丝菌是猪丹毒的病原体,而64kDa的SpaA蛋白是该菌的主要保护性抗原,可作为研制猪丹毒亚单位疫苗的靶抗原。但是关于SpaA的免疫保护区域及其致病性尚未清楚。因此,本论文为确定SpaA免疫保护区域及...
- 刘丹丹
- 关键词：猪丹毒红斑丹毒丝菌免疫保护生物学功能
- 文献传递
- 红斑丹毒丝菌C43065株spaA基因的克隆和表达
- 2013年
- 通过PCR从红斑丹毒丝菌C43065株基因组DNA中扩增出编码信号肽除外的成熟SpaA蛋白基因spaA,将其克隆到表达载体pET32a的BamHⅠ和HindⅢ位点上,构建重组表达质粒pET-spaA,转化大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下表达N端带有Trx标签的融合蛋白rSpaA,SDS-PAGE检测表达蛋白.DNA测序结果表明,spaA基因大小为1794bp,编码由597个氨基酸残基组成的成熟SpaA蛋白,SDS-PAGE结果显示在大肠杆菌BL21中成功表达了分子量约为86kDa的重组rSpaA,为进一步开展SpaA保护区域的研究奠定基础.
- 刘丹丹杨振龙吾鲁木汗.那孜尔别克
- 关键词：红斑丹毒丝菌克隆原核表达
- 杜仲内生ACC脱氨酶活性细菌的分离鉴定及抑菌活性检测
- 采用富集筛选法从杜仲根中分离到5株具有ACC脱氨酶活性的内生细菌，利用纸片法测定它们的抑菌活性，通过生理生化试验和16S rRNA序列分析对分离菌株进行鉴定，并用大肠杆菌表达系统对ACC脱氨酶进行表达.结果显示：5株杜仲...
- 龚凤娟刘丹丹恩特马克·布拉提白吾鲁木汗·那孜尔别克
- 关键词：内生菌ACC脱氨酶抑菌实验
- 文献传递
- 赤红球菌JDM312环己酮单加氧酶的原核表达及检测
- 2011年
- 通过酶切法从重组质粒pUC18-chnB中得到编码环己酮单加氧酶的chnB基因序列,将其定向插入原核表达载体pQE30中,构建重组质粒pQE30-chnB,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达目的蛋白,用SDS-PAGE电泳检测表达产物.测序结果表明chnB基因大小为1 623bp,编码由540个氨基酸残基构成的多肽.SDS-PAGE结果显示,表达分子量约为60kDa的带有6×His标签的环己酮单加氧酶,与预期分子量相符,表明成功构建出原核表达质粒并实现了目的蛋白表达,为进一步开展环己酮单加氧酶活性研究奠定了基础.
- 彭哲慧龚凤娟刘丹丹吾鲁木汗.那孜尔别克
- 关键词：原核表达
