- Smad2和Smad4蛋白在成年大鼠睾丸的表达被引量：4
- 2001年
- 目的 探讨转化生长因子 β超家族肽类的细胞内信号转导分子Smad 2和Smad 4蛋白在成年大鼠睾丸的表达及在精子发生中的作用机理。 方法 用免疫组织化学ABC法结合葡萄糖氧化酶 DAB 硫酸镍铵增强技术 ,检测成年大鼠睾丸Smad 2和Smad 4蛋白的表达和定位。 结果 Smad 2蛋白主要表达在大鼠睾丸生精小管的精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞、支持细胞和间质细胞中 ,免疫反应物质主要定位于细胞质 ,胞核为阴性 ;而Smad 4蛋白则主要表达于间质细胞的胞质中 ,支持细胞呈弱阳性染色。 结论 Smad 2蛋白主要表达于睾丸生精小管各级生精细胞 ,Smad 4蛋白表达于间质细胞 ,为揭示TGF
- 胡静张远强王红张金山许若军
- 关键词：TGF-ΒSMAD2SMAD4精子发生睾丸
- Smads蛋白在大鼠睾丸发育不同阶段的表达和定位被引量：8
- 2001年
- 探讨转化生长因子 β超家族肽类的细胞内信号转导分子Smads蛋白在发育不同阶段大鼠睾丸的表达及在精子发生中的作用机理。分别选用出生后 3、 7、 14和 2 8d以及成年大鼠 ,应用蛋白质免疫印迹杂交技术及免疫组织化学ABC法结合葡萄糖氧化酶 DAB 硫酸镍铵增强技术 ,检测Smad 1、Smad 2、Smad 4和Smad 5蛋白在大鼠睾丸的表达、定位和发育变化 ,并通过图像分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析。免疫印迹杂交发现 ,Smad 1、Smad 2和Smad 4在 3、 7、 14和 2 8d以及成年大鼠睾丸均有蛋白质表达 ,Smad 5蛋白则仅表达于 2 8d和成年大鼠睾丸。免疫组织化学结果显示 ,Smad 1在 14d大鼠睾丸的生精细胞中即可见免疫阳性反应 ;Smad 2从 7d起开始表达 ,免疫阳性产物位于各级生精细胞的胞质内 ;Smad 4在发育的各个阶段的间质细胞中均有较强的表达 ;Smad 5仅在 2 8d和成年大鼠的间质细胞中有弱的表达。结果提示 :Smads蛋白在睾丸中的分布不同 ,表达量存在差异 ,为揭示TGF
- 胡静张远强刘新平王瑞安许若军
- 关键词：睾丸转化生长因子-ΒSMADS蛋白发育阶段
- H_4受体介导组胺刺激AtT-20细胞分泌ACTH被引量：1
- 2006年
- 目的阐明介导小鼠垂体前叶瘤细胞株(AtT-20)分泌促肾上腺皮质激素(ACTH)的组胺(HA)受体亚型.方法体外培养AtT-20细胞,ELISA检测各HA受体亚型的激动剂和拮抗剂对AtT-20细胞分泌ACTH的影响;利用RT-PCR方法检测AtT-20细胞中H4受体mRNA的表达.结果①HA(10-8mol/L)作用于AtT-20细胞6h,ACTH分泌量(pmol/L)增加(5.7±1.1),与对照组相比(2.7±0.6)有显著差异(P<0.01);而组胺H1受体特异性拮抗剂扑尔敏(5.7±0.7)和H2受体特异性拮抗剂雷尼替丁(5.8±1.0)不能拮抗此效应.②HAH3和H4受体激动剂R-(α)-甲基组胺(10-7mol/L)同HA作用相似,能够促进AtT-20细胞分泌ACTH(5.9±1.3).③HAH4受体的特异拮抗剂JNJ777120(1-[(5-Chlo-ro-1H-indol-2-yl)carbonyl]-4-methylpiperazine)能够剂量依赖性拮抗HA促进AtT-20细胞释放ACTH的效应,当浓度为10-5mol/L时,HA的效应被完全阻断.④RT-PCR结果证实,在AtT-20细胞中存在组胺H4受体mRNA的内源性表达.结论HA调控AtT-20细胞分泌ACTH的作用由H4受体介导.
- 孟嘉谢建军杨铁虹王海芳李明凯胡静罗晓星
- 关键词：组胺促肾上腺皮质激素
- 荧光分光光度法检测组织中的组胺被引量：12
- 2007年
- 目的建立组织中释放组胺的检测方法。方法采用邻苯二甲醛（OPA）对组织中释放的组胺（HA）进行衍生，对衍生物进行激发与发射波长扫描。采用Na3PO4沉淀组织液中的干扰离子。结果组胺-邻苯二甲醛衍生物的最大激发波长和发射波长分别为347nm和442nm，Na3PO4能够有效地消除Ca^2＋和Mg^2＋对荧光的淬灭作用。该法测定组胺的工作曲线回归方程为F=1．584C＋40．392，相关系数r=0．9995，线性范围为9．01×10^-9～9．01×10^-7mol／L，检出限为4．51×10^-9mol／L。高、中、低浓度组胺的回收率为91．9％～115．8％。结论该方法可用于检测组织中释放的组胺，无须提取，操作简便、快捷，效果可靠。
- 何功浩周四元胡静孟静茹王慧罗晓星
- 关键词：荧光分光光度法组胺邻苯二甲醛
- 组胺在豚鼠颈上神经节投射到心脏交感神经纤维中的表达被引量：4
- 2008年
- 目的探讨组胺在豚鼠颈上神经节投射到心脏交感神经纤维中的表达,及其与去甲肾上腺素的共存,为组胺可能是心脏交感神经系统新发现的递质提供形态学证据。方法生物素化葡聚糖胺(BDA)顺行追踪结合组胺和去甲肾上腺素免疫荧光三标技术。结果将BDA注入颈上神经节后,左、右心房和心室均有其投射的交感神经纤维,同时在这些示踪纤维中亦有组胺和组胺/去甲肾上腺素共存的免疫阳性表达。结论豚鼠颈上神经节投射到心脏交感神经纤维中有组胺的表达并与去甲肾上腺素共存。
- 胡静李明凯张远强何功浩罗晓星
- 关键词：组胺去甲肾上腺素交感神经颈上神经节免疫荧光
- 嗜水气单胞菌抗独特型单克隆抗体的制备和初步鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:制备嗜水气单胞菌(Aerom onas hydophila)抗独特型单克隆抗体(AIdmAb)并进行鉴定。方法:以具有中和作用的抗嗜水气单胞菌mAb1G10免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备嗜水气单胞菌AIdmAb。用ELISA法对mAb的效价及其模拟嗜水气单胞菌的特性进行鉴定。结果:获得4株能稳定分泌嗜水气单胞菌AIdmAb的杂交瘤细胞株,分别命名为1F9、1H10、3F5、4G3。经测定杂交瘤细胞腹水mAb效价为10-4～10-5。竞争抑制实验结果表明4株AIdmAb均能不同程度地抑制嗜水气单胞菌与兔抗嗜水气单胞菌多克隆抗体结合,其中两株1F9、1H10具有较强的抑制作用。用作制备抗独特性抗体腹水的小鼠,其血清均能检测与嗜水气单胞菌进行免疫结合的抗体,经ELISA检测,其效价为1:100～1:1000。结论:成功地制备了产生嗜水气单胞菌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株,为制备该菌的抗独特性抗体疫苗奠定了基础。
- 张星胡静赵锋屈景辉刘玉林
- 关键词：疫苗嗜水气单胞菌杂交瘤
- CD226在猴睾丸分布的免疫组织化学研究
- 2001年
- 胡静王红张远强张金山陈丽华孙岚金伯泉
- 关键词：PTA1睾丸免疫组织化学恒河猴CD226
- 成年大鼠睾丸Smad1和Smad5的免疫组织化学研究被引量：5
- 2001年
- 目的 :探讨骨形态形成蛋白的细胞内信号传导分子Smad1和Smad5蛋白在成年大鼠睾丸内的表达。 方法 :应用免疫组织化学ABC法结合葡萄糖氧化酶 DAB 硫酸镍铵增强技术 ,检测成年大鼠睾丸Smad1和Smad5蛋白的表达和定位。 结果 :Smad1蛋白表达于大鼠睾丸精曲小管的各级生精细胞的胞质内 ,呈淡染的紫蓝色颗粒 ,胞核为阴性 ,免疫染色阳性细胞主要包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞 ;而Smad5蛋白阳性染色不明显 ,只有睾丸间质细胞呈弱阳性反应 ,免疫反应阳性物质主要定位于细胞质。 结论 :Smad1蛋白主要表达于睾丸精曲小管各级生精细胞 ,Smad5蛋白表达于间质细胞 ,为揭示TGF β超家族在精子发生中的分子机理提供了直接证据。
- 胡静张远强王红张金山许若军
- 关键词：BMPSSMAD1SMAD5精子发生免疫组织化学
- 肺泡巨噬细胞ADAR1基因在急性肺损伤中表达的变化被引量：3
- 2006年
- 目的:观察肺泡巨噬细胞(alveolar macrophag-es,AMs)RNA腺苷脱氨酶1(adenosine deaminase act-ing on RNA,ADAR1)基因(ADAR1基因)在急性肺损伤中的变化,探讨该基因在急性肺损伤病理变化中可能发挥的作用。方法:采用气管内滴注脂多糖(li-popolysaccharides,LPS)的方法制备急性肺损伤模型,经瑞氏染色计数急性肺损伤大鼠肺泡灌洗液中AMs、中性粒细胞(polymorphonuclear leukocytes,PMNs)并计算各自所占比例;以RT-PCR方法观察ADAR1基因在急性肺损伤中表达的变化。结果:气管内滴注脂多糖(2.5 mg.kg-1)成功制备的急性肺损伤模型中,肺泡灌洗液中细胞总数随时间变化而变化,由对照组的1.74×106增加至炎症反应6 h时17.13×106,9 h时17.00×106。AMs所占细胞总数的比例则由98%下降为21%,而其绝对数量随时间的推移不断的上升,尤其以6 h和9 h为著。ADAR1基因在急性肺损伤肺泡巨噬细胞中呈现时间依赖性的升高。结论:内毒素诱导的急性肺损伤模型中,AMs绝对数量显著上升,且其中ADAR1基因表达呈时间依赖性的升高,提示ADAR1基因可能在急性肺损伤发病过程及病理发展中发挥了重要的作用。
- 吴玉梅马雪熊晓云孟静茹胡静李明凯罗晓星
- 关键词：急性肺损伤肺泡巨噬细胞脂多糖肺泡灌洗液
- EDS诱导小鼠睾丸间质细胞TM3凋亡中NDRG2的表达及意义被引量：2
- 2012年
- 目的探讨N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene 2,NDRG2)是否参与睾丸间质细胞的凋亡。方法选用小鼠睾丸间质细胞系TM3作为实验对象,建立体外的1,2-二甲磺酸乙烷(EDS)诱导睾丸间质细胞凋亡模型。用含有500、750μg/mL EDS的培养基刺激TM3细胞,以Western blot、Real-time PCR、流式细胞术等方法检测TM3细胞凋亡及NDRG2的表达变化。结果随EDS浓度增高,诱导小鼠睾丸间质细胞发生凋亡的比率升高,并且在EDS诱导的小鼠睾丸间质细胞中,NDRG2的表达较对照组呈现剂量依赖性增高。结论 NDRG2可能参与到睾丸间质细胞的凋亡。
- 吴利平韩亚娟朱航李腾胡静张远强
- 关键词：睾丸间质细胞凋亡
